凉血化瘀法和补肾法对肾小球肾炎大鼠血液流变学的影响

凉血化瘀法和补肾法对肾小球肾炎大鼠血液流变学的影响

健行中医康复养生------2010-10-28

 

 

北京中医药大学学报 1999年第4期第22卷 中医药实验研究
作者：彭建中　张家玮　魏民　王谦
单位：北京中医药大学　北京100029
关键词：凉血化瘀法；补肾法；肾小球肾炎；血液流变学；大鼠
　　摘要：采用大鼠肾毒血清性实验模型，分为凉血化瘀治疗组、补肾治疗组和空白对照组，各灌服8周后杀检，测定各组血液流变学指标并进行组间比较。结果表明：凉血化瘀治疗组各项血液流变学指标(全血粘度、血浆比粘度、红细胞压积、纤维蛋白原含量)均明显优于病理组，组间比较具有显著性差异；补肾组和病理组之间相比无显著性差异。说明凉血化瘀法对于实验性肾小球肾炎大鼠血液流变学指标的改善作用强于补肾法。
Effect of TCM Method Cooling the Blood and Dissipating Blood Stasis and Kidney-Tonifying on Hemorrheology of the Rat with Experimental Glomerulonephritis
Peng Jianzhong　Zhang Jiawei　Wei Min　et al.
　　(Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100029)
　　ABSTRACT: Dividing the experimental nephrolytic serum rat models into 3 groups: treatment group with cooling the blood and dissipating blood stasis method, group with kidney-tonifying method and the blank control group, after filling for 8 weeks put them to death and then assay the hemorrheology indices of each group. The results show the hemorrheology indices of treatment group with cooling the blood and dissipating blood stasis method, which include whole blood viscosity, plasma comparing viscosity, hematocrit and fibrinogen content, are all markedly better than pathological group. The inter-group comparison also differs greatly. But there is no obvious difference between the group with kidney-tonifying method and the blank control group. It indicates that the TCM method of cooling the blood and dissipating blood stasis is more effective than the kidney-tonifying method on improving the rat hemorrheology indices with experimental glomerulonephritis.
　　KEY WORDS: Cooling the blood and dissipating blood stasis; Kidney-tonifying; Glomerulonephritis; Hemorrheology; Rat
　　北京中医药大学赵绍琴教授用凉血化瘀法治疗慢性肾小球肾炎，临床疗效显著；而补肾法作为慢性肾炎的常用治疗方法在临床被广泛应用［1］。我们通过动物实验，观察凉血化瘀法和补肾法对肾小球肾炎模型大鼠血液流变学多项指标的不同影响，探讨其作用机理，为临床辨治慢性肾炎提供实验依据。
　　1　材料与方法
　　1.1　实验材料
　　1.1.1　动物：纯系雄性SD大鼠150～200g，中国科学院动物研究所提供；雄性新西兰白兔2.5kg，中国药品生物制品检定所提供。
　　1.1.2　药物：以凉血化瘀法组方的“肾炎1号”主要由小蓟、赤芍、丹参、紫草等组成。常规煎煮2次，合并煎液浓缩成每100mL溶液含50g生药；补肾法方药选用六味地黄丸(山药、山茱萸、熟地黄、丹皮、茯苓、泽泻)，常规煎煮2次，合并煎液浓缩成每100mL溶液含100g生药。药液制得后，均冰箱保存，加温后使用。所用药物均购自北京同仁堂药店。
　　1.2　实验方法
　　1.2.1　肾毒血清的制备：参考 Clarke方法［2］，复制改进型肾毒血清性肾小球肾炎动物模型。正常雄性SD大鼠，10%水合氯醛(3mL/kg)麻醉。无菌条件下，生理盐水腹主动脉灌流至肾无血色，摘取肾脏，剥离肾皮质，加入少量生理盐水置匀浆器内制成匀浆。等量匀浆与弗氏完全佐剂充分混匀制成油包水乳剂，兔脚掌皮下多点注射。以后用不完全佐剂与等量匀浆充分混匀，每两周背部皮下多点注射1次。1月后，兔耳中动脉取血1mL，用琼脂双扩散法(Agar Diffusion Test)检测血清抗体效价。若达到1∶16即可自颈动脉放血；若达不到1∶16则需继续免疫，直到达到满意效价。放血完毕，立即于4℃，5000～10000r/min低温高速离心机中离心30min，收集上清液，即为兔抗大鼠肾毒血清。分装至无菌小瓶内，标明效价及制取时间，低温冻存备用。
　　1.2.2　模型制作：70mg兔IgG溶于7mL生理盐水中，与13mL不完全佐剂充分混匀，每只大鼠0.22 mL皮下多点注射。5d后，一次性尾静脉注射兔抗大鼠肾毒血清3mL/kg。此后，皮下注射6-氨基己酸2g/kg，连续7d(首次在注射肾毒血清前2h进行)。
　　1.2.3　实验分组：将实验大鼠随机分为病理组、凉血化瘀治疗组、补肾法治疗组、正常组，每组10只。前3组均按上述方法造模。造模成功后，即两组大鼠全部出现显著性蛋白尿，部分血清生化检测结果(如血清胆固醇)与正常组相比较出现显著性差异时，凉血化瘀治疗组开始灌服“肾炎1号”，补肾法治疗组开始灌服六味地黄煎液，4组同期作对照观察。
　　1.2.4　给药方法：参考有关文献［3］，凉血化瘀治疗组每次灌胃“肾炎1号”1.8mL/只，每日1次；补肾法治疗组每次灌胃六味地黄水煎液1.5mL/只，每日1次，连续8周。病理组和正常组均用等量生理盐水灌胃，直至第8周实验结束。
　　1.2.5　指标测定：实验结束时(第8周)，各组大鼠颈动脉取血，4mL/只，枸椽酸抗凝(浓度38%)，温控于37.6℃，测定血液流变学指标。
　　2　结果
　　实验第8周末杀检，进行血液流变学指标测定。结果表明，病理组、凉血化瘀治疗组、补肾法治疗组大鼠血液流变学指标组间比较出现显著差异。凉血化瘀治疗组全血粘度值明显降低，不仅低于病理组，而且低于正常组；补肾法治疗组该项测定指标虽亦低于病理组，但高于凉血化瘀治疗组及正常组。凉血化瘀治疗组血浆比粘度值较病理组明显降低(见表1)；凉血化瘀治疗组红细胞压积值明显高于病理组；纤维蛋白原含量较病理组、正常组均明显降低；补肾法治疗组测定结果与病理组无统计学意义(见表2)。
表1　各组全血粘度、血浆比粘度测定结果 (mpa.s;±s)
组　别n全血粘度血浆比粘度
低切变率3.6s-1中切变率36s-1高切变率210s-1
病理组931.917±22.07416.291±9.0826.753±1.3471.812±0.060
凉血化瘀组97.667±3.380△△**5.109±0.964△△**3.097±0.840△△**1.360±0.118△△*
补肾法组923.317±5.846△△12.161±6.376△△6.676±0.3241.759±0.158
正常组914.597±5.817△△8.892±3.099△△5.621±0.822△1.414±0.043△△

注：与病理组比较△P＜0.05　△△P＜0.01;与补肾法组比较*P＜0.05　**P＜0.01
表2　各组红细胞压积、纤维蛋白原含量测定结果　(n=9；±s)
组　别红细胞压积/%纤维蛋白原含量/mg/%
病理组33.333±3.162486.111±187.646
凉血化瘀组38.667±2.345△△**255.556±156.294△△**
补肾法组33.500±2.777460.238±100.720
正常组37.000±3.775△△306.137±86.120△△

注：与病理组比较△△P＜0.01;与补肾法组比较**P＜0.01
　　3　讨　论
　　以凉血化瘀法治疗慢性肾炎是赵绍琴教授的成功经验。认为慢性肾炎并非肾虚，而是由于外邪入侵，久留不去，郁而化热，深入血分所致。分析其病机为热入血分、络脉瘀阻［4］。针对这一病机，确立以凉血化瘀法为基本治则，采用赤芍、丹参、紫草、小蓟等具有凉血化瘀作用的药物为主组方进行治疗，临床上取得了满意疗效。该治法的显著特点是不用传统的补肾药物，当属临床辨治慢性肾炎的新思路。本项研究设计以凉血化瘀法和补肾法对同一肾炎模型——肾毒血清性肾炎大鼠进行同步对照实验观察，通过对比两者对实验大鼠血液流变学指标的不同影响，以期初步探讨凉血化瘀法治疗慢性肾炎的作用机制。
　　实验结果表明：注射肾毒血清后第8周，病理组大鼠血液流变学指标较正常组出现明显的改变，表现为全血粘度增高，血浆比粘度增高，纤维蛋白原含量增高，红细胞压积降低；而凉血化瘀治疗组大鼠的全血粘度与纤维蛋白原含量两项测定结果，不仅低于病理组、补肾法治疗组，而且还低于正常组；同时，组间两两比较均有显著性差异。凉血化瘀治疗组的血浆比粘度同正常组相比，有降低的趋势；红细胞压积值同正常组相比，有升高的趋势。尤其值得注意的是，我们发现凉血化瘀治疗组红细胞压积增大的同时，全血粘度值反而降低，这说明凉血化瘀方药在增强红细胞变形能力和柔韧性、削弱红细胞聚集能力等方面，具有一定的作用。而补肾方药治疗组除全血粘度值低于病理组之外，其他各项血液流变学检测结果均接近病理组，同病理组相比组间差异不大。
　　现代研究已经证明，血液的高凝状态在慢性肾小球疾病的发病机理中起着不可忽视的重要作用［5］。这种高凝状态的存在，破坏了正常的血液循环，使大量的血液瘀积在肾小球毛细血管网中，不利于病变肾脏的修复。同时，肾内毛细血管的阻塞、塌陷、皱缩，不仅促使肾小球逐渐发生硬化、纤维化，而且进一步加重了血液的瘀滞程度，导致更为严重的微循环障碍。如此互为因果的病理变化，必将对肾小球的正常血液供应及其滤过功能产生不良影响，成为加重肾脏病理损害，加速肾功能恶化的重要因素。因此，改善血液高凝状态，对于促进病变肾脏的修复，控制病情的发展，具有重要意义。本研究证明凉血化瘀法能够明显改善实验性肾炎大鼠的全血粘度、血浆比粘度、红细胞压积、纤维蛋白原含量等各项血液流变学指标，其作用均明显优于补肾法。提示凉血化瘀法对于血液流变学各项指标的改善作用可能是其治疗慢性肾炎的作用机制之一。
　　作者简介：彭建中，49岁，医学硕士，副教授，硕士研究生导师。
　　参考文献
　　1　张家玮.慢性肾炎的中医临床研究概况.国医论坛，1999，14(1)：45～46
　　2　Clarke BE, Ham KN, Tange JD, et al. Macrophages and glomerular crescent formation: Studies with rat nephrotoxic nephritis. Pathology, 1983, 15:75～81
　　3　陈　奇.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993.33
　　4　彭建中.慢性肾病新论.美国中医药研究，1998，1(2)：75～76
　　5　洪淑云，李仁康，陈思源，等.活血化瘀法为主治疗慢性肾炎肾功能损害的临床观察.中医杂志，1988，29(4)：31～32

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