抑菌圈法测定抗菌剂抗菌性能1.配置液体培养基:
称取胰化蛋白胨1.0g,牛肉膏 0.3g,NaCl0.5g于200ml烧杯中,加80ml蒸馏水溶解,定容至100ml,用1M NaOH溶液调pH为7.4~7.6。将配置好的培养基分装入三角瓶内(分装三瓶),在三角瓶口塞上棉花,再在棉塞外包一层报纸,然后以0.103MPa,121℃,20min高压蒸汽灭菌。
2.用无菌吸管吸取0.25ml菌液于液体培养基中,37℃下培养24h,备用。
3.配置固体培养基:
称取胰化蛋白胨1.0g,牛肉膏 0.3g,NaCl0.5g,琼脂1.8g于200ml烧杯中,加80ml蒸馏水溶解,定容至100ml,用1M NaOH溶液调pH为7.4~7.6。将配置好的培养基分装入三角瓶内,在三角瓶口塞上棉花,再在棉塞外包一层报纸,然后以0.103MPa,121℃,20min高压蒸汽灭菌。
准备13支培养皿,标号为(V11,V21,V31)(掺钒TiO2抗菌剂,日光灯照),
W1(不加抗菌剂,日光灯照);
(V12,V22,V32)(掺钒TiO2抗菌剂,紫外灯照5mim),
W2 (无抗菌剂紫外灯照5min)
(A1,A2,A3),(磷酸钙载银,无灯照),
W3(无抗菌剂,无灯照)
B(冷却玻璃棒用)
将灭菌后的培养基趁热倒平板,平板冷却后均匀涂上0.5ml菌液形成菌液膜,在标号为V11,V12的培养基中加0.01g掺钒TiO2抗菌剂,在标号为
V21,V22的培养基中加0.05g掺钒TiO2抗菌剂,在标号为
V31,V32的培养基中加0.10g掺钒TiO2抗菌剂,在标号为
A1的培养基中加0.01g磷酸钙抗菌剂,在标号为
A2的培养基中加0.05g磷酸钙抗菌剂,在标号为
A3的培养基中加0.10g磷酸钙抗菌剂。
然后按照上述条件分别培养24h,观察抗菌剂周围细菌生长情况,测量抑菌圈存在情况及直
径大小以判别抑菌能力。 |
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