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鸡新城疫免疫程序的试验探讨

 小水晶晶 2010-09-15
鸡新城疫是一种由NDV(副黏液病毒)引起的高度接触性和高度毁灭性的急性败血性传染病。其主要的特征为呼吸困难、下痢、神经紊乱、黏膜和浆膜出血、严重的产蛋下降。当前,我国饲养大环境中新城疫病原普遍存在,典型、非典型新城疫时有发生,而由于新城疫疫苗的广泛应用,典型新城疫已较少见,但非典型新城疫却呈现上升趋势。究其原因:一是疾病的频繁发生,环境中病原污染严重;二是缺乏有效的生物安全隔离体系,难于切断传播途径;三是免疫程序不合理,不能给鸡群提供强有力的保护。针对以上现状,探讨、制定一个合理的免疫程序,给新城疫流行地区的鸡群提供强有力的保护是大家关注的焦点。在制定免疫程序时,争议比较多的几个问题是:
     1.1日龄是否需要活苗免疫?免疫效果?母源抗体对免疫的影响有多大?
     2.早期免疫是否需要做灭活苗? 多大日龄做比较合适?
     3.育雏期需要做几次活苗免疫?
     4.母源抗体的衰减规律?
     5.育雏期已使用灭活苗免疫,育成期是否还需免疫?
     6.产蛋期应如何免疫?
     本试验通过不同免疫程序在育雏期的免疫抗体结果对比,制定出当前的饲养环境中科学合理的雏鸡免疫程序。通过生产实践中对育成期、产蛋期的抗体检测,总结出这两个阶段合理的免疫程序。
     一、材料与方法
     (一) 材料
     试验动物 父母代海兰褐种鸡
     试验仪器及用品 96孔板、微量移液器、振荡器、试管、注射器、9号针头、离心机、30毫升滴瓶、先灵葆雅公司和夏菲特公司提供的新城疫活苗、北京市生物药品厂提供的新城疫灭活油乳剂、中国兽医监察所提供新城疫HI抗原、生理盐水。
     (二)方法
     1.鸡群的免疫 
     试验共160只健康父母代海兰褐雏鸡,随机分成8个小组,每组20只,各组的免疫内容和方法如表1所示:

 

 
表1 各组的免疫内容和方法

 
1日龄
7日龄
21日龄
第1组
ND活苗(点眼)
不免疫
ND活苗(点眼)
第2组
不免疫
ND活苗(点眼)
ND活苗(点眼)
第3组
ND活苗(点眼)
ND活苗(点眼)
ND活苗(点眼)
第4组
ND活苗+ND油苗
(点眼)+(颈皮下注射)
ND活苗(点眼)
ND活苗(点眼)
第5组
ND活苗(点眼)
ND活苗+ND油苗
(点眼)+(颈皮下注射)
ND活苗(点眼)
第6组
ND活苗(点眼)
ND活苗(点眼)
ND活苗+ND油苗
(点眼)+(颈皮下注射)
第7组
ND活苗(点眼)
11日龄,ND活苗+ND油苗
(点眼)+(颈皮下注射)
24日龄,ND活苗(点眼)
对照组
未免疫
未免疫
未免疫

 


 

表1 各组的免疫内容和方法
     备注: 1日龄新城疫活苗为IV系克隆化疫苗,由先灵葆公司提供;7日龄ND活苗为VH疫苗,由夏非特公司提供;21日龄ND活苗为IV系疫苗,由先灵葆雅公司提供;ND油苗由北京市生物药品厂提供。活苗免疫剂量2头份,油苗免疫剂量0.3毫升/只。
     2.育雏期的HI试验  
     心脏采血法每只鸡采取1毫升血液,HI试验参照傅先强、刘占君等主编的《养禽场禽病检验手册》。从7日龄开始监测,每3天测一次抗体值,一直到6周龄。
      3.育成期的HI试验
     心脏采血法每只鸡采取1毫升血液,HI试验参照《养禽场禽病检验手册》。从7周龄开始监测,每周测一次抗体值,一直到22周龄。
     4.产蛋期的HI试验
     心脏采血法每只鸡采取1毫升血液,HI试验参照《养禽场禽病检验手册》。产蛋期间每半个月测一次抗体值,直到抗体值降到9以下。
     二、 结果与分析
     (一)育雏期的ND抗体监测结果
      试验结果如表2和图1~图6所示。从表2中可知,免疫接种的雏鸡抗体滴度先下降后上升,7日龄时,抗体滴度在7log2~8log2之间,以后抗体逐渐往下降,一直到25日龄时降到最低,一般为2log2左右;25日龄后逐渐上升,5周龄趋于稳定。未经免疫的雏鸡4周龄后母源抗体几乎降到零。
图1 实验3与实验4鸡群的ND抗体变化曲线   

表2 8个组HI检测抗体的结果
 
7
10
13
16
19
22
25
28
31
34
37
40
42
实验1
8.00
6.70
6.20
5.40
3.90
2.80
1.40
4.90
6.20
6.00
4.50
5.30
5.10
实验2
7.30
5.90
4.90
5.60
4.90
3.50
1.30
5.00
5.70
5.40
5.10
4.70
4.60
实验3
6.90
5.80
5.80
4.80
3.30
2.20
2.00
5.20
6.20
6.70
7.00
6.70
6.80
实验4
8.00
6.20
5.80
5.30
3.60
4.00
3.20
5.10
6.00
6.50
6.70
6.80
7.30
实验5
7.70
6.00
6.20
6.10
5.30
4.00
4.30
6.60
7.80
8.00
8.10
8.60
8.70
实验6
7.50
6.70
5.80
5.60
3.90
3.00
1.90
5.80
7.80
8.10
8.00
8.50
8.60
实验7
7.20
6.40
5.40
4.80
4.30
4.60
4.20
6.60
7.10
7.80
7.60
8.90
8.40
对照组
7.60
6.70
5.90
4.80
3.30
3.10
2.10
0.5
0
0
0
0
0

图1:实验3与实验4鸡群的ND抗体变化曲线   

              

如图1所示,实验4中的鸡群 1日龄时免疫接种了ND油苗,实验3没有,而实验4与实验3鸡群的ND抗体消长曲线基本一致,说明1日龄没有免疫接种ND油苗必要。
图2:实验3、实验5和实验7鸡群的ND抗体变化曲线

 
     从图2的3条ND抗体变化曲线可知,7日龄或7日龄后免疫ND灭活苗有效,其抗体无论峰值还是最低值均比单纯使用活苗组高2个滴度;抗体最低值在4log2左右,而不免灭活苗组在2log2左右。
图3:实验5、实验6和实验7鸡群的ND抗体变化曲线

 
    实验5、7与实验6做比较说明早免灭活苗好于晚免。虽然3个组的抗体峰值差异不显著,但早免灭活苗组抗体最低值在4log2左右,而晚免灭活苗组在2log2左右,抗体差异如图3所示。
图4:实验1、实验2和实验3鸡群的ND抗体变化曲线

 

     实验3与实验1、2做比较说明前三周三次活苗免疫要好于两次活苗免疫。从抗体曲线可看出,前4周时抗体差别不大,但从5周龄开始,抗体滴度明显高于两次活苗免疫组。
图5:实验5、实验6和实验7鸡群的ND抗体变化曲线

                
    实验1、2与对照组(7-25日龄)的抗体曲线比较说明:1日龄或7日龄首免活苗,由于受母源抗体、不健全的免疫器官、初次免疫的影响,几乎不能产生有效的体液抗体;主要产生局部黏膜抗体与免疫记忆细胞。
图6:对照组中鸡群ND母源抗体变化曲线

                      
     母源抗体大约在4周龄降至0,但在2周龄后已不能给鸡群提供保护。此年龄段是免疫空白期;这就不仅要求在2周龄以内免疫,并且加强对鸡群的隔离、消毒工作非常重要。
     (二)育成期的ND抗体监测结果
     对育成期ND抗体进行监测,其结果如图7所示:

                        
图7:育成期ND抗体变化规律                
     鸡群经过3次活苗和1次灭活苗免疫后,监测育成鸡的抗体变化规律,发现在8~10周龄、15~17周龄抗体有下降趋势,因而在这两个阶段应进行活苗免疫;同时为了产蛋期有一个高且稳定的抗体,在产蛋前的3~4周需有一次灭活苗免疫。
      (三)产蛋期的ND抗体监测结果
      对产蛋期ND抗体进行监测,其结果如图8所示:
图8:产蛋期ND活苗免疫后的抗体变化规律


     产蛋鸡ND抗体值低于9时细雾滴气雾免疫,免后15天抗体达到峰值,可以维持4个月。考虑到不同免疫方法对抗体的影响及环境的差异,建议产蛋鸡2~4个月活苗免疫一次。
     三、结论
     (一)雏鸡早期ND免疫应坚持的原则
     1.活苗与灭活苗联合使用。活苗可为鸡群提供局部黏膜抗体,保护疾病入侵的门户。通过疫苗在体内的占位性免疫,先入为主,干扰野毒的入侵。灭活苗产生的抗体高且维持时间长,无论是峰值抗体还是最低值抗体均比只用活苗组高2~3个滴度左右。但灭活苗的使用日龄应在1~2周龄,过早免疫不能产生有效抗体,晚免则使抗体产生延迟。
     2.提倡1日龄活苗免疫,尽早产生局部黏膜抗体。雏鸡30日龄以前,体液免疫和细胞免疫机能不健全,对侵入机体的病毒清除能力差,对注射灭活苗产生的免疫应答低,早期抵抗NDV感染的机制主要依靠的是黏膜的局部免疫作用。尽管10日龄前活苗免疫由于免疫器官尚未发育成熟、母源抗体的中和作用、首次免疫等因素存在,不能产生良好的体液抗体。但其主要作用是产生局部黏膜抗体和免疫记忆细胞,且这种抗体的产生不受母源抗体的影响,因而要尽早落实活苗免疫。
     3.育雏期间3次免疫的间隔时间以1~2周为最佳。即1日龄首免,7~12日龄二免,21~24日龄三免。机体接受抗原刺激以后,在产生体液免疫的同时也产生免疫记忆细胞,在1~2周的间隔时间内,再次接受相同抗原刺激时,免疫记忆细胞会在短时间内产生大量的抗体。呼吸道和消化道的黏膜细胞2周会产生生理性脱落,导致免疫记忆丧失。所以育雏期间相邻两次免疫时间间隔1~2周为宜,时间过长不能产生良好的免疫效果。                                                            
     4.无论采用哪种免疫程序,都不能给2~4周龄的鸡群提供有效抗体保护,此年龄段是疾病易感期,做好隔离消毒工作非常重要。
     5.鸡群经过3次活苗和1次灭活苗免疫后,监测育成鸡的抗体变化规律,发现在8~10周龄、15~17周龄抗体有下降趋势,因而在这两个阶段应进行活苗免疫;同时为了产蛋期有一个高且稳定的抗体,在产蛋前的3~4周需有一次灭活苗免疫。
     6.由产蛋鸡ND免疫后的抗体值变化规律看:产蛋期需2~4个月活苗免疫一次。
    (二)合理的免疫程序
     综上所述,在ND流行地区,建议合理的免疫程序为:
     首免:1日龄,新城疫IV系克隆化疫苗或B1株点眼或粗雾滴喷雾。
     二免:7~12日龄,新城疫 IV系克隆化或B1株点眼+灭活苗注射。
     三免:21~25日龄,新城疫 IV系活苗点眼。
     四免:8~10周龄,新城疫IV系活苗点眼或喷雾。
     五免:产蛋前3~4周龄,新城疫IV系活苗点眼或喷雾+灭活苗注射。
     产蛋期:2~4个月免疫一次,IV系活苗点眼或喷雾。

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