相信大家在临床都见过G试验与GM试验,同样作为针对真菌感染的检验,其有何区别与联系呢?今天的一页手册我们就来讨论一下这两项检验。 真菌(Fungus)是一种真核生物,现在已经发现了七万多种真菌,而这些真菌中,对人类有致病性的约有300多个种类。除新型隐球菌、念珠菌和蕈外,医学上有意义的致病性真菌几乎都是霉菌。 (图1 常见的可能致病的真菌种类) 真菌具有坚固的细胞壁和真正的细胞核,以寄生或腐生方式生存,典型者兼有有性生殖和无性生殖,产生各种形态的孢子。
血清G试验 G试验是目前常见的检测真菌的试验。 G试验 实验原理 G试验检测的是真菌的细胞壁成分——1,3-β-D-葡聚糖(BG)。人体的吞噬细胞吞噬真菌后,能持续释放该物质,使血液中含量增高。 1-3-β-D-葡聚糖可特异性激活鲎(Limulus)变形细胞裂解物中的G因子,引起裂解物凝固,故称G试验。
G试验 临床价值 G试验适用于除隐球菌和接合菌(毛霉菌)外的所有深部真菌感染的早期诊断。同时由于BG定植时很少释放入血,因此可有助于鉴别真菌侵袭与定植(如侵袭性念珠菌病、侵袭性曲霉菌病、肺孢子菌肺炎等)。 G试验 检验方法 常用的G试验的检测方法有两种,分别是Fungitec G test和Glucatell test。临床上常用的是Fungitec G test。需要特别指出的是,Glucatell test的说明书上面明确注明,目前该试验仅用于临床研究。二者的比较见于下表。 G试验 假阳性 可能造成血清G试验假阳性的情况: 血液透析患者; 细菌血症、肝硬化、小肠结肠炎; 患者使用凝血因子、白蛋白、免疫球蛋白;静脉使用抗生素(阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦等); 抗肿瘤准备; 香菇多糖、裂褶菌多糖; 手术中使用棉纱垫、棉拭子等; 标本溶血、脂血、黄疸; 标本污染(床边消毒纱布,实验室环境粉尘、实验耗材如枪头、试管、玻璃管)。 G试验 假阴性 可能造成血清G试验假阴性的情况: 隐球菌具有厚壁包膜,生长缓慢,导致假阴性; 局灶性曲霉病,BG很少释放入血; 抗真菌药物的使用。 总体来说,G试验是一个泛真菌血清标志物,其结果阳性无法获知是哪种真菌感染,但有高的阴性预测值,连续≥2次G试验阳性可提高G试验对IFD诊断的特异度,对于侵袭性真菌病早期诊断有一定价值。念珠菌定植不引起G试验升高,抗真菌药物治疗不影响其敏感度,且该指标能动态反映感染程度和抗真菌治疗疗效,但需要关注结果的假阳性。 血清GM试验 GM试验同样是临床中常用的检测真菌感染的方法,主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。 GM试验 实验原理 GM试验检测的是半乳甘露聚糖(glactomannan,GM)。半乳甘露聚糖是广泛存在于曲霉和青霉细胞壁的一种多糖,菌细胞壁表面菌丝生长时,半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放,是最早释放的抗原。同时GM释放量与菌量成正比,可以反映感染程度。GM试验的检测法是一种微孔板双抗体夹心法(ELISA),采用小鼠单克隆抗体EBA-2,检测人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖。在GM试验中,推荐同时检测肺泡灌洗液和血清的GM水平,可提高其检测敏感度。 (图5 GM试验的原理示意图) GM试验 假阳性 可能造成血清GM试验假阳性的情况: 使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦; 新生儿和儿童(双歧杆菌定植,使用乳制品); 血液透析; 自身免疫性肝炎等; 食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物。 GM试验 假阴性 可能造成血清GM试验假阴性的情况: 释放入血循环中的曲霉GM并不持续存在而是会很快清除; 之前使用抗真菌药物; 病情不严重; 非粒细胞缺乏的患者。
GM试验也是临床中常用的检测真菌感染的方法,由于试验检测物质的特性,GM试验在鉴别侵袭性感染或定植曲霉菌,早期曲霉菌感染的诊断,检测感染情况和疗效等方面具有很大的优势,但是,GM试验也无法提示感染的曲霉菌种类,在这一点上与G试验相同。 由于两个实验的特点,临床上可以将G试验与GM试验联合使用,这样对于临床诊断有较大的提示意义。
作者:仰望星空Pie 审阅:北京协和医院检验科杨启文 助理研究员 编辑:一枝黄花
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