在生化室工作,相信大家都会遇到一些尴尬的“负值”标本,对于这样的结果,我们显然是不能够审核发出去的。这时候,就需要我们仔细的复查,用心的分析了。 案例一:标本溶血或乳糜血引起的负值。 通常标本如果溶血或乳糜血一般标本都会打回去重新抽取,但是一些病号尤其是新生儿不好采血,采几次都是溶血,没办法只能够上机做,备注上溶血。但是我发现溶血的标本,总胆红素或直接胆红素容易为负值甚至测不出来。还有乳糜血的标本,由于病人服用药物,导致血脂代谢异常,清淡饮食依然乳糜血,只能上机做,发现载脂蛋白A和载脂蛋白B容易出现负值。 案例分析:由于总胆红素或直接胆红素使用重氮盐法,说明书上有说重度溶血的标本,对其影响极大,主要是吸光度的计算,溶血标本的空白值大于水空白,根据朗伯比尔定律A=lg(1/T)=Kbc,A为吸光度,T为透射比,是透射光强度比上入射光强度 K为摩尔吸收系数.它与吸收物质的性质及入射光的波长λ有关。 c为吸光物质的浓度 b为吸收层厚度。测量值比空白值反而小,所以为负值。乳糜血的道理跟这差不多,都是因为测量值小于空白,所以为负值。 遇到这样的情况我们应该及时与临床沟通,不合格标本强行检验,结果能够仅供参考。做不出来或负值的与临床沟通后,在化验单备注好测不出的项目。 案例二:试剂交叉污染引起的负值。 最近一周,胆汁酸质控做的不好,定标后,就在控,但是病人的标本经常有负值出现,然后复查后结果又正常了。这是怎么回事? 案例分析:胆汁酸跟组合项目一起查则为负值,然而单独重新检测又可以出数值。联系试剂工程师,他说是交叉污染。原来胆汁酸和胱抑素C放在一起会有交叉污染。 TBA采用循环酶法,试剂组成成分:R1:甘氨酸缓冲液(pH3.0), 硫代辅酶(Thio-NAD)R2:还原型辅酶Ⅰ, 3α-HSD。检验原理是胆汁酸被3α-羟基类固醇脱氢酶及Thio-NAD特异性地氧化,生成3-酮类固醇及Thio-NADH,此外,生成的3-酮类固醇在3α-羟基类固醇脱氢酶及NADH存在下,生成胆汁酸和NAD。如上述,循环往复从而放大微量的胆汁酸量,测定生成的Thio-NADH的吸光度变化,以求得胆汁酸值。这种方法很容易造成交叉污染,有文献报道[1-3]UA试剂中的含抗坏血酸成分,TG、CHO试剂中的胆汁酸钠,都会影响TBA检测的准确性。 而胱抑素C采用胶体金免疫比浊法,该试剂盒包括:试剂1:磷酸缓冲液(PH=6.7);试剂2:胶体金包被的抗胱抑素C多克隆抗体。由于试剂2含有大量的胶体金颗粒,试剂针不易清洗干净,很容易对本来就容易交叉污染的胆汁酸造成污染,所以为负值。最后将胆汁酸换了一个试剂位置,让它两边均没有其他项目,问题迎刃而解。 那么还有没有其他情况呢?笔者上网搜索了,果然,还有一些情况,例如标本量过少,有气泡,纤维蛋白原,还有水质不好,仪器故障,比色杯过脏等等。 总之,在检验标本的时候,我们一定要仔细,负值结果在某种意义上来说也可以反映很多问题。我们应该分析原因,找到解决办法,争取让我们的结果更准确! 参考文献: [1] 陈寿林.生化检测中的交叉污染及预防[J].实用现代医学,2003,15(11);598 [2] 顾国宝,陈洁,李燕,等.全自动生化仪项目使用间交叉污染的探讨[J].上海医学检验杂志,2002,17(3);176-177 [3] 向学优,王新华,汤建华,等尿酸试剂携带污染对总胆汁酸测定结果的影响[J].中华医护杂志,2006,3(2);180-181 检验视界网微信平台独家首发,转载请注明来源及作者! 点击标题查看
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