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结核菌的实验室检测

 白雪诗 2016-09-18

结核菌的实验室检测

2016-09-17 



实验室检查是确诊结核病、选择治疗方案、评价治疗效果的重要依据,也是发现传染源,控制结核病流行的重要手段。目前,结核病常用的实验室检查主要包括:痰涂片检查、痰结核菌培养及药物敏感性试验、分子生物学检查等。


1


痰涂片检查



痰标本采集:

一般应采集3种痰标本:

即时痰:就诊即时咳出的痰

清晨痰:清晨深咳出的痰

夜间痰:就诊前夜间咳出的痰。


痰标本的要求:

痰标本采集的时间、痰标本质量好坏和是否在使用抗结核药等均直接影响结核菌的检出。痰标本应以脓样、干酪样或脓性粘液样性质的痰液为合格标本。痰量为3ml~5ml晨痰涂片阳性率比较高。当患者痰少时,可采用高渗盐水超声雾化导痰。


痰涂片结果:

包括:阳性、阴性


结果的意义:

涂片染色阳性只能说明抗酸杆菌存在,不能区分是结核菌还是非结核分枝杆菌。由于我国非结核分枝杆菌病较少,故检出抗酸杆菌对诊断结核病有极重要的意义。直接涂片方法简单、快速,应作为常规检查方法。涂片阴性不能排除肺结核,连续检查3次以上,可提高其检出率。



2


痰结核菌培养


确定诊断:

临床怀疑肺结核,但直接痰涂片结果为阴性,为进一步明确诊断,可进行痰培养。确定诊断的培养检查应采集2个合格的痰标本,即夜间痰和晨痰。


耐药监测:

以耐药监测为目的的培养,主要是为了获得分枝杆菌的纯培养物用于药敏试验,所以一般选用涂片阳性的标本进行培养。


药敏试验:

这是了解抗结核药物是否对结核菌敏感、诊断耐药结核以及指导结核病治疗的有效手段。


痰培养结果:

包括:阳性、阴性


痰结核菌培养的灵敏度高于痰涂片检查,可直接获得菌落,便于与非结核分枝杆菌鉴别。未进行抗结核治疗或停药48-72小时的肺结核患者可获得比较高的检出率。痰结核菌培养所需时间较长,一般需培养4-8周。



3


分子生物学检测


目前,国内结核病的检测,绝大部分还是采用的是痰涂片镜检。由于它敏感性差,漏检率可达40%-80%。而结核菌培养通常需要1-2个月左右的时间才能出结果,这样,在实际工作中就会带来很多问题,有时,结果还没有出来,病人却已经不在了;或病人虽然在,但早已离开医院,这就要花大量时间和精力去追踪病人。

那么如何快速、准确地诊断结核病,尤其是耐药结核病呢?


Xpert MTB/RIF:

2009年美国赛沛公司成功研发出Xpert MTB/RIF这一新型检测方法。Xpert MTB/RIF检测试剂盒适用于GeneXpert仪器,可以在2小时内直接时间从病人新鲜痰液或冻存痰液中检测是否还有结核分枝杆菌及对利福平的耐药性,整个过程都在一密闭环境中进行,手动时间短,不超过5分钟,对操作者和周围环境安全。


另,目前对结核菌的生物检测还有核酸探针检测法、聚合酶链反应(PCR)及衍生技术、基因芯片等。



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