茶叶多糖及钙结合物的抗氧化作用和一级结构初探

茶叶多糖（TPS）是茶叶中主要有效化学成分之一。近十 年来实验证明，TPS具有多种生理活性作用，如降血糖、降血 压、降血脂、抗凝血、抗血栓、抗炎和增强免疫功能等。 本文从粗老茶中提取TPS，制备钙与茶叶多糖络合物（简 称钙结合茶叶多糖，Ca-TPS），研究两者对超氧化物歧化酶 （SOD）、过氧化物酶（POD）及过氧化氢酶（CAT）活性的影响， 以及对超氧阴离子自由基（O_2~-）和羟自由基（OH）的清除作 用。本文还对TPS中多糖与蛋白质的结合方式等一级结构进行 了初步研究。 结果发现，在一定浓度范围内，TPS、Ca-TPS对三种抗氧 化酶的活性均有不同程度的提高。TPS和Ca-TPS对三种抗氧 化酶活性的影响趋势几乎一致，即在一定浓度范围内，随着糖 浓度的增大，酶活性不断增高，但若糖浓度过大，酶活性反而 下降。TPS及Ca-TPS对SOD活性最多提高了40％左右，而对CAT 活性甚至最多增加了5倍多和3倍多，对POD活性则分别提高 了26％和88％。 TPS及Ca-TPS对自由基的清除试验表明，TPS对自由基有 较强的清除作用，TPS与钙结合后不影响对自由基的清除效 果。TPS和Ca-TPS对O_2~-的最大清除率分别达到76.69％、 83.44％，对OH的最大清除率分别为83.97％、98.08％。 以上实验结果充分说明TPS具有抗氧化活性，而结合钙基 本不影响其活性。TPS及Ca-TPS的抗氧化机理表现在两个方 面，一是间接作用，即作用于抗氧化酶、提高酶活性；二是直 接作用，即TPS和Ca-TPS直接作用于自由基，发挥其对自由 基的清除功能。 TPS_2和Ca-TPS_2经温和碱处理后，其光吸收值在240nm处 没有明显的增大，初步说明TPS中多糖与蛋白质以N-糖苷键 方式结合。根据TPS_2及Ca-TPS_2在碱水解前后氨基酸组成变 化，进一步证明TPS中的糖肽键是N-糖苷键。 通过高碘酸氧化，发现TPS糖基中存在以二一2或二一4、 l—6 位结合的可氧化方式，其他可氧化方式和不氧化方式（1 一3）所占比例较小。 TPS。及Ca－TPS。的紫外及红外图谱表明，TPS结合钙后结 构基本维持不变。