肥大细胞活化相关分子及其抗体在过敏性皮肤病中的鉴别诊断价值许 雯1，郝婷婷2，李 佳1，李钦峰1，李甲勇1，张汝霖1，王玉萍1，李 莉1 （1.上海交通大学附属第一人民医院检验科，上海 200080；2. 徐州医学院附属医院检验科，江苏 徐州 221006） 摘要：目的探讨肥大细胞活化相关分子及其抗体[IgE、抗IgE抗体、IgE高亲和力Fcε受体α（FcεRⅠα）、抗FcεRⅠα抗体]在慢性荨麻疹及湿疹中的鉴别诊断价值。方法收集57例慢性荨麻疹、70例湿疹及75名体检健康者（正常对照组）血清标本及临床资料，并将慢性荨麻疹组及湿疹组合并作为过敏性皮肤病组。采用速率散射比浊法检测血清IgE，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测抗IgE抗体、FcεRⅠα、抗FcεRⅠα抗体，使用SPSS 17.0软件对检测结果进行统计分析。结果过敏性皮肤病组及慢性荨麻疹组患者血清IgE和 FcεRⅠα水平显著高于正常对照组（P＜0.01），而抗IgE抗体水平却显著低于正常对照组（P＜0.01），抗FcεRⅠα抗体水平与正常对照组间差异无统计学意义（P＞0.05）；湿疹组患者血清IgE及FcεRⅠα水平显著高于正常对照组（P＜0.01），抗FcεRⅠα抗体水平亦高于正常对照组（P＜0.05），而抗IgE抗体水平与正常对照组间差异无统计学意义（P＞0.05）。湿疹组患者血清抗IgE抗体和抗FcεRⅠα抗体水平略高于慢性荨麻疹组（P＜0.01、P＜0.05）。经受试者工作特征（ROC）曲线分析，IgE、FcεRⅠα对湿疹的诊断性能相近，而FcεRⅠα对慢性荨麻疹的诊断性能优于IgE。结论IgE、FcεRⅠα可作为诊断慢性荨麻疹的实验室指标，检测IgE、FcεRⅠα的抗体可能有助于慢性荨麻疹和湿疹的鉴别诊断。 关键词：肥大细胞；活化；慢性荨麻疹；湿疹；过敏反应 过敏性皮肤病也称变态反应性皮肤病，是最常见、最复杂的皮肤病，其发病机制与变态反应的Ⅰ型（速发型）和Ⅳ型（迟发型）相关。慢性荨麻疹和湿疹是由这2类变态反应所致的具有代表性的皮肤病。虽然过敏性皮肤病确切的发病机制尚不明确，但与过敏相关的机制主要是肥大细胞的活化已得到公认。在经典的过敏反应中，过敏原特异性IgE与其高亲和力Fcε受体（fc epsilon receptor Ⅰ，FcεRⅠ）的α链结合致敏肥大细胞，当该抗原再次进入机体与细胞表面IgE分子结合时，形成FcεRⅠ-IgE-抗原复合物，促使FcεR交联，活化肥大细胞，使患者出现一系列症状[1]。在临床上常见过敏性疾病患者症状明显，但血清总IgE及过敏原特异性IgE不高的现象，推测可能是由于患者血清中存在一些自身抗体如抗IgE抗体、抗FcεRⅠ抗体等，通过模拟IgE-抗原的作用方式与FcεRⅠ结合，形成FcεRⅠ-IgE-抗IgE抗体或FcεRⅠ-抗FcεRⅠ抗体复合物，诱导肥大细胞活化而致[2-3]。本研究检测慢性荨麻疹和湿疹患者血清肥大细胞相关分子及其抗体（IgE、抗IgE抗体、FcεRⅠα、抗FcεRⅠα抗体）水平，旨在为进一步探讨上述各指标对过敏性皮肤病的诊断价值。 材料和方法一、一般资料 选择2014年10月至2015年6月在上海交通大学附属第一人民医院皮肤科确诊的慢性荨麻疹患者57例，其中男28例、女29例，年龄（44.9±17.5）岁；湿疹患者70例，其中男35例、女35例，年龄（47.9±18.0）岁。将慢性荨麻疹患者及湿疹患者合并为过敏性皮肤病组，共127例，其中男63例、女64例，年龄（46.6±17.7）岁。选择同期体检健康者75名作为正常对照组，其中男41例、女34例，年龄（42.3±14.9）岁。 二、仪器与试剂 血清抗IgE抗体、FcεRⅠα、抗FcεRⅠα抗体检测试剂盒购自上海蓝基生物科技有限公司，血清IgE检测试剂盒购自德国西门子公司，BNⅡ特定蛋白分析仪购自德国西门子公司。 三、方法 血清IgE抗体、FcεRⅠα、抗FcεRⅠα抗体采用竞争性酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测，血清IgE采用速率散射比浊法定量检测，以上所有项目检测均按照仪器和试剂提供的操作说明书严格执行。 四、统计学方法 采用SPSS 17.0软件进行统计分析，肥大细胞相关分子及其抗体定量检测数据呈偏态分布，用中位数（M）[四分位数（P25，P75）]表示，采用Mann-Whitney U秩和检验进行分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。 结 果一、各组间肥大细胞活化相关分子及其抗体表达水平的比较 慢性荨麻疹组患者血清IgE和 FcεRⅠα水平显著高于正常对照组（P＜0.01），而抗IgE抗体水平却低于正常对照组（P＜0.01）。湿疹组患者血清IgE及FcεRⅠα水平高于正常对照组（P＜0.01），抗FcεRⅠα抗体水平亦高于正常对照组（P＜0.05）。与慢性荨麻疹组比较，湿疹组患者血清抗IgE抗体和抗FcεRⅠα抗体水平略高，差异具有统计学意义（P＜0.01、P＜0.05）。见表1。 二、 FcεRⅠα、IgE对不同疾病诊断价值的比较 经受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线分析，FcεRⅠα、IgE对湿疹的诊断性能相近，而FcεRⅠα对慢性荨麻疹的诊断性能优于IgE。见表2、图1。在ROC曲线敏感性和特异性的基础上，根据平行试验联合敏感性计算方法：联合敏感性=A敏感性+ [（1-A敏感性）×B敏感性]，得到FcεRⅠα、IgE联合诊断过敏性皮肤病的敏感性为0.966。 表1 各组间肥大细胞相关分子及其抗体检测水平的比较 [M（P25，P75）]  注：与正常对照组比较，*P＜0.05、**P＜0.01；与湿疹组比较，#P＜0.05、##P＜0.01 组别例数IgE （IU/mL）抗IgE抗体（μg/mL）FcεRⅠα（μg/mL）抗FcεRⅠα抗体（μg/mL）过敏性皮肤病组12787.30（29.60，83.60）**0.91（0.72，1.20）**4.20（2.92，5.76）**37.64（30.42，43.33）慢性荨麻疹组5779.40（17.45，221.50）**0.78（0.60，0.97）**##5.01（3.50，6.01）**36.55（29.86，41.78）#湿疹组7094.70（44.00，294.50）**1.02（0.87，1.59） 3.62（2.43，5.13）**38.64（33.10，60.32）*正常对照组7529.60（17.50，83.60）1.20（0.93，1.57） 2.14（1.40，3.26）35.90（28.02，47.05） 表2 FcεRⅠα与IgE对各疾病的诊断价值   图1 FcεRⅠα与IgE对不同疾病诊断的ROC曲线 讨 论肥大细胞作为经典的过敏反应效应细胞，在机体内广泛分布，可被多种刺激物激活，通过脱颗粒释放生物活性物质，在多种疾病尤其是过敏反应性疾病中发挥重要作用[4-5]。经典的Ⅰ型变态反应机制是多价过敏原被肥大细胞细胞膜上FcεRⅠ结合的特异性IgE捕捉，导致相邻FcεRⅠ交联而引起肥大细胞活化，这正是本研究结果中慢性荨麻疹组和湿疹组患者血清IgE表达较正常对照组异常升高的原因。此外，有研究发现肥大细胞也可被一系列其他可导致FcεRⅠ交联的物质活化[1，6]。人IgE高亲和力FcεRⅠ是由α、β和2条γ链构成的四聚体，其中α链为IgE结合部位，因此可以通过检测FcεRⅠα的水平了解FcεRⅠ的表达情况。本研究发现，虽然FcεRⅠα在人体内的含量不高，但在过敏性皮肤病患者血清中的表达水平显著高于正常对照组，因此我们推论：过敏性皮肤病患者过敏反应的发生依赖于血清IgE、FcεRⅠα的表达。与抗IgE抗体降低表现不同，过敏性皮肤病患者抗FcεRⅠα抗体水平与正常对照组相当，说明过敏性皮肤病患者体内存在着多余的抗FcεRⅠα抗体，当其与FcεRⅠα形成复合物后就激活了肥大细胞，诱发过敏反应，最终造成疾病的发生。这一结论与VONAKIS等[7]对慢性结肠炎的研究结果相一致，他们在研究中指出临床常见过敏性疾病患者症状明显，但过敏原特异性IgE和血清总IgE常常不高的现象，可能是因为检测手段和方法的敏感性、特异性不足，也可能是因为体内除IgE之外另有过敏介质作为激活过敏反应的物质所致，如血清中存在抗IgE抗体、抗FcεRⅠ抗体等，通过模拟IgE-抗原的作用方式与FcεRⅠ结合，形成FcεRⅠ-IgE-抗IgE抗体或FcεRⅠ-抗FcεRⅠ抗体复合物，诱导肥大细胞的活化。 荨麻疹虽属于速发型变态反应，但患者经常表现为迁延不愈，当病程超过6周时，即被诊断为慢性荨麻疹。虽然慢性荨麻疹的发病机制尚不明确，但目前大部分研究认为与肥大细胞的活化脱颗粒相关[8]，这再次解释了本研究慢性荨麻疹患者血清IgE、FcεRⅠα升高的原因，IgE和FcεRⅠα在体内可能扮演着结合过敏原刺激肥大细胞活化的角色。慢性荨麻疹过敏反应的发生不仅仅是IgE参与了肥大细胞的活化，其后续的反应系统需进一步研究分析。而关于湿疹的研究发现，湿疹是由内、外因素共同作用而引起的一种迟发型变态反应，其具体发病机制尚未完全阐明[9]。本研究显示，IgE、FcεRⅠα及抗FcεRⅠα抗体与正常对照组间存在较大差异，提示可能有部分IgE不高的湿疹患者通过FcεRⅠα-抗FcεRⅠα抗体途径活化肥大细胞，但其具体作用机制需要进一步探讨。 明确一个检测项目在疾病辅助诊断及鉴别诊断中的作用常常是医学检验研究的主要目的。本研究发现，慢性荨麻疹组和湿疹组之间抗FcεRⅠα抗体及抗IgE抗体存在统计学差异，这2项指标将可用于慢性荨麻疹与湿疹的鉴别诊断，这尚待我们收集大样本进行进一步研究来验证。此外，由于慢性荨麻疹与湿疹患者IgE及FcεRⅠα水平均显著升高，经过对IgE和FcεRⅠα进行ROC曲线分析后发现，FcεRⅠα对慢性荨麻疹的诊断性能优于IgE，推测使用FcεRⅠα或FcεRⅠα与IgE联合检测对慢性荨麻疹的诊断有更好的提示作用，这与之前黄燕等[10]报道的结果相符。而在湿疹患者中这2项指标的诊断性能相似，当患者受条件约束时，可指导选择较经济的项目进行检查。在本研究中，我们将慢性荨麻疹组和湿疹组合为过敏性皮肤病组，与正常对照组进行比较后发现，凡是过敏性皮肤病患者无论是湿疹患者还是荨麻疹患者，血清肥大细胞相关分子均同时发生改变，其中IgE和FcεRⅠα水平升高，抗IgE抗体表达下降，这对于皮肤科相关疾病的诊断有着重要的意义。 综上所述，肥大细胞相关分子及其抗体检测不但有助于解释慢性荨麻疹和湿疹的发病机制，更有利于疾病的诊断和鉴别诊断。然而，由于本研究选择的病例数及病种有限，后续研究将以本研究结果为实验基础，在扩大已有病种的病例数的同时补充白癜风、过敏性皮炎、特异性皮炎及银屑病等其他种类过敏性皮肤病，并增加其他过敏相关指标的检测，从而更加全面地阐述肥大细胞活化相关分子及其抗体在过敏性皮肤病中的诊断价值。 参考文献： [1]GALLI SJ，NAKAE S，TSAI M. 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Mast cell activation related molecules and antibodies in differentiating allergic skin diseases
Abstract：ObjectiveTo investigate mast cell activation related molecule antibodies，IgE，anti-IgE antibody，fc epsilon receptor Ⅰ alpha（FcεRⅠα） and anti-FcεRⅠα antibody，in chronic urticaria and eczema and the significance in the diagnosis of chronic urticaria and eczema.MethodsA total of 57 patients with chronic urticaria，70 patients with eczema and 75 healthy subjects（healthy control group） were enrolled. Serum specimens and their clinical data were collected. The results of chronic urticaria and eczema groups were merged as those of allergic skin disease group. Serum IgE was determined by speed scattering turbidimetric method，and anti-IgE antibody，FcεRⅠα and anti-FcεRⅠα antibody were determined by enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）. All data were analyzed by SPSS 17.0.ResultsSerum IgE and FcεRⅠα in allergic skin disease and chronic urticaria groups were higher than those in healthy control group（P＜0.01），while anti-IgE antibody was lower（P＜0.01），and anti-FcεRⅠα antibody had no statistical significance with that in healthy control group（P＞0.05）. Compared with healthy control group，serum IgE and FcεRⅠα in eczema group were higher（P＜0.01），anti-FcεRⅠα antibody was higher（P＜0.05），but anti-IgE antibody showed no statistical significance（P＞0.05）. Anti-IgEantibody and anti-FcεRⅠα antibody in eczema group were higher than those in chronic urticaria group（P＜0.01，P＜0.05）. Receiver operating characteristic（ROC） curve showed that the performance of IgE and FcεRⅠα was similar in the diagnosis of eczema，and the performance of FcεRⅠα was better than that of IgE.ConclusionsIgE and FcεRⅠα can be used as parameters for the diagnosis of chronic urticaria，and they can improve the diagnosis of chronic urticaria and eczema. Key words：Mast cells；Activation；Chronic urticaria；Eczema；Anaphylactic reaction 文章编号：1673-8640（2016）12-1036-04 中图分类号：R446.62 文献标志码：A DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2016.12.006 （收稿日期：2016-05-05） （本文编辑：姜 敏） 基金项目：国家自然科学基金青年项目（81401335）；上海市科技委员会项目（14411963200）；上海市卫生局科研课题（20124184）；上海申康医院发展中心医院临床辅助科室能力建设项目（SHDC22014005） 作者简介：许 雯，女，1985年生，学士，主管技师，主要从事肥大细胞与过敏性疾病的关系研究。 通讯作者：李 莉，联系电话：021-63240090。 |
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