| 【摘要】：乙型和丙型病毒性肝炎是两种呈世界性分布的传染性疾病,是急慢性肝病的主要原因。乙肝感染后会造成广泛的疾病谱,包括无症状的携带者,潜伏性肝炎、急性肝炎、慢性肝炎、爆发性肝炎,甚至肝硬化、原发性肝细胞癌。而丙型肝炎病毒(HCV)感染后,大约20%-30%感染者会发生自发性清除(Spontaneous Clearance),但70%-80%将会持续感染。在抗病毒治疗过程中,不同个体对干扰素治疗的应答有很大差异,约70%的病人经长效干扰素联合利巴韦林治疗一年后,可获得持久的病毒学应答(Sustained Virologic Response, SVR);而剩余30%患者对该治疗表现为无应答(No Response)。 这两种肝炎病毒感染后,疾病谱多样化,严重程度各有不同,对治疗的反应也大相径庭。大家普遍认为的病毒、环境、种族和患者的临床表现可能与疾病谱的多样化有关系,但尚不能完全解释疾病自然转归不同的真正原因。目前研究表明,宿主基因的变异是最重要的影响因素。尤其是近年来,国内外关于宿主遗传基因多态性与HCV感染转归的研究成果不断涌现,相继报道了诸如人类白细胞抗原、炎症趋化因子类,肿瘤坏死因子α(TNF-α)白介素和干扰素刺激基因等多个基因的多态性与HCV、HBV感染转归相关,都证实了宿主遗传基因变异可能导致机体免疫功能状态的差异,进而影响到HBV、HCV感染的不同临床结局。 IL28B基因编码IFN-λ3,为Ⅲ型干扰素位于19号染色体上,包含6个外显子,属于IFN-λs家族。近期在非洲、欧洲人群中进行的全基因组关联分析(Genome-wide Association Study, GWAS)鉴定发现编码IFNλ3的IL28B基因附近有一些单核苷酸多态位点与HCV病毒自发清除能力及对干扰素的应答有关,所以我们推测IL28B基因的变异及其表达可能与HCV、HBV的感染密切相关。 本文从宿主遗传易感性角度,借助国际最新关于慢性丙型肝炎宿主基因多态性的研究结果的启示,分别对丙肝感染者和乙肝感染者进行了IL28B rs12979860基因多态性及其表达水平的研究,同时对一部分丙肝患者进行了抗病毒治疗。收集我省汉族人口丙肝人群血样共896例(其中235例慢性丙肝患者参加抗病毒治疗),乙肝人群156例,所选人群符合Hardy-Weinberg平衡,通过焦磷酸测序法,分别对上述人群的IL28B SNP(rsl2979860)多态性位点(C/T)进行检测,应用ELISA试剂盒检测相关组个体血清中IL28B含量；应用Real Time PCR检测外周血单个核细胞(PBMC)中IL28B mRNA的表达情况。同时分析并评价不同基因型人群抗病毒治疗的应答情况。 结果发现,在丙肝人群研究中,中国健康人群中rs12979860 CC基因型频率为90.1%。自发清除组的C等位基因频率(rs12979860)高于于慢性感染组患者(P=0.04)。多变量Logistic回归分析,调整了性别和HBV共感染后,rs12979860基因多态性仍然是HCV自发清除的独立影响因素。在携带CC基因型患者中,HCV的自发清除率是T/C和T/T基因型患者的2倍(OR=2.13,P=0.04)。感染了HCV基因型1b型患者中,C/C基因型患者中HCV载量明显高于TC/TT基因型患者(P=0.014)。与C/C基因型患者相比,T/C或T/T基因型患者的转氨酶水平增高,差异显著。我们检测了HCV感染后不同临床转归的患者和健康人的IL28B血清水平以及其mRNA的表达水平,发现慢性HCV感染的患者中IL28B血清学和mRNA水平明显低于自发清除组和健康对照组人群。rs12979860 C/C基因型人群IL28B血清水平和IL28的mRNA表达水平都比携带T等位基因的人群稍高。在中国慢性丙肝患者的抗病毒治疗过程中,IL28B CC基因型的患者更可能获得病毒学应答,尤其是cEVR,多因素分析亦证实IL28B基因多态性是丙肝患者治疗成功与否的一项重要的预测因子。 在乙肝人群的研究中,我们共检测了156名HBV感染者和健康对照者,检测各组间IL28B血清学水平和IL28mRNA的表达水平,发现HBV携带组和健康对照组人群的IL28B无论是血清学还是mRNA的表达都明显高于其它各组(肝炎、肝硬化和肝癌组)(所有的P0.05)。IL28B血清学水平在C/C基因型中的表达高于T/C基因型人群(P0.05)。而在肝硬化+肝癌患者中,高转氨酶(ALT/AST)患者的IL28B无论在血清学还是mRNA水平都明显高于低转氨酶水平的患者(P0.05) 总之,我们的结果表明,在中国人群中,IL28B上游的rs12979860 SNP及IL28B的表达不仅与HCV感染后的临床转归有关。而且也与HBV感染后的慢性化及疾病进展有关,同时也对慢性丙肝患者的抗病毒应答与否发挥重要作用。进一步研究也表明携带IL28B保护性等位基因能够引起IL28B表达水平的升高,IL28B在mRNA水平和血清学水平的表达两方面都证实,宿主IL28B基因多态性可能直接影响了IL28B的表达,而IL28B的表达水平及其功能变化则对HCV和HBV感染后的临床转归的进程中发挥重大作用,同时机体转氨酶水平增高,免疫应答反应增强的患者中,可能IL28B也积极的参与其中。可见,无论在HCV还是HBV感染的患者人群中,IL28B SNP位点变异及其表达水平改变可能是控制HCV、HBV复制的有益因素,IL28B基因多态性及其表达与疾病进展过程密不可分。 |
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