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真菌,我叫你一声敢答应吗|一页手册·协和八

 hluoli 2015-10-30


小编按 协和八

相信大家在临床都见过G试验与GM试验,同样作为针对真菌感染的检验,其有何区别与联系呢?今天的一页手册我们就来讨论一下这两项检验。


真菌(Fungus)是一种真核生物,现在已经发现了七万多种真菌,而这些真菌中,对人类有致病性的约有300多个种类。除新型隐球菌念珠菌外,医学上有意义的致病性真菌几乎都是霉菌

图1 常见的可能致病的真菌种类)

真菌具有坚固的细胞壁和真正的细胞核,以寄生或腐生方式生存,典型者兼有有性生殖和无性生殖,产生各种形态的孢子


(图2 真菌的细胞结构示意图)

血清G试验

G试验是目前常见的检测真菌的试验。

G试验

实验原理

G试验检测的是真菌的细胞壁成分——1,3-β-D-葡聚糖(BG)。人体的吞噬细胞吞噬真菌后,能持续释放该物质,使血液中含量增高 1-3-β-D-葡聚糖可特异性激活鲎(Limulus)变形细胞裂解物中的G因子,引起裂解物凝固,故称G试验。


(图3 真菌的细胞壁结构示意图)


(图4 G试验的原理简单示意图)

G试验

临床价值

G试验适用于除隐球菌接合菌(毛霉菌)外的所有深部真菌感染的早期诊断。同时由于BG定植时很少释放入血,因此可有助于鉴别真菌侵袭定植(如侵袭性念珠菌病、侵袭性曲霉菌病、肺孢子菌肺炎等)。

G试验

检验方法

常用的G试验的检测方法有两种,分别是Fungitec G test和Glucatell test。临床上常用的是Fungitec G test。需要特别指出的是,Glucatell test的说明书上面明确注明,目前该试验仅用于临床研究。二者的比较见于下表。


G试验

假阳性

可能造成血清G试验假阳性的情况:

血液透析患者;

细菌血症、肝硬化、小肠结肠炎;

患者使用凝血因子、白蛋白、免疫球蛋白;静脉使用抗生素(阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦等);

抗肿瘤准备;

香菇多糖、裂褶菌多糖;

手术中使用棉纱垫、棉拭子等;

标本溶血、脂血、黄疸;

标本污染(床边消毒纱布,实验室环境粉尘、实验耗材如枪头、试管、玻璃管)。

G试验

假阴性

可能造成血清G试验假阴性的情况:

隐球菌具有厚壁包膜,生长缓慢,导致假阴性;

局灶性曲霉病,BG很少释放入血;

抗真菌药物的使用。


总体来说,G试验是一个泛真菌血清标志物,其结果阳性无法获知是哪种真菌感染,但有高的阴性预测值,连续≥2次G试验阳性可提高G试验对IFD诊断的特异度,对于侵袭性真菌病早期诊断有一定价值。念珠菌定植不引起G试验升高,抗真菌药物治疗不影响其敏感度,且该指标能动态反映感染程度和抗真菌治疗疗效,但需要关注结果的假阳性

血清GM试验

GM试验同样是临床中常用的检测真菌感染的方法,主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。

GM试验

实验原理

GM试验检测的是半乳甘露聚糖(glactomannan,GM)。半乳甘露聚糖是广泛存在于曲霉青霉细胞壁的一种多糖,菌细胞壁表面菌丝生长时,半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放,是最早释放的抗原。同时GM释放量与菌量成正比,可以反映感染程度。GM试验的检测法是一种微孔板双抗体夹心法(ELISA),采用小鼠单克隆抗体EBA-2,检测人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖。GM试验中,推荐同时检测肺泡灌洗液血清的GM水平,可提高其检测敏感度。


(图5 GM试验的原理示意图)

GM试验

假阳性

可能造成血清GM试验假阳性的情况:

使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦;

新生儿和儿童(双歧杆菌定植,使用乳制品);

血液透析;

自身免疫性肝炎等;

食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物。

GM试验

假阴性

可能造成血清GM试验假阴性的情况:

释放入血循环中的曲霉GM并不持续存在而是会很快清除;

之前使用抗真菌药物;

病情不严重;

非粒细胞缺乏的患者。


GM试验也是临床中常用的检测真菌感染的方法,由于试验检测物质的特性,GM试验在鉴别侵袭性感染或定植曲霉菌,早期曲霉菌感染的诊断,检测感染情况和疗效等方面具有很大的优势,但是,GM试验也无法提示感染的曲霉菌种类,在这一点上与G试验相同。

由于两个实验的特点,临床上可以将G试验与GM试验联合使用,这样对于临床诊断有较大的提示意义。


作者:仰望星空Pie

审阅:北京协和医院检验科杨启文 助理研究员

编辑:一枝黄花


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