抗体保存得当与否,直接决定了抗体的活性和使用效果!如果抗体保存得当,大部分抗体活性都可以维持数月甚至数年。请谨记!无论何时(请按照说明书推荐的保存条件正确保存抗体) 1. 收到抗体后请务必在 12000rpm 离心 1-5 分钟后再打开管盖进行分装和保存(如果抗体体积小于50ul,请延长离心时间至 5 分钟,以保证全部抗体均离心下来)! 为了昂贵&珍贵的抗体,请看清是12000rpm 2. 对于大部分抗体,比较合适的保存方式是分装后保存在-20℃或-80℃。
3. 大部分抗体收到后 4℃短暂保存1-2周对抗体活性是没有影响的。 如果抗体很快(1-2 周)会使用,推荐在4℃保存,这是为了避免反复冻融对抗体活性的损害。如果要长期保存则最好是在-20℃ or -80℃。最关键的一点是要根据说明书推荐的方式来正确的保存抗体! 但是,腹水形式的产品请在收到后立即冻起来!因为该类产品含有大量的蛋白酶,长期在4℃保存会导致抗体的降解! 4. 大部分抗体的运输条件:一般的运输过程需要1-2周的时间,所以是在4℃的条件下来完成的。4℃运输最主要的目的是为了避免反复冻融对抗体活性的损害(如果使用干冰运输,那么收到时抗体是冻起来的,为了分装就需要解冻。这就多了一次冻融的过程)。 所以运输过程中绝对避免干冰运输! 特殊抗体的保存条件:
抗体保存其它相关信息: 关于加入甘油保存:有些人会加 50%的甘油到抗体中来避免反复冻融,甘油在-20℃会降低冰点。这对很多抗体可能是可行的。加入甘油的溶液不建议在-80℃保存,因为这已经超过了甘油的冰点。如果您要加入甘油来保存抗体的话,请谨慎注意无菌操作,避免污染! 关于蛋白保护剂: 蛋白在高浓度时更不容易降解(1 mg/ml 或者更高),这就是为什么在抗体中加入 BSA 之类作为稳定剂的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以减少抗体由于管壁吸附所造成的损失。但是如果抗体要用来标记的话,则不能加入蛋白稳定剂,因为这些稳定剂会和抗体一起竞争结合标记物。 关于叠氮化钠(sodium azide)的使用:为了防止微生物污染,叠氮化钠经常被加入到抗体中(终浓度 0.02% (w/v))。 在下述情况中不能使用叠氮化钠:
叠氮化钠在抵抗微生物的同时,对其它大部分有机物也是有毒的, 因为它阻断了线粒体的 cytochrome electron transportsystem.
注:叠氮化钠的去除方式: 可以通过凝胶电泳或过滤的方式去除!IgG 的分子量是 150kDa (IgM 是~ 600kDa); 叠氮化钠的分子量只有65Da。使用 cut off 14kDa 的滤膜即可将叠氮化钠从抗体中去除。
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