|
????? 沙眼衣原体（Ct）是一种常见的性传播疾病感染源，尤其在青少年人群中多发，共分为15 ~ 19个主要血清型。多形外膜蛋白（Pmp）是衣原体特有的外膜蛋白，包含9个分型（PmpA ~ I），功能可能与宿主细胞的粘附、自我转运、信号转导等有关。Pmp蛋白具有与自我转运蛋白相似的3个功能区域，即N端信号肽、娩出域和C端易位区。Pmp蛋白依赖包含多个保守的短重复4肽基序GGA（I，L，V）和FXXN的N端娩出域易位到细菌表面，因此此类蛋白可介导衣原体感染上皮或内皮细胞。前期研究表明，CtPmpI可能是衣原体噬菌体phiCPG1衣壳蛋白Vp1粘附并结合到Ct表面的位点。 沙眼衣原体多形外膜蛋白PmpI的原核表达、纯化、抗体制备及鉴定 郭睿 刘原君 郑蕾 王生 魏世娟 刘全忠 作者单位：天津医科大学总医院皮肤性病科 郭睿等用生物信息软件分析沙眼衣原体多形外膜蛋白PmpI的基因序列并预测PmpI蛋白的B细胞抗原表位。以D型沙眼衣原体DNA为模板，PCR扩增PmpI基因N端90 ~ 1464碱基序列，构建原核载体进行诱导表达。Ni离子亲合层析柱纯化重组蛋白，制备PmpI多克隆抗体并用Western印迹法检测其免疫原性，为进一步了解噬菌体粘附Ct的机制及作用提供依据。 重组 N?PmpI 蛋白诱导表达及纯化结果 对蛋白质的二级结构和柔性区、氨基酸的亲水性、抗原指数和表面可及性预测结果综合分析，推测该蛋白含有8个优势B细胞表位。PCR扩增D型Ct PmpI基因核苷酸序列长度为1 375 bp。成功构建pET28a?PmpI原核表达重组体，经诱导表达、亲和层析纯化后获得了相对分子质量为50 000的重组蛋白并制备其多克隆抗体。成功克隆并表达了D型沙眼衣原体多形外膜蛋白N?PmpI，为研究该蛋白的生物学功能奠定了一定基础。 本研究成功克隆并表达了D型Ct多形外膜蛋白N-PmpI，为研究PmpI蛋白的自我转运与孔道形成机制以及其粘附噬菌体前后的构象改变奠定了一定基础，同时促进对衣原体噬菌体作用机制的探究，有望使噬菌体治疗成为解决难治性衣原体感染的有效手段。 DOI：10.3760/cma.j.issn.0412?4030.2016.11.010 《中华皮肤科杂志》，2016，49（11）：801-805 喜欢这篇文章，就在下面 |
|
|
