一、色谱柱的使用 反相色谱柱一般是保存在甲醇或乙腈中。使用前一定注意所使用的流动相和甲醇或乙腈能够互溶。色谱柱在保存过程中有可能因为溶剂的挥发而干涸,所以在使用流动相分析之前应使用10—20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱。如果所使用的流动相中含有缓冲盐,则应注意用水作为过渡,而不能直接将有机溶剂和缓冲盐直接混合。测试结束后冲洗柱子也要注意这一点。还有一点需要注意的是最好不要使用纯水冲洗色谱柱。对于非极性柱,比如C8和C18,由于纯水不能浸润填料表面而冲倒碳链,造成柱效下降。另外,分析样品时由于纯水不能浸润填料表面形成水膜,出现样品不保留而使分离度下降,重复性差,所以对于一般的C8和C18柱,有机溶剂的比例不应低于5%。 二、色谱柱的再生 再生过程中用来冲洗色谱柱的溶剂体积可以参照下表:
 再生过程及溶剂冲洗顺序可参见下表: 三、色谱柱的维护 1.尽量能够使用预柱或保护柱保护色谱柱; 2.大多数色谱柱的PH范围是2—8,尽量不要超过范围使用; 3.避免流动相的组成或比例急剧变化; 4.流动相使用前必须进行过滤和脱气处理; 5.如果使用极性或粒子性的缓冲液作流动相,实验完毕后应将色谱柱冲洗干净。
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