鸡新城疫是一种由NDV(副黏液病毒)引起的高度接触性和高度毁灭性的急性败血性传染病。其主要的特征为呼吸困难、下痢、神经紊乱、黏膜和浆膜出血、严重的产蛋下降。当前,我国饲养大环境中新城疫病原普遍存在,典型、非典型新城疫时有发生,而由于新城疫疫苗的广泛应用,典型新城疫已较少见,但非典型新城疫却呈现上升趋势。究其原因:一是疾病的频繁发生,环境中病原污染严重;二是缺乏有效的生物安全隔离体系,难于切断传播途径;三是免疫程序不合理,不能给鸡群提供强有力的保护。针对以上现状,探讨、制定一个合理的免疫程序,给新城疫流行地区的鸡群提供强有力的保护是大家关注的焦点。在制定免疫程序时,争议比较多的几个问题是: 1.1日龄是否需要活苗免疫?免疫效果?母源抗体对免疫的影响有多大? 2.早期免疫是否需要做灭活苗? 多大日龄做比较合适? 3.育雏期需要做几次活苗免疫? 4.母源抗体的衰减规律? 5.育雏期已使用灭活苗免疫,育成期是否还需免疫? 6.产蛋期应如何免疫? 本试验通过不同免疫程序在育雏期的免疫抗体结果对比,制定出当前的饲养环境中科学合理的雏鸡免疫程序。通过生产实践中对育成期、产蛋期的抗体检测,总结出这两个阶段合理的免疫程序。 一、材料与方法 (一) 材料 试验动物 父母代海兰褐种鸡 试验仪器及用品 96孔板、微量移液器、振荡器、试管、注射器、9号针头、离心机、30毫升滴瓶、先灵葆雅公司和夏菲特公司提供的新城疫活苗、北京市生物药品厂提供的新城疫灭活油乳剂、中国兽医监察所提供新城疫HI抗原、生理盐水。 (二)方法 1.鸡群的免疫 试验共160只健康父母代海兰褐雏鸡,随机分成8个小组,每组20只,各组的免疫内容和方法如表1所示:
表1 各组的免疫内容和方法
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1日龄
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7日龄
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21日龄
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第1组
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ND活苗(点眼)
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不免疫
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ND活苗(点眼)
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第2组
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不免疫
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ND活苗(点眼)
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ND活苗(点眼)
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第3组
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ND活苗(点眼)
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ND活苗(点眼)
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ND活苗(点眼)
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第4组
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ND活苗+ND油苗
(点眼)+(颈皮下注射)
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ND活苗(点眼)
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ND活苗(点眼)
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第5组
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ND活苗(点眼)
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ND活苗+ND油苗
(点眼)+(颈皮下注射)
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ND活苗(点眼)
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第6组
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ND活苗(点眼)
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ND活苗(点眼)
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ND活苗+ND油苗
(点眼)+(颈皮下注射)
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第7组
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ND活苗(点眼)
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11日龄,ND活苗+ND油苗
(点眼)+(颈皮下注射)
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24日龄,ND活苗(点眼)
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对照组
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未免疫
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未免疫
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未免疫
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表1 各组的免疫内容和方法 备注: 1日龄新城疫活苗为IV系克隆化疫苗,由先灵葆公司提供;7日龄ND活苗为VH疫苗,由夏非特公司提供;21日龄ND活苗为IV系疫苗,由先灵葆雅公司提供;ND油苗由北京市生物药品厂提供。活苗免疫剂量2头份,油苗免疫剂量0.3毫升/只。 2.育雏期的HI试验 心脏采血法每只鸡采取1毫升血液,HI试验参照傅先强、刘占君等主编的《养禽场禽病检验手册》。从7日龄开始监测,每3天测一次抗体值,一直到6周龄。 3.育成期的HI试验 心脏采血法每只鸡采取1毫升血液,HI试验参照《养禽场禽病检验手册》。从7周龄开始监测,每周测一次抗体值,一直到22周龄。 4.产蛋期的HI试验 心脏采血法每只鸡采取1毫升血液,HI试验参照《养禽场禽病检验手册》。产蛋期间每半个月测一次抗体值,直到抗体值降到9以下。 二、 结果与分析 (一)育雏期的ND抗体监测结果 试验结果如表2和图1~图6所示。从表2中可知,免疫接种的雏鸡抗体滴度先下降后上升,7日龄时,抗体滴度在7log2~8log2之间,以后抗体逐渐往下降,一直到25日龄时降到最低,一般为2log2左右;25日龄后逐渐上升,5周龄趋于稳定。未经免疫的雏鸡4周龄后母源抗体几乎降到零。 图1 实验3与实验4鸡群的ND抗体变化曲线
表2 8个组HI检测抗体的结果
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7
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10
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13
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16
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19
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22
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25
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28
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31
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34
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37
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40
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42
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实验1
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8.00
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6.70
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6.20
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5.40
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3.90
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2.80
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1.40
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4.90
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6.20
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6.00
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4.50
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5.30
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5.10
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实验2
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7.30
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5.90
|
4.90
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5.60
|
4.90
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3.50
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1.30
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5.00
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5.70
|
5.40
|
5.10
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4.70
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4.60
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实验3
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6.90
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5.80
|
5.80
|
4.80
|
3.30
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2.20
|
2.00
|
5.20
|
6.20
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6.70
|
7.00
|
6.70
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6.80
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实验4
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8.00
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6.20
|
5.80
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5.30
|
3.60
|
4.00
|
3.20
|
5.10
|
6.00
|
6.50
|
6.70
|
6.80
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7.30
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实验5
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7.70
|
6.00
|
6.20
|
6.10
|
5.30
|
4.00
|
4.30
|
6.60
|
7.80
|
8.00
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8.10
|
8.60
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8.70
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实验6
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7.50
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6.70
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5.80
|
5.60
|
3.90
|
3.00
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1.90
|
5.80
|
7.80
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8.10
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8.00
|
8.50
|
8.60
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实验7
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7.20
|
6.40
|
5.40
|
4.80
|
4.30
|
4.60
|
4.20
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6.60
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7.10
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7.80
|
7.60
|
8.90
|
8.40
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对照组
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7.60
|
6.70
|
5.90
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4.80
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3.30
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3.10
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2.10
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0.5
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0
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0
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0
|
0
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0
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图1:实验3与实验4鸡群的ND抗体变化曲线
如图1所示,实验4中的鸡群 1日龄时免疫接种了ND油苗,实验3没有,而实验4与实验3鸡群的ND抗体消长曲线基本一致,说明1日龄没有免疫接种ND油苗必要。 图2:实验3、实验5和实验7鸡群的ND抗体变化曲线
从图2的3条ND抗体变化曲线可知,7日龄或7日龄后免疫ND灭活苗有效,其抗体无论峰值还是最低值均比单纯使用活苗组高2个滴度;抗体最低值在4log2左右,而不免灭活苗组在2log2左右。 图3:实验5、实验6和实验7鸡群的ND抗体变化曲线
实验5、7与实验6做比较说明早免灭活苗好于晚免。虽然3个组的抗体峰值差异不显著,但早免灭活苗组抗体最低值在4log2左右,而晚免灭活苗组在2log2左右,抗体差异如图3所示。 图4:实验1、实验2和实验3鸡群的ND抗体变化曲线
实验3与实验1、2做比较说明前三周三次活苗免疫要好于两次活苗免疫。从抗体曲线可看出,前4周时抗体差别不大,但从5周龄开始,抗体滴度明显高于两次活苗免疫组。 图5:实验5、实验6和实验7鸡群的ND抗体变化曲线
实验1、2与对照组(7-25日龄)的抗体曲线比较说明:1日龄或7日龄首免活苗,由于受母源抗体、不健全的免疫器官、初次免疫的影响,几乎不能产生有效的体液抗体;主要产生局部黏膜抗体与免疫记忆细胞。 图6:对照组中鸡群ND母源抗体变化曲线
母源抗体大约在4周龄降至0,但在2周龄后已不能给鸡群提供保护。此年龄段是免疫空白期;这就不仅要求在2周龄以内免疫,并且加强对鸡群的隔离、消毒工作非常重要。 (二)育成期的ND抗体监测结果 对育成期ND抗体进行监测,其结果如图7所示:
图7:育成期ND抗体变化规律 鸡群经过3次活苗和1次灭活苗免疫后,监测育成鸡的抗体变化规律,发现在8~10周龄、15~17周龄抗体有下降趋势,因而在这两个阶段应进行活苗免疫;同时为了产蛋期有一个高且稳定的抗体,在产蛋前的3~4周需有一次灭活苗免疫。 (三)产蛋期的ND抗体监测结果 对产蛋期ND抗体进行监测,其结果如图8所示: 图8:产蛋期ND活苗免疫后的抗体变化规律
产蛋鸡ND抗体值低于9时细雾滴气雾免疫,免后15天抗体达到峰值,可以维持4个月。考虑到不同免疫方法对抗体的影响及环境的差异,建议产蛋鸡2~4个月活苗免疫一次。 三、结论 (一)雏鸡早期ND免疫应坚持的原则 1.活苗与灭活苗联合使用。活苗可为鸡群提供局部黏膜抗体,保护疾病入侵的门户。通过疫苗在体内的占位性免疫,先入为主,干扰野毒的入侵。灭活苗产生的抗体高且维持时间长,无论是峰值抗体还是最低值抗体均比只用活苗组高2~3个滴度左右。但灭活苗的使用日龄应在1~2周龄,过早免疫不能产生有效抗体,晚免则使抗体产生延迟。 2.提倡1日龄活苗免疫,尽早产生局部黏膜抗体。雏鸡30日龄以前,体液免疫和细胞免疫机能不健全,对侵入机体的病毒清除能力差,对注射灭活苗产生的免疫应答低,早期抵抗NDV感染的机制主要依靠的是黏膜的局部免疫作用。尽管10日龄前活苗免疫由于免疫器官尚未发育成熟、母源抗体的中和作用、首次免疫等因素存在,不能产生良好的体液抗体。但其主要作用是产生局部黏膜抗体和免疫记忆细胞,且这种抗体的产生不受母源抗体的影响,因而要尽早落实活苗免疫。 3.育雏期间3次免疫的间隔时间以1~2周为最佳。即1日龄首免,7~12日龄二免,21~24日龄三免。机体接受抗原刺激以后,在产生体液免疫的同时也产生免疫记忆细胞,在1~2周的间隔时间内,再次接受相同抗原刺激时,免疫记忆细胞会在短时间内产生大量的抗体。呼吸道和消化道的黏膜细胞2周会产生生理性脱落,导致免疫记忆丧失。所以育雏期间相邻两次免疫时间间隔1~2周为宜,时间过长不能产生良好的免疫效果。 4.无论采用哪种免疫程序,都不能给2~4周龄的鸡群提供有效抗体保护,此年龄段是疾病易感期,做好隔离消毒工作非常重要。 5.鸡群经过3次活苗和1次灭活苗免疫后,监测育成鸡的抗体变化规律,发现在8~10周龄、15~17周龄抗体有下降趋势,因而在这两个阶段应进行活苗免疫;同时为了产蛋期有一个高且稳定的抗体,在产蛋前的3~4周需有一次灭活苗免疫。 6.由产蛋鸡ND免疫后的抗体值变化规律看:产蛋期需2~4个月活苗免疫一次。 (二)合理的免疫程序 综上所述,在ND流行地区,建议合理的免疫程序为: 首免:1日龄,新城疫IV系克隆化疫苗或B1株点眼或粗雾滴喷雾。 二免:7~12日龄,新城疫 IV系克隆化或B1株点眼+灭活苗注射。 三免:21~25日龄,新城疫 IV系活苗点眼。 四免:8~10周龄,新城疫IV系活苗点眼或喷雾。 五免:产蛋前3~4周龄,新城疫IV系活苗点眼或喷雾+灭活苗注射。 产蛋期:2~4个月免疫一次,IV系活苗点眼或喷雾。
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