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【案例经过】 秋风瑟瑟，吹拂着路人朦胧的双眸；秃秃的树干在寒风中摇曳，马上就要迟到了，来不及欣赏秋天的美景，匆匆换上操作衣直奔生化室。 一进屋，空调的味道扑面而来，远远看见小刘和实习生小王在电脑旁探讨着什么。凑近一看又是一个有问题的危急值（K、Ca），兑管的问题，紫管兑到绿管里检测生化。哎，真不知道护士是怎么培训的。看见实习生小王疑惑的眼神，我和小刘可是来劲了（展示的机会到了），我先和你说说为什么看这个结果会知道护士兑管了。1、患者的病情不支持这样的结果，医生也否认这个结果；2、EDTA-K2本身含有K，且会结合Ca离子，所以造成K高Ca低。小王似懂非懂的点了点头，回过头连续问了几个问题：那绿管兑到紫管里会对血常规产生影响么？血常规兑到凝血里会对凝血产生什么影响？有EDTA依赖性血小板减少症，为什么不直接用枸橼酸盐抗凝做血常规？我和小刘听到这些后都语塞了，因为我们也不太清楚，只好应付了小王。 【心得体会】 下班后笔者心里还是很纠结，每天上班、下班，好多问题都是知其然而不知其所以然。本着一颗好学的心，笔者决定探个究竟。通过经验和文献总结归纳如下，篇幅有限如有不妥还请指教。 【研究探讨】 不一样的采血管互兑说白了就是抗凝剂对各种检测结果的影响。再说一下抗凝剂的抗凝原理：EDTA与血液中的Ca离子形成配位化合物抗凝；枸橼酸盐与血液中的Ca离子形成螯合物抗凝；肝素与抗凝血酶Ⅲ结合，增强抗凝血酶的作用，灭火丝氨酸蛋白酶，阻止凝血酶的形成和血小板的聚集。下面进入正题，简要介绍抗凝剂对各个检测项目的影响。 一、紫管→绿管：最易发现的影响上文已提及，通过文献[1] 得知已达成共识的EDTA对生化的影响主要是使Mg和ALP显著下降。ALP的下降主要从检测原理说起，因为ALP在检测中产生的中间产物需要在碱性溶液中转变为醌式结构，进行比色分析，而EDTA-K2在抗凝的过程中产生了氢离子，而使溶液呈中性甚至酸性，故检测受到抑制。这与周新主编的《临床生物化学和生物化学检验》结论一致，也有文献认为是EDTA-K2结合了锌影响了ALP的活性，无论哪种说法，EDTA-K2的影响肯定会使ALP检测结果降低，其他检测项目因其检测方法的不同，导致影响不一。 二、绿管→紫管：1、对DNA检测的影响：造成假阴性的产生。肝素可以抑制Taq 酶的活性，从而抑制PCR的扩增，干扰DNA的合成，使DNA的检测结果出现假阴性。2、对血常规的影响：肝素抗凝主要是抑制凝血活酶与凝血酶的形成，并激活纤溶酶而发挥作用。肝素能引起PLT聚集及肿胀，过量的肝素可导致PLT破坏，对PLT计数影响最大。对细胞的影响：肝素引起血小板发生凝集，造成PLT 降低，凝集的血小板颗粒在通过血液分析仪小孔时以小细胞的形式计数，LYM会明显增高，导致白细胞总数也相应的增加。RBC、MCV、HGB 的结果无明显变化[2]。 三、篮管→紫管：对血常规的影响：枸橼酸钠呈碱性，虽然可与Ca形成可溶性螯合物进行抗凝，但是其抗凝性较EDTA抗凝性弱，也易使PLT聚集而致总数减少。凝集的血小板造成LYM计数增高，WBC相应增多，但由于枸橼酸钠抗凝剂的含水量较高，会引起血液稀释，抵消了部分增加的LYM的数量，使WBC增加不明显，但此结果不可靠，同时造成RBC 、HGB 的降低，其与EDTA-K2抗凝的血液相比较，差别有显著性(P<0.01)[2]。 四：紫管→篮管：我们知道APTT是检测内源性凝血系统的筛选试验，而PT是检测外源性凝血系统的筛选试验。枸橼酸盐和EDTA均是与血浆中的钙离子结合从而达到抗凝，但是凝血真空管的内壁经过硅化处理，可有效阻止凝血因子的激活；枸橼酸盐可有效地阻止因子Ⅴ 、Ⅷ 的降解，对凝血因子有很好的保护作用；而EDTA对凝血因子(尤其Ⅴ、Ⅷ因子)有易变失活作用，因此EDTA会导致PT和APTT的延长[3]。 五：绿管→篮管：低分子肝素是血栓栓塞性疾病治疗的临床常用药，其中绿管中的肝素能与血中抗凝血酶Ⅲ ( AT-Ⅲ )结合，形成肝素AT-Ⅲ复合物，作用于凝血活酶，并阻止因子Ⅷ、Ⅺ、Ⅸ的活化，阻止血小板释放ADP、PE-3而影响血小板聚集，从而产生强大的抗凝血作用，抑制许多凝血反应，所以少量的肝素即可引起PT与APTT的延长。据文献报道肝素对APTT影响比PT更敏感、更显著[4]。因此临床采用APTT来检测肝素的治疗效果。 六：篮管→绿管：由于枸橼酸盐与EDTA的抗凝作用机理相似，所以其与EDTA对生化的影响也类似。因其抗凝剂含有金属阳离子会对细胞内外的离子分布产生影响，又因其可与钙和镁络合，使得部分需要钙和镁作为激活剂和稳定剂的酶类测定产生明显干扰。篇幅有限，不做一一说明。 参考文献： [1] 黄金文.EDTA-K2对一系列生化检验项目结果的干扰[J].国际检验医学杂志,2010,8(31):881-882. [2] 许德英,常永超,张淑珍等. 4种抗凝剂对血液分析仪计数结果的影响[J].洛阳医专学报,2001,19(2):156-157. [3] 从玉隆,张玉鹏.血液学检验分析前质量控制的重要因素—标本的采取及其控制.中华检验医学杂志, 1998, 21(1):52. [4] 张俊玲.不同抗凝剂对PT、APTT测定结果的影响[J].职业与健康,2009,25(19):43. 检验视界网微信平台独家首发，转载请注明来源及作者！
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