荧光黄(Lucifer Yellow)-Invitrogen
作者 Jeffrey 于2011 年 6 月 14 日 在产品评述 浏览:424 views | 还没有评论,快来评论吧 绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)可以算是分子生物学的一个具有革命性意义的发现,有了GFP,科研人员可以方便地观察细胞。到目前为止,出现了多种GFP,但研究人员更多地使用不同颜色的荧光蛋白(如樱桃色),或适用于特定条件的荧光蛋白(如pH敏感的GFP)。 有时候,GFP却无法在一些应用中失踪细胞,比如检测细胞液体摄入、细胞内囊泡运输、检查单分子膜的通透性等,此时需要的是小分子量的荧光化合物。第一个用于此类实验的化合物是荧光素,后来出现了异硫氰酸荧光素(FITC)。FITC是绿色的荧光分子,亮度高,对细胞无毒,但和大多数小荧光染料一样,它会在成像时被漂白。荧光黄(Lucifer Yellow)是FITC标记的替代品,具有很高的stokes range,约为110纳米。此外,Lucifer Yellow非常易溶于水,因此在需要的时候可以配置较高浓度,而FITC水溶解性较弱。虽然Lucifer Yellow在成像过程中强度会减弱,但如果有需要,可以使用Lucifer Yellow抗体以获得更好的信号。
这些染料的另一个缺点是,他们不能直接标记生物相关的分子,如蛋白质或脂类。由于这些染料与蛋白结合会损失荧光强度,同时具有光漂白敏感性,在标记的蛋白很成像强度较弱。因此在标记生物分子时,应当考虑使用其他标签。
在我的实验室里,我们使用Invitrogen公司的 Lucifer Yellow标记细胞中的内吞噬泡。由于其水溶解度高、荧光明亮、细胞毒性低,并且具有较宽的Stokes shift,我们得以在固定和活细胞中观察内吞噬泡。最近,我们也使用这种染料,观察Transwell中的细胞形成的紧密连接。这些紧密连接不允许小分子从顶端转运到基底端,因此Lucifer Yellow被限制进入基底端。
总结
The Good 和FITC相比,更小,更亮,水溶性更好。 The Bad
在醛固定过程中只有修饰过的Lucifer Yellow才能被固定。 The Bottom Line
Lucifer Yellow是替代FITC的选择之一。 |
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