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一、色谱柱的使用
反相色谱柱一般是保存在甲醇或乙腈中。使用前一定注意所使用的流动相和甲醇或乙腈能够互溶。色谱柱在保存过程中有可能因为溶剂的挥发而干涸，所以在使用流动相分析之前应使用10—20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱。如果所使用的流动相中含有缓冲盐，则应注意用水作为过渡，而不能直接将有机溶剂和缓冲盐直接混合。测试结束后冲洗柱子也要注意这一点。还有一点需要注意的是最好不要使用纯水冲洗色谱柱。对于非极性柱，比如C8和C18，由于纯水不能浸润填料表面而冲倒碳链，造成柱效下降。另外，分析样品时由于纯水不能浸润填料表面形成水膜，出现样品不保留而使分离度下降，重复性差，所以对于一般的C8和C18柱，有机溶剂的比例不应低于5%。
二、色谱柱的再生
再生过程中用来冲洗色谱柱的溶剂体积可以参照下表：
再生过程及溶剂冲洗顺序可参见下表：
三、色谱柱的维护
1.尽量能够使用预柱或保护柱保护色谱柱；
2.大多数色谱柱的PH范围是2—8，尽量不要超过范围使用；
3.避免流动相的组成或比例急剧变化；
4.流动相使用前必须进行过滤和脱气处理；
5.如果使用极性或粒子性的缓冲液作流动相，实验完毕后应将色谱柱冲洗干净。
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