气相色谱　质谱联用法测定风油精中樟脑的含量

【摘要】  目的 建立测定风油精中樟脑含量的方法方法 采用气相色谱　质谱联用方法，以萘内标物，SPB　1701（30 m×0.25 mm×0.25 μm）石英毛细管柱；80～250 ℃程序升温。结果 樟脑的量在2.56×10-3～12.8×10-3μg范围内与峰面积之比有较好的线性关系（r=0.9998），平均回收率为97.6%，检测限：1.3×10-3μg。结论 方法快速、准确、灵敏度高、重复性好，可用于风油精制剂的质量控制。

【关键词】  气相色谱　质谱法；樟脑；风油精

　　Determination of camphor in Fengyoujing by gas chromatography　mass spectrometry

　　Abstract:Objective To develop a method for the content determination of camphor, the main component in Fengyoujing.Methods Camphor in Fengyoujing was analyzed by gas chromatography　mass spectrometry using naphthalene as internal standard. Camphor and naphthalene were analyzed on a SPB　1701 column with programing temperature from 80 to 250 ℃. Results The linear range of the method was 2.56×10-3~12.8×10-3 μg with a relative standard deviation of 2.5%. The detection limit of camphor was 1.3×10-3 μg.Conclusion  The method is rapid, accurate and reproducible for the quality control of Fengyoujing.

　　Key words:gas chromatography; mass spectrometry; camphor; Fengyoujing

　　风油精主要由薄荷脑、樟脑、水杨酸甲酯等药物配以香料制成，具有特殊的香气，味凉而辣，有消炎、镇痛，清凉、止痒、祛风之功效，用于伤风感冒引起的头痛、头晕以及关节痛、牙痛、腹部胀痛和蚊虫叮咬、晕车等引起的不适［1］，还可用于轻度烫伤、脚癣、咽喉肿痛等的治疗。樟脑是风油精的有效成分，目，对该成分的分析文献报道的主要是采用气相色谱法［2~8］。本文利用气相色谱　质谱联用方法中总离子流质量色谱模式，以萘作内标，对风油精中的樟脑进行含量测定，该方法快速、准确、灵敏度高、重复性好。

　　1  仪器与试药

　　1.1  仪器岛津GC　17A & GCMS　QP5050A气相色谱　质谱联用仪，GC　17A气相色谱（多级程序控温、调压、载气流量控制），二级真空系统（转子泵与涡轮泵），电子电离离子源（EI），四级杆质量分析器，检测分析工作站。

　　1.2  试药 樟脑对照品（中国药品生物制品检定所提供），萘（广州试剂厂，分析纯）,无水乙醇（广州试剂厂，分析纯），风油精（汕头市五环制药厂，批号：060601、060602、060603）。

　　2  试验条件

　　2.1  色谱条件色谱柱：SPB　1701 石英毛细柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；进样口温度：250 ℃ ；升温程序：80 ℃保持3 min，以20 ℃/min升至250 ℃保持2 min；载气：He；流速：1.0 mL/min，柱前压：65 kPa；进样量：1  μL；分流比：30∶1。在该条件下，樟脑对照品的保留时间与样品峰2的保留时间基本致，进一步通过标准谱库检索得到峰2（图1）为樟脑。

　　2.2  质谱条件电子电离离子源（EI）；电子能量70 eV；传输线温度250 ℃；激活电压1.5 V；质量扫描范围35～500 m/z。

　　3  结果

　　3.1  溶液的制备

　　3.1.1  对照品储备液的制备精密称取樟脑适量，置100 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，配成每1 mL含樟脑约为0　1 mg的溶液。

　　3.1.2  内标储备液的制备精密称取萘适量，置100 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，配成每1 mL含萘约为0.1 mg的溶液。

　　3.1.3  供试品溶液的制备取风油精约0.04 g，精密称定，置10 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取1 mL，置10 mL量瓶中，加入萘储备液0.2 mL，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。

　　A.样品   B.阴性样品　1.桉油;2.樟脑;3.薄荷脑;4.水杨酸甲酯

　　图1  风油精的总离子流质谱图（略）

　　Fig.1  Total ion current chromatograms of Fengyoujing

　　3.2   阴性干扰试验按处方比例配制缺樟脑的阴性空白对照溶液，按上述条件测定，测得供试品溶液和阴性对照溶液的总离子流质谱图（见图1），结果在樟脑相同保留时间处，供试品溶液出现对照品色谱峰，阴性对照品无该色谱峰出现，表明阴性对照无干扰。

　　3.3  线性范围和检测限  精密称取樟脑储备液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL于10 mL量瓶中，各精密加入内标储备液0.2 mL，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得系列浓度溶液，各吸取上述溶液1 μL进样测定，每种浓度进样3次，按上述气相色谱与质谱条件分析。以樟脑与萘浓度之比为横坐标，以二者的峰面积之比平均值为纵坐标，得回归方程：Y=1.019X-0.013，r=0　9998，线性范围：2.56×10-3~12.8×10-3μg，检测限：1.3×10-3 μg。

　　3.4  精密度试验取质量浓度为0.012 8 mg/mL的对照品溶液，按上述条件连续进样5次，每次进样1 μL，测得樟脑对照品与萘内标的峰面积之比的RSD=1.6%，结果表明精密度较好。

　　3.5  稳定性试验取批号为060601的样品，按“3.1.1”项方法制备供试品溶液，分别于0、1、2、3、4 h进样1 μL，结果RSD=2.9%，表明样品溶液在4 h内基本稳定。

　　3.6  重复性试验取同一批号(060601)样品5份，分别按“3.1　3”项下方法制备溶液，进样测定，结果樟脑平均质量分为0.0256 g/g，RSD＝2.5％。

　　3.7  加样回收试验取同一批号（060601）的样品分成6份，每份约0.02 g，置10 mL量瓶中，分别加入上述对照品储备液4 mL（质量浓度为0.128 mg/mL），加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取1 mL，置10 mL量瓶中，加入萘储备液0.2 mL，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀。按样品测定方法操作，结果回收率为97.6%，RSD为1.8%。结果见表1。

　　表1  风油精中樟脑加样回收试验结果（略）

　　Tab.1  Results of recovery test(n=6)

　　3.8  样品测定取3批号样品，按“3.1.1”项下方法制备溶液，按上述色谱条件及质谱条件，分别取1 μL进样，测定得到二者的比值，代入线性方程计算樟脑含量。结果见表2。

　　表2  风油精样品测定结果（n=5)（略）

　　Tab.2  Relative standard deviation of sample analysis

　　4  讨论
 
　　4.1  采用GC　MS法测定风油精中樟脑含量，灵敏度高，最小检出限低至1.3×10-3 μg，样品用量小。由于GC　MS法具有谱库检索功能，能快速判断出目标组分，除保留时间定性，还增加了辅助定性手段。

　　4.2  柱温条件选择  分别按下面条件进行测定：①进样口：140 ℃；升温程序：80 ℃保持3 min，以10 ℃/min升至140 ℃；②进样口温度：250 ℃ ；升温程序：100 ℃以20 ℃/min升至250 ℃；③进样口温度：250 ℃ ；升温程序：80 ℃保持3 min，以20 ℃/min升至250 ℃保持2 min，结果发现③分离效果较佳（分离度于2.0）。

【参考文献】
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