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霍乱弧菌的选择分离及培养实验说明

 生物探索 2013-12-24

品种名称:025050 庆大霉素琼脂

用 途:用于霍乱弧菌的选择性分离培养。

形态与特性:

  古典型霍乱弧菌和ELtor弧菌比较典型,为革兰氏阴性菌,菌体弯曲呈弧状或逗点状,菌体一端有单根鞭毛和菌毛,无荚膜与芽胞。经人工培养后,易失去弧形而呈杆状。取霍乱病人米泔水样粪便作活菌悬滴观察,可见细菌运动极为活泼,呈流星穿梭运动。营养要求不高,在霍乱弧菌PH8.8~9.0的碱性蛋白胨水或平板中生长良好。因其他细菌在这一PH不易生长,故碱性蛋白胨水可作为选择性增殖霍乱弧菌的培养基。

原 理:

蛋白胨、牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;蔗糖提供碳源;亚硫酸钠可刺激弧菌生长;柠檬酸钠、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌;霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;琼脂是培养基的凝固剂。

图鉴:

 
 

  培养基配方(每升):

  蛋白胨 10g

  牛肉膏粉 3g

  氯化钠 5g

  蔗糖10g

  柠檬酸钠10g

  无水亚硫酸钠3g

  庆大霉素500U

  琼脂15g

  最终pH8.5±0.2

  使用方法:

  1、称取本培养基56g,加入蒸馏水或去离子水1 L,加热煮沸充分溶解,冷至50℃左右,每500mL培养基加入配套试剂1支 (SR0190)( 2.5mg亚碲酸钾),摇匀,立即倾注平皿,待凝固后,备用。

  2、取待微生物检测菌的新鲜纯培养物划线接种于琼脂平板上,于36±1℃培养20—24h。

  质量控制:

  下列菌株接种后于36±1℃培养20—24h,结果如下:

  菌 名      菌 号    生长状况   菌落特征

  霍乱弧菌     V60      好     淡灰色

  大肠埃希氏菌 ATCC25922   被抑制     ——

  贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

  规 格:250g

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