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仔猪抖抖病-猪非典型瘟病毒（APPV）的最新研究进展及对防控的几点启示 导读 从2015年美国报道猪非典型瘟病毒（atypical porcine pestivirus, APPV）以来，这种能够引起仔猪先天性震颤（俗称“抖抖病”）的病毒受到越来越多的关注。 从文献报道来看，APPV疫情主要发生于新引进的后备猪所产的第一窝小猪，提示我们在防控上可能要做好后备母猪的隔离驯化。此外，其组织嗜性与猪瘟病毒（CSFV）富集在脾脏、肾脏等实质器官不同，其主要富集在淋巴结、神经运动器官及血液，这对于我们采集组织及分离病毒有积极的提示作用。 本文中小编试图结合文献，从流行病学、临床症状、病毒基因型及组织嗜性、传染源和传播途径、免疫力等方面介绍APPV的最新研究进展及对防控的几点启示。 一、并不是所有的先天性震颤（congenital tremor）都是传染病 根据大脑和脊柱是否有组织学损伤，可将先天性震颤分为A型和B型。B型震颤大脑和脊柱没有组织学损伤，A型有组织学损伤。A型又可分为I-V 5种亚型。 从下图可以看出，只有A-I与A-II是传染病，A-I 型是由猪瘟（CSFV）引起，但是A-II型的病因此前尚未可知。 Patterson等将A-II型先天性震颤的仔猪的脑、脊髓及脾脏匀浆物接种母猪，能够诱导仔猪出现相同的情况，因此提示A-II型先天性震颤是由传染病原引起的。本文主要探讨A-II型先天性震颤的最可能的病因：APPV。 图1、A型先天性震颤的5种类型 二、猪非典型瘟病毒（APPV）可能是引起A-II型先天性震颤的主要原因 1#农场： 2012年最初的20周内，231窝头胎母猪中有48窝所产仔猪出现先天性震颤情况。在出现症状的第8周，该病发病率达到高峰，13窝头胎母猪中11窝出现病情（85%），断奶前死亡率达到26%，正常情况下，断奶前死亡率只有11%。2013年1月、3月、4月分别都有先天性震颤的爆发，检测毒株都是NL1毒株。 2#-11#农场：发生疾病的仔猪血清检测APPV100% （99/99）阳性！ 对照农场：未观察到症状的猪场，也能够检测出9%的APPV阳性！（6/66） 图2、1-11#农场的APPV流行情况 将APPV人工接种头胎怀孕母猪（妊娠期30天接种），50及51号母猪所产仔猪的先天性震颤主要为轻微的震颤（仅为后驱的震颤，而非中等或者重度的震颤：整个躯体都出现震颤）。50及51号头胎母猪所产仔猪分别有3/13，7/15头出现八字腿情况，49号母猪生产仔猪未出现先天性震颤情况。 图3、人工接种后备猪所产仔猪先天性震颤情况 启示 未观察到明显的症状的猪场，也能够检测出APPV阳性，提示可能未充分重视APPV引起的疫病情况。另一方面轻微的临床症状（如八字腿）可能也是我们忽略该病毒的重要原因。 暂以异源性10%为划分标准，将2012-2016年荷兰分离的毒株分为A/B/C三个基因型，其中，型内核苷酸异源性在3%~5%，型间异源性在10%左右。同源性曲线分析表明编码区并没有特别保守的序列。而且尽管2012-2014年1#农场中测序得到的毒株都处在同一型内，但是也出现不同程度的毒株进化。 图4、APPV基因进化树 腹股沟淋巴结、扁桃体和血清中检测到APPV的病毒含量最高（另外有文章表明（如下图），病毒含量最高的组织包括舌腭肌的腺体，颌下淋巴结，胃，小脑，髓鞘、肱二头肌等）。 图5、APPV在各组织中的检出量（Cq） 启示 非典型瘟病毒（APPV）比较容易出现变异，可能增加防控的难度。 哪些器官和部位含有病毒量最高？不同的研究结果并不完全一致，但最有可能的部位包括扁桃体，淋巴结等免疫器官（脾脏除外），小脑、髓鞘、肱二头肌等神经运动系统及病毒血症期间的血液，传统的瘟病毒如猪瘟（CSFV）的易嗜组织如肾脏、脾脏、肝脏则检出量很小。这给我们采集组织分离病毒及制作自家苗有重要的提示作用。 垂直传播：跟踪5头生产先天性震颤仔猪的母猪发现，在分娩时，所有的母猪血清中APPV抗原已经转阴，提示仔猪的感染发生在怀孕阶段的垂直传播。 病毒血症：在出生的第1周内仔猪100%（12/12）出现病毒血症，第3周92%（11/12）出现病毒血症。第6周，第9周100%（29/29）出现病毒血症（104~106 copies/ml）。4.5个月，大部分仔猪症状消失后，35%（7/20）仍然有病毒血症。
粪便排毒：第1周67%（10/15）的仔猪粪便中检测出APPV，第3周83%的仔猪（10/12）检测出病毒，继续跟踪5头仔猪直至后备阶段，6、7、7.5个月后分别能够从粪便中检测到病毒的比例为100%（5/5）、100%（5/5）、60%（3/5）。 图6、APPV的粪便排毒时间（pos：阳性，ND：未检测到） 启示 疫病的垂直传播提示要做好母猪的免疫。 4.5个月的病毒血症及7个月的粪便排毒时间，提示循环存在的无症状携带者是猪场主要的传染源！ 大多数的A-II型先天性震颤病例都来自后备母猪，尤其是新引种进入的后备母猪。在头胎母猪出现症状后，后面的胎次反而极少出现临床病例。 启示 母猪免疫力在保护仔猪方面起到重要的作用，在防控方面尤其要做好后备母猪的驯化。 荧光定量PCR 引物F：CGTGCCCAAAGAGAAATCGG 引物R：CCGGCACTCTATCAAGCAGT 参考文献： 1、CongenitalTremor. Available online:http://www./bulletins/congenital-tremor.aspx 2、Presenceof atypical porcine pestivirus (APPV) genomes innewborn piglets correlates with congenital tremor 3、AtypicalPorcine Pestivirus: A Possible Cause of Congenital Tremor Type A-II in NewbornPiglets 4、Identification of a divergentlineage porcine pestivirus in nursing piglets with congenital tremors andreproduction of disease following experimental inoculation |
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