课题3分解纤维素的微生物的分离（1课时）
主备人：
【课程目标】：简述纤维素酶的种类及作用，从土壤中分离出分解纤维素的微生物；讨论这种微生物的应用价值。
【课程重点】：从土壤中分离分解纤维素的微生物
【课程难点】：从土壤中分离分解纤维素的微生物
【学习过程】：
一、知识回顾
1、培养基的分类（按物理性质和功能分）及判断依据
2、纯化微生物最常用的方法是什么？描述稀释涂布平板法
二．纤维素与纤维素酶
阅读P27课题背景与（一）纤维素与纤维素酶
纤维素 纤维素酶 组成 由???组成多聚体 由???，???，和???组成 分布 棉花、木材、作物秸秆等 微生物细胞内 作用 和果胶构成植物的??? 水解过程： 实验验证纤维素酶的作用
实验组 1cm×6cm滤纸条，pH为4.8、物质的量浓度为0.1mol/L的醋酸——醋酸钠缓冲液10mL，1mL纤维素酶 对照组 结论 〖思考1〗实验分析：P27的小实验是如何构成对照的？
在一支试管中添加纤维素酶，另一支试管不添加纤维素酶；尽管醋酸－醋酸钠缓冲液用量不同，但都能维持相同的pH。
〖思考2〗1个酶活力单位是指在温度为25℃，其它反应条件最适宜情况下，在1min内转化1mmol的底物所需要的酶量。
三、纤维素分解菌的筛选
阅读（二）纤维素分解菌的筛选的相关资料，回答：
（1）纤维素分解菌的筛选方法是什么？
（2）刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理是什么？
四．实验设计：
阅读P28实验流程图，补全分离分解纤维素的微生物的实验流程
土壤取样→_____→梯度稀释→→。
1、阅读资料一思考：
（1）为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？
（2）将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深（参考P28资料一）？
2、阅读资料二和资料三，讨论回答：
（1）刚果红染色的方法有几种？各自的优缺点是什么？
染色过程 优点 缺点 这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。 是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂； 操作简便不存在菌落的混杂问题 1、由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应，2、有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间的培养过程中会降解刚果红形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。 （2）资料二
①、所用的这个培养基有哪些营养成分？选择培养的目的是什么？如何进行？
②、能设置对照试验进行对照吗？
（3）为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？
五．结果分析与评价
1．为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行________实验，纤维素酶的发酵方法有__________发酵和____________发酵。
2．纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的_________含量进行定量测定。
六．巩固练习
1．寻找纤维素分解菌应到（??）
A．富含无机盐的环境中? B．富含纤维素的环境中
C．湿润的环境中 D．池塘中
2．在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是???(???)
A．乳酸菌??B．硝化细菌?C．分解尿素的细菌?D．分解纤维素的细菌
３．两种刚果红染色法的结果是(???)
Ａ．均会出现透明圈????????????Ｂ．均不会出现透明圈
C．方法一出现，方法二不出现????D．方法一不出现，方法二出现
4．纤维素分解菌的选择培养基有选择作用，原因在于()
A．NaNO3B．KCl C．酵母膏D．纤维素粉
A．可以增加纤维素分解菌的浓度??B．可以减少纤维素分解菌的浓度
C．所用培养基是固体培养基?????D．所用培养基是平板培养基
6．分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是(???)
Ａ．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
B．选择培养这一步可省略，但培养纤维素分解菌少
C．经稀释培养后，用刚果红染色
D．对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上
临猗中学生物科学案年级：高二班级：姓名：
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