论文:生精汤治疗顶体酶异常男性少弱精症疗效观察---中大网校临床医学论文网

生精汤治疗顶体酶异常男性少弱精症疗效观察

发表时间：2013年6月1日22:57:48

  
 【摘要】目的 研究生精汤治疗顶体酶异常男性少弱精症的临床疗效。方法: 以45例少弱精症和25例正常生育男性为研究对象，应用改良Kennedy法检测精子顶体酶活性，观察生精汤治疗前后精子密度、活力、顶体酶活性的变化情况。结果: 生育正常组的顶体酶活性显著高于不育组（t=4.751，P=0.000）；45例患者经过三个月治疗，治疗后精子密度、a+b级精子活力、顶体酶活性比较治疗前明显改善（t=21.299, P=0.000; t=4.643, P=0.000; t=2.451, P=0.017）。结论: 生精汤治疗男性少弱精症可以提高精子顶体酶活性及其它精子动态参数，改善精子质量。
【关键词】 男性不育 精子顶体酶 中医药
【Abstract】 Objective: To observe the changes of spermatic acrosin activity in the treatment of oligoasthenozoospermia using Shengjing decoction. 45 subfertility men and 25 fertility men were recruited. Activity of acrosin was tested using modified Kennedy assay. Results: The activity of acrosin in subfertility men was markedly lower than normal controls(t=4.751，P=0.000). In oligoasthenozoospermia, after a three-month course of treatment, the level of density of sperm, grade (a+b) Sperm, acrosin activity evidently improved. Conclusion: Shengjing decoction is effective in improving acrosin activity and semen quality of oligoasthenozoospermia.
【Key words】 Male infertility Sperm acrosin TCM therapy
据世界卫生组织（WHO）统计，全世界约有15％的夫妇遭受不育的困扰，任何可能干扰精子发生、降低精子受精能力的因素，都可能导致男性不育[1]。近30年国内外不同地区文献报道50-95%的男性不育患者查不到确切病因，这些患者的精液常规检测往往表现为少弱精症。精子顶体酶活性作为精子功能检测的项目，是判断男性生育力很有价值的指标[2]。本研究应用生精汤治疗顶体酶异常少弱精症男性不育症45例，对治疗前后精子顶体酶活性和精液质量有关参数等指标进行了比较，现报道如下：
1 材料与方法
1.1 研究对象
男性不育对象选自2010年11月至2011年12月本院不育症门诊就诊的60例少弱精症患者，其中坚持完成预定疗程患者45例，年龄25～42岁，性功能正常，男科体检未发现明显睾丸、附睾及输精管异常，无外伤及遗传性疾病家族史，女方各项检测指标正常。正常生育男性25例志愿者选自产科门诊，年龄22～31岁，精子密度为50-100×106/ml。
1.2 方法
1.2.1 精液常规分析 正常生育和少弱精症患者精液标本采用血细胞计数器人工计数精子密度，采用计算机辅助精子分析系统（CASA）检测精子动态参数，检测结果参照按WHO人类精液和精子—宫颈黏液相互作用检测手册第四版（WHO,1999）标准，即精子密度<20×106/ml，或精子密度>20×106/ml，a级精子<25%，且a+b级精子<50%为少弱精症。
1.2.2 精子顶体酶活性检测 采用改良Kennedy法检测精子顶体酶活性[3]。本实验用血细胞计数板计数精子密度以减少精子顶体酶活性检测的偏差。检测步骤：1.新鲜精液充分液化后计数，按每管7.5×106精子数(公式7.5×106÷精子密度×106)，计算出所需精液量。2.取两支1.5ml的离心管，标记为测试管和对照管，各加入0.5ml Ficoll溶液，将精液轻轻铺在Ficoll溶液上，室温下1000×g离心20min。3.离心后弃上清液，留下约0.1ml 的液体。4.在对照管管中加入100μl苯甲脒溶液，测试管不加。5.在每支管中加入1ml Na-苯甲酰-DL-精胺酸-P-硝酰基苯（BAPNA）底物溶液并混匀，24℃恒温水浴箱中温育2小时，温育后加入100μl苯甲脒溶液终止反应。6.以BAPNA底物溶液为空白管，对照管为对照，测试管和对照管各取1ml加入到0.5cm比色杯中，测410nm的OD值。7.结果计算：在24℃，水解1.0μmol BAPNA/min的底物量定为1IU顶体酶活性。
顶体酶活性（μIU/106精子）=（测试管OD值－对照管管OD值）×2×106/1485×7.5
1.3 治疗方法 给药方案：男性不育症患者口服生精汤冲剂，主要成分：附子、肉桂、制黄精、肉苁蓉、茯苓、枸杞子、菟丝子、丹参、当归、桑葚子、牛膝、陈皮等。由本院制剂室提供，每次开水冲服成约120mL，每日3次口服，连服3个月。
1.4 统计学方法
采用SPSS 13.0软件包进行统计分析，计量资料用±s表示，统计方法为配对t检验分析，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 正常生育男性与少弱精症不育患者精液相关参数的比较
正常生育与不育男性研究对象的精液标本经有经验的医师进行形态学分析，同时应用精液CASA系统进行精子动态参数检测。少弱精症男性不育按治疗前后分组后与正常生育组精子参数和顶体酶活性检测结果见表1。三组检测结果的各参数进行两两比较：正常生育组与不育组治疗前、后，以及不育组治疗前和治疗后精子密度的均数相比差异有统计学意义（t=13.641, P=0.000; t=4.130, P=0.000; t=21.299, P=0.000），说明治疗后精子密度有改善；正常生育组与不育组治疗前以及不育组治疗前和治疗后a+b级精子活力的均数相比差异有统计学意义（t=5.254, P=0.000; t=4.643, P=0.000），正常生育组与不育组治疗后a+b级精子活力的均数相比差异无统计学意义（t=1.574, P=0.120），说明治疗后a+b级精子活力有改善，并且与正常生育组的精子活力相当；正常生育组与不育组治疗前精子顶体酶活性的均数相比差异有统计学意义（t=4.751, P=0.000），说明少弱精症不育患者精子顶体酶活性较低，正常生育组与不育组治疗后以及不育组治疗前和治疗后精子顶体酶活性的均数相比差异有统计学意义（t=2.592, P=0.012; t=2.451, P=0.017），说明治疗后精子顶体酶活性增高并接近正常生育组，与治疗前相比顶体酶活性有改善。

表1 正常生育与不育男性精液相关参数（±s）
# 与不育组治疗前比较P<0.05
3 讨论
顶体位于精子前端，内含多种蛋白水解酶。顶体酶是一种丝氨酸蛋白水解酶，存在于精子顶体赤道板膜及内膜上，以无活性的酶原形式存在。当精子头部进入卵细胞透明带时，顶体酶原才被激活成顶体酶。顶体酶能水解卵细胞透明带，精子才能够进入卵细胞内与卵子融合，其活性低下会影响卵丘的分解及精子对透明带的穿透，因此顶体酶活性是判断精子生育力很有价值的一项指标[4]。顶体酶的作用除了溶解透明带中的蛋白质，使精子得以穿过透明带，同时顶体酶也能降低宫颈粘液的粘度，提高精子穿过宫颈粘液的能力[5]。具有一定数量和具有一定运动能力的精子是受精的前提，而具有正常的顶体酶活性则是必要条件[6]。 
中医学认为肾藏精，主生殖，肾的精气盛衰直接关系到人的生殖功能和生长发育。男性不育症，重在调肾。药理实验证明补肾法的作用机理有三大方面：一、调整人体内分泌尤其是异常的下丘脑～垂体～睾丸性腺轴的功能，作用部位既可在靶腺(睾丸)以上，又可在靶腺，对中枢神经系统呈双向调节作用，能降低血液中催乳素浓度及血浆雌二醇与血浆睾酮的比值，提高血中睾酮浓度。二、改善睾丸、附睾血液循环，增强造精功能，促进精子的产生与成熟。三、改善生精内环境，提高精子密度、精子活动率、精子前向运动能力，改善或消除精液、精子凝集状态[7,8]。
本方剂以调肾为本，方中寒温并进，补行兼施，具有益肾生精，补气滋血活血的功效。本文中少弱精症患者与正常生育男性的顶体酶参数相比活性较低，应用本方治疗前后顶体酶活性有显著提高，但治疗后顶体酶活性与正常生育组相比仍有差距，原因为顶体酶活性个体差异大，今后需要大样本的实验加以论证。治疗前后少弱精症患者的精子密度和活力均有改善，治疗后a+b级精子活力与正常生育组男性精子活力无显著差异，说明本方具有改善精液质量的能力。文献报道精子顶体酶活性与精子密度、活力呈正相关的关系[6,9,10]，本文中少弱精症患者治疗后精子密度和活力的提高对改善精子顶体酶活性有一定的帮助。部分患者服药后自觉体力明显增强，精力较以前良好；治疗没有见明显的不良反应，具有明确的有效性和较好的安全性，可以做进一步的临床推广使用。
参考文献
[1] Krausz C，McElreavey K. Y chromosome and male infertility[J]. Front Biosci. 1999，15(4):E1-8
[2] 叶峻杰，马丽，杨丽娟，等.少弱精症患者精子顶体酶活性分析[J]. 中国计划生育学杂志，2012，20(9)：47-49
[3] 黄宇烽.男科诊断学[M]. 上海:第二军医大学出版社，1999：161-163
[4] Howes L，Jones R. Interactions between zona pellucida glycoproteins and sperm proacrosin/acrosin during fertilization[J]. J Reprod Immuuol,，2002,，53(2)：181-192
[5] 郭应禄，胡礼泉，男科学[M]. 北京:人民卫生出版社，2004：338
[6] 欧阳冰清，曹云霞，赵济华等.顶体酶活性与精子质量的关系[J]. 安徽医药，2007,，11(6)：528-530
.[7] 岳广平，陈琼，戴宁，等.补肾生精汤对肾阳虚睾丸功能损害大鼠模型作用的实验研究[J]. 中国中西医结合杂志，1997，17(5)：289-291
[8] 金之刚，陈文伯.男性不育与性功能障碍[M]. 北京:学苑出版社，1991：57
[9] 徐淑屏，占葆娥.男性不育患者精液质量与精子顶体酶活性关系分析[J]. 中华男科学杂志，2006，12(5)：438-439
[10] 陈可，包华琼，丁杰，等.精子顶体酶活性与精液常规检查参数关系分析[J]. 中国医学创新，2011，8(4)：8-10

（责任编辑：shurenadmin）