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栀子豉汤的药效物质基础研究

 老玉米棒 2017-05-11
栀子豉汤出自汉代医圣张仲景的《伤寒论》,由栀子和淡豆豉两味中药组成,是典型的复方中药药对,临床上对于焦虑、抑郁、失眠及神经衰弱等亚健康状态具有良好的调节和改善作用。中药成分的复杂性给它的现代化研究带来很大的挑战,中药复方尤甚。虽然国内外对于栀子和淡豆豉单味药材的化学成分及药理活性研究可以为栀子豉汤调治亚健康状态的药效提供一定的理论依据,但是目前对于栀子豉汤复方配伍及药效物质基础的现代研究却鲜有报道。本论文首先对栀子豉汤的配伍进行了研究,考察了栀子和淡豆豉不同配伍比对化学成分煎出率的影响。以环烯醚萜苷和大豆异黄酮为主要指标性成分,采用紫外分光光度法测定两类成分在复方不同配伍比中的煎出量;确定了栀子豉汤最佳配伍比为栀子:淡豆豉(2:1)。采用HPLC法测定主要指标性成分煎出量的变化,研究了配伍前后主要指标性成分所发生的质的改变和量的变化,发现中药复方配伍可以影响到药效成分的煎出,从而影响药效的发挥。选用D101型大孔吸附树脂对栀子豉汤的有效部位群进行分离制备,通过优化分离纯化工艺的条件,成功的从栀子豉汤中分离得到有效部位群:环烯醚萜苷类和大豆异黄酮类。采用]HPLC-UV法对17个不同产地的栀子药材和15个不同产地的淡豆豉药材建立了指纹图谱并进行了方法学考察。然后对指纹图谱进行了效果评价,采用相似度评价标识了栀子里的23个共有峰和淡豆豉里的12个共有峰,并应用主成分分析和聚类分析的方法对不同产地的药材进行分类,并通过对这些共有峰对质量的影响程度进行分析,选取出栀子共有峰中峰5、6、7、12、15、17、19对栀子质量影响最大,淡豆豉共有峰中峰6、7、8、9、10、11对淡豆豉质量影响最大。并筛选出质量较优产的的药材,即广西南宁和上海产地的栀子以及浙江杭州和重庆产地的淡豆豉。以上海产地的栀子和浙江杭州产地的淡豆豉配伍的栀子豉汤建立了栀子豉汤的化学指纹谱。采用HPLC-DAD-ESI-MS定性分析对药材质量影响较大的成分,并总结了环烯醚萜苷类成分,有机酸类成分以及大豆异黄酮类成分的ESI-MS裂解规律,应用于栀子豉汤中活性成分的快速定性鉴别,鉴别出23个活性成分(去乙酰基车前草酸,栀子新苷,山栀苷,栀子苷酸,去乙酰基车前草酸苷甲酯,羟异栀子苷,鸡矢藤次苷甲酯,京尼平-1-β-D-龙胆双糖苷,5-O-绿原酸,栀子苷,大豆苷,黄豆黄苷,槲皮素-3-芸香糖苷,染料木苷,3,4-二-O-咖啡酰基奎宁酸,3,5-二-O-咖啡酰基奎宁酸,6”-O-反式-阿魏酰京尼平龙胆二糖苷,4,5-二-O-咖啡酰基奎宁酸,西红花苷-I,3,4-二咖啡酰基-5-(3-羟基-3-甲基)戊二酰基奎宁酸,4-芥子酰-5-绿原酸,6’’-O-反式-苯乙烯醛基京尼平龙胆二糖苷黄豆苷元,黄豆黄素,染料木素),并对17个成分进行了含量测定。

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