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《分子生物学》试卷

2010-03-15  彩云追竹

一、基本概念(共 20  分,每小题 2  分)

1.DNA结构的不均一性:反向重复序列又称回文序列,富含A/T的序列,富含G/C的序列,高度重复序列。

2.单链结合蛋白(SSB蛋白):在DNA复制过程中,双螺旋打开进行复制,为保持单链结构,单链结合蛋白结合在DNA的一条链上。

3.无义突变:核苷酸的突变成终止密码子(UAG、UGA、UAA),使蛋白质合成提前终止,合成无功能和无意义的多肽,这种突变称为无意义突变。

4.小核RNA( snRNA):是一类称为小核核蛋白体复合体(snRNP)的组成成分,功能是在hnRNA成熟转变为mRNA的过程中,参与RNA的剪接,运输。

5.核心启动子元件:指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的最少的DNA序列,包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区。

6.信号识别颗粒:含有300个核苷酸的7S小分子RNA(小胞浆scRNA)及6种蛋白质的核糖核蛋白,在信号肽出现后,能识别并引导肽链跨膜转运。

7.考斯质粒:由于λ-DNA包装蛋白只识别粘性末端的一小段顺序cos区。将这段DNA与质粒连在一起,构建的重组质粒,可装载DNA(32~45.5kb)。

8.复杂转录单位:转录产物可通过不同的方式加工成两个或两个以上的mRNA。利用多个剪接位点,多个加poly(A)位点,可得到不同的蛋白质。

9.帽子结合蛋白(CBP):能专一识别帽子结构的蛋白,具有促进有帽子mRNA的蛋白质合成的活性。

10.限制性片段长度多态性:DNA 顺序发生了突变,使突变所在部位的某种限制性内切酶的位点发生改变。利用该酶切DNA 时,便会产生与正常不同的限制性片段。这样,在同种生物的不同个体中会出现不同长度的限制性片段类型。

                                                                  

二、填 空(共 30 分,每小题 1 分)

1.基因突变单个碱基的改变,同类碱基之间取代称为(转换);否则称(颠换)。

2.基因的损伤,一切使DNA结构和功能发生改变的DNA,都可称为基因的损伤。突变也是DNA损伤的一种,此外还包括:(碱基损伤),(DNA链断裂)。

3.原核生物mRNA与基因是(共线的),顺反子是(多顺反子);真核mRNA与基因(不是共线),顺反子是(单顺反子)。

4.转录的不对称性是指在RNA的合成中,DNA的二条链中仅有一条链可作为转录的模板,称为转录的不对称性。与mRNA序列相同的那条DNA链称为(编码链);将另一条根据碱基互补原则指导mRNA合成的DNA链称为(模板链)。

5.转录终止不依赖r因子的终止,终止位点上游一般存在一个富含(GC)碱基的二重对称区,RNA形成(发夹)结构;终止效率与二重对称序列和寡聚U的长短有关,长度增加其终止效率(提高)。

6.质粒DNA有三种构型 SC构型是(超螺旋构型),oc构型是(单链开环), L构型是(双链开环),各构型在凝胶电泳中从前到后的顺序是(SC    oc)。

7.pBR322 的筛选方式是通过(抗生素抗性)筛选,pUC18/19的筛选方式是通过(蓝白斑)筛选。

8.CAP的调控作用,cAMP含量与(葡萄糖)的分解代谢有关,cAMP与受体(CRP)结合变为CAP,对转录的作用(促进转录)。gal操纵子具有两个启动子S1和S2,当有CAP时,转录从(S1)开始,无CAP时,转录从(S2)开始。

9.原核生物基因表达调控,阻遏蛋白与效应物结合时,基因不转录(负控阻遏);阻遏蛋白不与效应物结合时基因不转录(负控诱导);有效应物时,激活蛋白处于无活性状态基因不转录(正控阻遏);有效应物时,激活蛋白处于活性状态基因转录(正控诱导)。

10.不同细胞类型中总有一组经常保持表达状态的基因称为(持家基因);只有在发育一定时期才能表达的一些特异性基因称为(时态基因)。

三、选择题(共 30  分,每小题  分)

1.通常DNA右手双螺旋构象的表示是(  )

    A.A-DNA、   B.B-DNA     C.Z-DNA      D. H-DNA

2.下列碱基对中DNA双螺旋的稳定性哪个高( A )

A.5GC 3    B.5CG  3        C.5C T  3    D.5AG  3

3CG 5/           3GC  5          3G A 5       3TC  5

3.简单转录单位编码产生一个多肽,没有内含子,无需剪切,但需要加poly(A)尾,下列那种基因属于这种类型( A )

A.α-干扰素基因     B.组蛋白基因  C. Ig基因   D. 多数基因

4.PKA全酶由4个亚基组成,具有活性的 PKA酶的组成是( 

A.CC      B.RR      C. RC   D.RRCC

5.下列有关TATA盒(Hognessbox)的叙述,哪个是正确的( 

    A.它位于第一个结构基因处  B.它和RNA聚合酶结合

C.它编码阻遏蛋白          D.它和反密码子结合

6.转录需要的原料是( D )

A.dNTP     B. NMP   C. dNMP    D. NTP

7.DNA模板链为 5’-ATTCAG-3 ’ , 其转录产物是( D 

    A. 5 ’ -GACTTA-3 ’  B. 5 ’ -CTGAAT-3 ’

    C. 5 ’ -UAAGUC-3 ’  D. 5 ’ -CUGAAU-3 ’     

8.真核细胞中的mRNA帽子结构是( A )

  A. 7-甲基GTP         B. 7-甲基UTP   C. 7-甲基ATP       D. 7-甲基CTP

9.下面哪一项是对三元转录复合物的正确描述(  B )

A. σ因子、核心酶和双链DNA            B. 全酶、模板DNA和新生RNA

    C. 三个全酶在转录起始点形成的复合物    D. σ因子、核心酶和促旋酶

10.原核生物中起始氨基酰-tRNA是( A )

A.fMet-tRNA    B.Met-tRNA       C.Arg-tRNA    D.leu-tRNA

11.与pCAGCT互补的DNA序列是( A )

A.pAGCTG        B.pGTCGA       C.pGUCGA       D.pAGCUG  

12.PCR实验的特异性主要取决于( B )

   A.DNA聚合酶的种类           B.引物序列的结构和长度

  C.反应体系中模板DNA的量     D.四种dNTP的浓度   

13.下面哪个元件在色氨酸操纵子的调控中发挥作用( C )。

A.增强子     B.转录子    C.弱化子/衰减子    D.顺反子

14.下列 DNA序列属于回文结构的是(  D )

A.GAAACTGCTGTTTC       B.GAAACTGGTCAAAG

C.GAAACTGGTCTTTC       D.GAAACTGCAGTTTC

15.植物基因工程转入下列那种基因能够起到抗虫作用( C )

A. 杀菌肽    B. 外壳蛋白基因    C. 蛋白酶抑制剂基因    D. T-DNA

 

四、简答题(共20 分,每小题 4 分)

1.细菌基因组的结构特征?

◆相关的基因串联在一起组成操纵子结构,形成多顺反子mRNA;

◆不存在内含子,基因是连续的转录后无须进行加工;        

◆大部分是编码区,非翻译区主要是调控部分;                           

◆少数基因有基因重叠现象;

 

2.反转录酶的特点?反转录酶发现的意义?

◆RNA指导的DNA聚合酶活性;不具有外切酶活性;      

◆DNA指导的DNA聚合酶活性;DNA内切酶活性;                                           

◆意义:作为工具酶,提取mRNA为模板,合成的cDNA,由此可构建出cDNA文库(cDNA library),从中筛选特异的目的基因。

3.cDNA的扣除文库的构建?

◆将两种不同组织来源的mRNA进行比较,用扣除杂交排除相同部分,即共同表达的那部分mRNA,选出有差异的、特异表达的mRNA,构建成的cDNA文库。                                        

◆构建过程:从两种不同类型的细胞T、D分别提取mRNA,T细胞mRNA逆转录合成单链的cDNA,向T细胞 cDNA中过量加入D细胞总mRNA

◆两者有共同序列的mRNA和cDNA形成mRNA-cDNA杂合分子,余下单链cDNA代表了仅仅存在于T细胞表达的基因信息。

4.色氨酸操纵子的调控机制?

◆阻遏蛋白的负调控:受其上游调控蛋白R基因的调控。R并没有与O结合的活性,只有当环境能提供足够浓度的色氨酸时,R与色氨酸结合后而活化,能够与O结合,阻遏结构基因的转录。           

◆弱化子及其作用:当色氨酸达到一定浓度,但还没有高到能够活化R使其起阻遏作用的程度时,产生色氨酸合成酶类的量已经明显降低,而且产生的酶量与色氨酸浓度呈负相关。这种调控现象与色氨酸操纵子特殊的结构有关。  

5双脱氧末端终止法Sanger法测定DNA一级结构的原理与方法?                    

◆原理:采用核苷酸链终止剂,双脱氧核苷酸ddNTP终止DNA链的延长。                

可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。                            

◆方法:分成4组,每组中加入4种dNTP和一种相应的ddNTP。                    

?反应后可得到不同长度的以双脱氧结尾的DNA片段,各DNA片段均只相差一个核苷酸长度。

?各组的片段经凝胶电泳分离后,每一片段的电泳位置不同,从下而上可直接读出DNA序列。 

 

《分子生物学》期末试卷(B)

 

一、基本概念(共 20  分,每小题 2  分)

1.DNA分子的多样性:碱基的排列顺序,而构成了DNA分子的多样性100bp DNA分子可能排列方式就是4100 ,DNA中的碱基排列顺序是DNA分子的重要属性。

2.回文序列:其中每条单链以5-3方向都是相同的,易形成发夹结构或十字形结构,限制性酶切位点。

3.错义突变:一个核苷酸的变化,使一种氨基酸的密码变成另一种氨基酸的密码,合成无功能的多肽。

4.小胞浆RNA(scRNA):长约300个核苷酸,主要存在于细胞浆中,是蛋白质定位合成于粗面内质网上所需的信号识别体组成成分。

5.上游启动子元件:包括CAAT盒(CCAAT)和GC盒(GGGCGG)等,包括增强子。

6.模体:蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域,称之为模体。  

7.信号假设:在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段---信号肽,他能引导蛋白质的肽链到达并通过内质网。

8.细菌的应急反应:空载tRNA会激活焦磷酸转移酶,使ppGpp大量合成,ppGpp的出现会关闭许多基因,以称他们是超级调控子或称为魔斑。

9.顺式作用元件:主要是起正性调控作用的元件,包括启动子、增强子;近年又发现起负性调控作用的元件沉寂子。

1

10.弱化子:在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录的序列。                                                                    

二、填 空(共 30 分,每小题 1 分)

1.基因突变一般可分为:(点突变),(碱基的插入突变),(碱基丢失突变)。

2.基因突变可能造成的后果(可能使生物更有利适应环境,引起生物进化),(导致生物体的死亡),(引起结构、形态和功能的异常,产生疾病),(不发生任何变化和影响)。

3.蛋白质标准折叠单位,常见的三种类型是(αα)、(ββ)、(βαβ)。

4.真核生物起始tRNA是(甲硫氨酸Met-tRNAmet),原核生物起始tRNA是(甲酰甲硫氨酸fmet-tRNAfMet)。

5.限制性内切酶的特点(识别位点严格专一),(识别序列的碱基数一般为4、6、8个bp),(识别位点经常是一种回文序列的DNA)。

6.限制性内切酶的切割方式(在对称轴5' 侧切割产生5' 粘端),(在对称轴3' 侧切割产生3' 粘端),(在对称轴处切割产生平段)。

7.质粒DNA的三种构型分别是( SC构型)、( oc构型)、( L构型),各构型在凝胶电泳中从前到后的顺序是(SC   oc)。

8.gal操纵子具有两个启动子,双启动子的生理功能是因为半乳糖对细菌有双重作用,(一方面可以作为碳源供细胞生长);(另一方面它又是细胞壁的成分)。

9.与DNA结合常见的蛋白质功能域有( 螺旋-转角-螺旋)、( 螺旋-环-螺旋)、( 锌指)、(碱性-亮氨酸拉链)。

10.不同细胞类型中总有一组经常保持表达状态的基因称为(持家基因);只有在发育一定时期才能表达的一些特异性基因称为(时空基因)。

 

三、选择题(共 30  分,每小题  分)

1.DNA左手双螺旋构象的表示是(  )

    A、 A-DNA、  B、 B-DNA     C、 Z-DNA      D、 H-DNA

2下列关于DNA复制的叙述中,错误的是( B )

A. 以半保留复制方式进行    B. DNA聚合酶延模板的5’向3’方向移动

C. 以4种dNTP为原料       D. 合成方向5’向3’

3.简单转录单位编码产生一个多肽,转录后加工有3种形式,基因没有内含子,转录后无需加工,也没poly(A)下列那种基因属于这种类型( B )

A.α-干扰素基因     B.组蛋白基因  C. Ig基因   D. 多数基因

4DNA复制时,子链的合成是( A )

A. 两条链均为5’向3’                   B. 两条链均为3’向5’

C. 一条链5’向3’. 另一条链3’向5’    D. 两条链均连续合成

5.以下关于端粒及端粒酶的叙述错误的是( A )

A. 端粒由RNA与蛋白质组成       B. 端粒酶由RNA与蛋白质组成

C. 端粒酶有逆转录酶的活性        D. 端粒的长度在细胞分裂后会发生变化

6.原核生物中,识别并结合启动子的是( 

A. r因子        B. a亚基         C. b亚基      D. s因子

7.参与原核生物转录延长的酶是( 

A. 引物酶              B. RNA聚合酶核心酶 

C. RNA聚合酶全酶       D. RNA聚合酶II

8.真核生物中,mRNA由下面哪种酶转录( 

A. RNA聚合酶I     B. RNA聚合酶II    C. RNA聚合酶III    D. RNA酶

9.下面参与RNA剪接的RNA是( B )

A. HnRNA    B. snRNA    C. 5SRNA    D. tRNA

10.与tRNA上反密码子5’UAG 3’配对的密码子是( C )

A. 5'AUC 3'   B. 5'UAG 3'   C. 5'CUA 3'  D. 5'GAU 3'

11.关于限制性核酸内切酶,以下描述哪个是错误的( C 

A. 酶的识别序列长度一般为4-6bp     B. 切割位点不一定是交错的 

C. 只能识别和切割原核生物的DNA      D. 只能切割含有识别序列的双链DNA 

12.在乳糖操纵子中,阻遏蛋白结合的是( A )

A. 操纵基因   B. 调节基因   C. 启动基因   D. 结构基因

13.下面哪个元件在色氨酸操纵子的调控中发挥作用( 

A. 增强子     B. 转录子     C. 弱化子/衰减子   D. 顺反子

14.分子伴侣是( B )

A. 无机分子    B. 一类蛋白质  C. 一类核酸      D. 其他有机分子

15.植物基因工程转入下列那种基因能够起到抗病毒作用( B )

A. 杀菌肽      B. 外壳蛋白基因 C. 蛋白酶抑制剂基因  D. T-DNA

 

四、简答题(共20 分,每小题 4 分)

1.真核基因组结构特征?

◆含有大量的重复序列;                         

◆在脊椎动物中90%左右是非编码序列;           

◆编码序列被非功能DNA所隔开成割裂基因        

◆编码的内含子则存在广泛的序列变异,说明内含子中的大部分序列是无功能的。   

2

2.基因移动的方式及其遗传学效应?

◆插入序列(insertion sequence,IS),转座子(Transposon,Tn)。

◆引起插入突变,可导致基因表达失活。                    

◆产生新的基因。                                         

◆产生的染色体畸变,引起生物的进化,产生新的功能基因。  

3.cDNA文库的构建?

◆分离提取细胞总RNA;                            

◆利用mRNApoly(A)与其他RNA分开;               

◆以mRNA为模板反转录合成cDNA;                 

◆所得到的为cDNA,克隆进载体即构成cDNA文库。  

4.天然质粒的人工构建对质粒主要进行哪些方面的改造?

◆加入合适的选择标记基因,通常是抗生素基因。             

◆增加或减少合适的酶切位点,便于重组。                  

◆缩短长度,切去不必要的片段,增加装载量。              

◆改变复制子,由严紧变为松弛型,以增加拷贝数。加装特殊的基因元件。

5.简述环腺苷酸受体蛋白对转录的调控?
 

◆cAMP与CRP结合后所形成的复合物激活蛋白CAP。      

◆在缺乏葡萄糖时,CAP合成量增加。                     

◆CAP能提高酶与启动子结合常数,CAP起到取代-35区功能的作用。

◆CAP还能抑制RNA聚合酶与DNA中其它位点的结合,提高与其特定启动子结合的概率。    

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