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高压均质黄桃果汁的
响应面法优化及稳定性表征
石天琪,王子宇,张霞,莫芳,张甫生
(西南大学食品科学学院,重庆400715)
收稿日期:2016-12-27
作者简介:石天琪(1996-),女,本科生,研究方向:果蔬加工,E-mail:472429011@qq.com。
通讯作者:张甫生(1983-),博士,副教授,研究方向:果蔬非热加工与碳水化合物,E-mail:zfsswu@163.com。
基金项目:国家自然科学项目基金(31301599);中国博士后科学基金(2014M551502)。
摘要:为改善黄桃果汁的品质,采用高压均质处理来提高黄桃果肉果汁的稳定性。在单因素实验的基础上,以果汁
稳定系数和离心沉淀率为响应值,采用响应面法对高压均质条件进行优化。结果显示:均质压力30MPa、均质温度
32℃、均质次数3次时,黄桃果汁稳定系数为0.928,离心沉淀率为10.57%,具有较好的稳定性;且采用粒度仪测定黄
桃果汁高压均质前后粒径变化,果汁平均粒径均质前为3.840μm,均质后为0.722μm,粒径显著减少,也说明果汁稳定
性显著提高;同时显微镜分析表明均质后果汁中细胞碎片明显增多、变小、不粘连,多呈散状。
关键词:黄桃,高压均质,稳定性,响应面
Responsesurfacemethodoptimizationandstabilitycharacterizationof
high-pressurehomogeneousyellowpeachjuice
SHITian-qi,WANGZi-yu,ZHANGXia,MOFang,ZHANGFu-sheng
(CollegeofFoodScience,SouthwestUniversity,Chongqing400715,China)
Abstract:Inordertoimprovethestabilityofpeachjuice,highpressurehomogenizationwasappliedtoprocessyellowpeach
juice.Basedonsinglefactorexperiment,responsesurfacemethodwasusedtooptimizethehomogenizationconditionsbyusing
juicestabilitycoefficientandcentrifugalprecipitationrateastheresponsevalue.Theresultsshowedthatwhenthe
homogenizationpressurewas30MPa,thetemperaturewas32℃andthenumberofhomogenizationwas3times,thestability
coefficientandcentrifugalsedimentationrateofpeachjuicewas0.928and10.57%,respectively,whichindicatedgood
stability.Moreover,theparticlesizesofpeachjuicebeforeandafterhigh-pressurehomogenizationweredeterminedbyparticle
sizeanalyzer,theaverageparticlesizewas3.840μmbeforehomogenizationand0.722μmafterhomogenization,indicatingthat
thestabilityoffruitjuicewassignificantlyimprovedduetothereducedparticlesize.Inaddition,microscopicanalysisalso
showedthatthecelldebrisinthehomogenizedjuiceincreasedobviously,andbecamesmaller,non-adhesiveandscattered.
Keywords:yellowpeach;high-pressurehomogenization;stability;responsesurfacemethodology
中图分类号:TS255.1文献标识码:A文章编号:1002-0306(2017)13-0019-07
doi:10.13386/j.issn1002-0306.2017.13.004
黄桃,又名黄肉桃(AmygdaluspersicaL.),隶属于
蔷薇科(Rosaceae)桃属(Persica),因其果肉呈金黄色
而得名。黄桃汁多味美,且含有大量人体所需的纤
维素、胡萝卜素、番茄红素及微量元素等营养成
分
[1-3]
,深受消费者青睐。黄桃采收季节一般集中在
7月下旬至9月上旬,此期间气温高且湿度大,黄桃
不易储藏;除鲜食外,黄桃常加工成罐头、果脯及提
取活性成分等,其中尤以黄桃罐头为主。近几年来,
随着消费意识升级和购买力的提高,果汁消费逐年
增长,几乎以年均14.5%速度快速增长,果汁饮料现
已成为生活中必备品之一
[4]
。黄桃酸甜可口,开发黄
桃果汁饮品具有较高的经济价值,但黄桃果汁在加
工与贮藏过程中同样极易发生浑浊,严重影响产品
品质。如何减少果汁浑浊及提高果汁稳定性,成为
食品企业和科研人员亟待解决的问题。
目前改善果汁稳定性的方法,一般为添加合适
增稠剂、热处理复合酶解及高压均质等手段。如采
用羧甲基纤维素、黄原胶、果胶、卡拉胶等一种或多
种复合增稠剂来增强苹果汁
[5-6]
、沙田柚汁
[7]
等的浑
浊稳定性,以及采用热处理复合酶解来提高香蕉
汁
[8]
、人参果汁
[9]
、苹果汁
[10-11]
的出汁率与稳定性,但
过多增稠剂与酶蛋白会影响果汁口感与风味。高压
均质(highpressurehomogenization)是目前较为常用
提高果汁稳定性的手段,是一种纯物理的非热加工
20
技术;一般在常温下进行,能最大限度地维持果蔬汁
原有的营养,对于低温冷藏果蔬汁尤为适用。如高
压均质可使番茄汁
[12]
、胡萝卜汁
[13-14]
、橘汁
[15-16]
及枣
汁
[17]
等果汁的平均粒径降低,稳定性提高;但也有研
究显示高压均质可使带肉果汁的粘度下降,稳定性
降低,这可能不仅与果肉含量和颗粒状态有关,也与
果汁的破坏和重组有关,同时还受到果汁中糖、酸、
果胶等因素的影响
[18]
。
黄桃果汁体系富含未破碎的植物细胞、果胶、纤
维素、半纤维素等大分子,体系成分复杂极易絮凝、
下沉出现分层现象,严重影响黄桃果汁产品品质及
货架期。采用高压均质处理来改善黄桃果汁稳定性
是一种有效方法,特别是对于非热杀菌冷链黄桃果
汁。但目前尚未见有关高压均质对黄桃果汁处理的
相关报道。为此,本实验采用高压均质处理黄桃果
汁,使果肉颗粒破碎并均匀分散,减小颗粒直径,降
低单颗粒的体积和质量;并以黄桃果汁稳定系数及
离心沉淀率为目标值,对高压均质条件进行响应面
优化,以期获得安全、绿色的果汁饮品,为黄桃果汁
生产与研究提供理论支持和技术参考。
1材料与方法
1.1材料与仪器
黄桃产地为江苏南京中原果园,品种为黄金
蜜,采摘时间为9~10月份,个大饱满,肉质脆嫩,无
腐烂,无病虫害;果胶酶10万U/g,宁夏和氏璧生
物技术有限公司。
T6新世纪型紫外可见分光光度计北京普析通
用仪器有限责任公司;DHR-1流变仪美国TA公
司;ZFL8022型胶体磨台州卓凡电器制造有限公
司;GYB60-6S型高压均质机上海东华高压均质机
厂;MJ-BL25B3型榨汁机、C21-WT2116型电磁
炉广东美的生活电器制造有限公司;5810R型冷冻
离心机美国艾本德公司;NDJ-5S数字旋转粘度计
上海恒平科学仪器有限公司;HH-6型数显恒温水浴
锅金坛市富华仪器有限公司;马尔文纳米粒度电
位仪英国Malvern公司;光学显微镜奥林巴斯
(中国)有限公司。
1.2实验方法
1.2.1工艺流程挑选品质新鲜、无腐烂、色泽良好
的九成熟黄桃,切半,去核,去皮;放入质量分数为
0.8%,温度为90~95℃的氢氧化钠溶液中浸泡30~
60s以腐蚀黄桃表皮;后将黄桃迅速放入喷淋池中
在流动水中搓揉去皮、漂洗、冷却,并除去附着的碱
液;再将漂洗后的黄桃进行修整,剔除伤烂斑点等不
合格果块;最后将切瓣黄桃在沸水中(含0.1%柠檬
酸和0.03%抗坏血酸)灭酶处理2min,取出冷却,用
榨汁机破碎,加入一倍量的水、0.4%果胶酶
[19]
,与果
汁充分混合,再用胶体磨充分细化1次,均质备用。
1.2.2稳定系数的测定稳定系数即离心后的浊度
对离心前的浊度的比值。果汁的浑浊稳定性可用果
汁经离心力作用后其吸光度值来衡量。稳定系数越
大,表明果汁的浑浊稳定性越好。用去离子水调零
做参照,分别将黄桃果汁样品(30mL)置于离心管
中,在5000r/min的转速下,离心15min,取出静置
10min,用移液枪吸取稀释一倍后的上清液,在
420nm波长处测定吸光度值
[20]
,按下列公式计算得
到稳定系数。
稳定系数=离心后上清液吸光度值(Abs)/原果
汁吸光度值(Abs)
1.2.3离心沉淀率的测定将黄桃果汁样品
(30mL)置于离心管中,在5000r/min的转速下,离
心15min,取出静置10min,除去上清液,测量残余物
质量,并按下式计算离心沉淀率(WHC)。悬浮沉淀
物越多,即沉淀率越高,黄桃果汁越不稳定
[21-24]
。
沉淀率=沉淀质量(g)/原果汁质量(g)
1.2.4单因素实验设计在前期实验的基础上,以
黄桃汁的稳定系数和离心沉淀率为考察指标进行评
价和分析,分别选取均质压力、均质温度、均质次数
对实验影响较大的三个单因素,确定其最佳参数作
为响应面分析因素。
1.2.4.1均质压力对黄桃汁稳定性的影响在均质
温度35℃,均质次数为1次的条件下分别考察均质
压力为0、10、20、30、40MPa时对黄桃汁稳定性的影
响,按1.2.2和1.2.3方法测稳定系数和沉淀离心率,
每组实验重复3次。
1.2.4.2均质温度对黄桃汁稳定性的影响在均质
压力20MPa,均质次数为1次的条件下,设置均质温
度为0、25、35、45、55℃测定黄桃汁的稳定性,按1.2.2
和1.2.3方法测稳定系数和沉淀离心率,每组实验重
复3次。
1.2.4.3均质次数对黄桃汁稳定性的影响在均质
压力20MPa,均质温度为35℃的条件下,分别考察
均质次数0、1、2、3、4、5次时对黄桃汁稳定性的影响,
按1.2.2和1.2.3方法测稳定系数和沉淀离心率,每组
实验重复3次。
1.2.5响应面优化实验在单因素实验的基础上,
以黄桃果汁稳定系数和离心沉淀率为响应值,设计
三因素三水平的响应面优化实验,各工艺参数如表1
所示。
表1响应面实验水平表
Table1Factorsandlevelsinresponsesurfacedesign
因素
编码及水平
-101
A高压均质压力(MPa)102030
B高压均质温度(℃)253545
C高压均质次数123
1.2.6粒径分布的测定用纳米粒径分析仪器测定
黄桃果汁粒径分布情况。开机后设定测定条件:折
射率为1.590,温度为25℃,粘度为0.8872cP,介电
常数为78.5,粒径范围为0.3nm~10μm。在室温下
吸取优化后(均质压力30MPa,均质温度32℃,均质
3次)的1mL黄桃果汁稀释500倍后置于样品池中,
采用动态光散射法
[25-26]
测定高压均质前后黄桃果汁
粒径大小。
1.2.7微观结构观察用光学显微镜观察黄桃果汁
微观结构的方法,以获得果汁直观清楚的结构图像,
21
实现对黄桃果汁微观结构简便快捷的观察与分析。
调节校准显微镜物镜,将均质前和优化后的(均质压
力30MPa,均质温度32℃,均质3次)黄桃果汁样品
稀释一倍后,在玻片中涂膜,晾干后,放置在显微镜
载物台上,进行10×显微镜观察,比较均质前后果汁
颗粒大小与形态结构变化。
1.2.8数据统计与分析利用Origin8.6与Design-
Expert处理分析实验数据,实验均做3次平行,取平
均值,结果以平均值±标准差形式表示。
2结果与讨论
2.1高压均质对黄桃果汁稳定系数以及离心沉淀率
的影响
2.1.1均质压力对黄桃汁稳定系数和离心沉淀率的
影响不同均质压力下的稳定系数和离心沉淀率如
图1所示。
图1均质压力对黄桃果汁稳定系数和离心沉淀率的影响
Fig.1Effectsofhomogenizationpressureonthestability
coefficientandcentrifugalprecipitationrateofyellowpeachjuice
由图1可知,果汁稳定系数随着均质压力的增
加先增加后减小,离心沉淀率则随着均质压力的增
加先减小后增大。0~20MPa时,由于均质压力增加,
会使果汁受到剪切和撞击的作用,果肉颗粒变得越
来越小,提高了果汁的悬浮稳定性;但20MPa后果
汁悬浮稳定性却呈现出下降的趋势,可能是因为均
质压力不断增加,果汁中悬浮颗粒半径变小,表面积
增大,布朗运动的速度加快,颗粒碰撞次数增多,从
而使颗粒容易聚合,导致果汁粘度降低,果汁的悬浮
稳定性降低
[27-28]
。这与徐伟
[4]
等人研究均质对毛酸
浆果汁稳定性影响的结果一致。因此,根据上述分
析结果及从稳定系数高、离心沉淀率较低角度考虑,
实验中均质压力选择10~30MPa为宜。
2.1.2均质温度对黄桃汁稳定系数和离心沉淀率的
影响不同均质温度下的稳定系数和离心沉淀率如
图2所示。
由图2可知,果汁稳定系数随着均质温度的升
高先增加后减小,离心沉淀率随着均质温度的升高
先减小后增大。0~35℃的温度下,由于均质温度升
高,使黄桃中的果胶释放出来,果胶物质对果汁中残
存的果肉等细小悬浮物起保护作用,还可以和蛋白
质、酚类物质、细胞壁碎块等形成悬浮胶粒
[29]
,果汁
粘度增加,提高了果汁的悬浮稳定性。但是,均质温
度超过35℃,稳定性下降,这可能是由于悬浮胶粒
引起电荷中和,导致胶体凝集,而导致果汁粘度降
图2均质温度对黄桃果汁稳定系数和离心沉淀率的影响
Fig.2Effectsofhomogenizationtemperatureonthestability
coefficientandcentrifugalprecipitationrateofyellowpeachjuice
低,使果汁浑浊
[10,30]
。这与吴治海
[31]
研究的胡萝卜、
杏混合汁的悬浮稳定性结果相似。综合果汁稳定系
数高,离心沉淀率低的角度考虑,将高压均质温度设
定为25~45℃可满足果汁加工要求。
2.1.3均质次数对黄桃汁稳定系数和离心沉淀率的
影响不同均质次数下的稳定系数和离心沉淀率如
图3所示。
图3均质次数对黄桃果汁稳定系数和离心沉淀率的影响
Fig.3Effectofhomogenizationtimesonthestability
coefficientandcentrifugalprecipitationrateofyellowpeachjuice
由图3可知,果汁稳定系数随着均质次数的增
加先增加后减小,离心沉淀率随着均质次数的增加
先减小后增大。一定均质次数下,由于均质压力作
用,会使果汁受到剪切和撞击的作用,果肉颗粒变得
越来越小,粘度增加从而提高了果汁的悬浮稳定性。
但是,均质次数超过3次时,均质次数的增加使果汁
颗粒间摩擦力和剪切力作用增大,导致整体温度升
高,黄桃颗粒粒径变小,表面积增大,颗粒之间的相
互作用增强,从而使颗粒容易聚集,黄桃汁出现相分
离
[23]
,果汁体系变得不稳定,果汁粘度降低,故果汁
的稳定系数下降,离心沉淀率升高。实验结果与史
垠垠
[32]
对白果饮料稳定性研究的结果一致。根据果
汁颗粒大小和果汁加工工艺要求,选择均质1~3次
为之后的实验内容较为恰当。
2.2响应面实验优化
2.2.1响应面实验结果根据Box-Behnken中心设
计原理,在单因素实验基础上,以高压均质压力(A)、
高压均质次数(B)、高压均质温度(C)三因素作为响
应因素,黄桃果汁的离心沉淀率以及稳定系数作为
响应值进行实验,实验结果如表2。
22
表3黄桃汁稳定性回归模型各项方差分析
Table3Varianceanalysisofstabilityregressionmodelofyellowpeachjuice
方差来源
稳定系数离心沉淀率
平方和F值p值显著性平方和F值p值显著性
模型0.47206.21<0.0001**126.36148.26<0.0001**
A0.099388.41<0.0001**18.51195.42<0.0001**
B0.01454.910.0001**8.0284.71<0.0001**
C1.568E-0036.140.042447.61502.79<0.0001**
AB4.290E-00316.790.0046**16.89178.41<0.0001**
AC0.028109.16<0.0001**9.2898.04<0.0001**
BC0.01453.580.0002**13.42141.74<0.0001**
A
2
0.028107.93<0.0001**5.4757.800.0001**
B
2
0.096375.39<0.0001**0.101.100.3287
C
2
0.16631.00<0.0001**6.1564.91<0.0001**
残差1.788E-0030.66
缺失项1.231E-0032.950.16180.535.160.0734
纯误差5.572E-0040.14
综合0.48127.02
注:显著,p<0.05;**极显著,p<0.01。
表2响应面实验的稳定系数及离心沉淀率的方案及结果
Table2Theschemeandresultsofstabilitycoefficient
andcentrifugalprecipitationrateresponsesurfacetest
实验号ABC稳定系数
离心沉淀率
(%)
11100.58911.834
20-110.53512.7408
30000.77817.4417
40000.75317.7237
50000.76717.6922
61010.7029.7715
71-100.73217.7894
8-1-100.42516.4817
90000.78217.3505
10-1100.41318.747
110-1-10.40521.7095
120110.32814.2442
13-10-10.45517.506
1401-10.43215.8855
15-1010.33116.0996
1610-10.49217.2719
170000.77817.3452
2.2.2回归模型建立及方差分析利用Design-
Expert软件对表2数据进行逐步回归拟合,所得回归
方程如下:
稳定系数的回归方程:Y=0.77+0.11A-0.042B
+0.014C-0.033AB+0.084AC-0.058BC-0.081A
2
-
0.1B
2
-0.20C
2
由表3可知,稳定系数回归方程模型的p<
0.0001(极显著),缺失项不显著,R
2
=0.9962表明回
归方程充分拟合实验数据。A、B、C、AB、AC、BC、A
2
、
B
2
、C
2
的p值均小于0.05,说明均质压力、均质温度、
均质次数以及其交互项和二次项均对稳定系数有显
著影响;各因素的效应关系为均质压力>均质温度
>均质次数。
离心沉淀率的回归方程:Y(%)=17.51-1.5A-
1.00B-2.44C-2.06AB-1.52A×C+1.83B×C-1.14A
2
-0.16B
2
-1.21C
2
由表3可知,离心沉淀率模型的p<0.0001(极显
著),缺失项不显著,R
2
=0.9948表明回归方程充分
拟合实验数据。A、B、C、AB、AC、BC、A
2
、B
2
、C
2
,均小
于0.05,说明均质压力、均质温度、均质次数以及其
交互项和二次项对离心沉淀率都有显著影响,B
2
对
结果影响不显著;各因素的效应关系为均质次数>
均质温度>均质压力。
2.2.3响应面分析由表3、表4和回归方程可知,均
质压力、均质温度、均质次数均为影响黄桃果汁稳定
性的主要因素;各因素间交互项影响如图4、图5所
示,图4中,均质压力与均质次数、均质温度与均质
压力、均质温度与均质次数的等高线都很密集,两两
交互作用显著;图5中,三个响应面图坡面均陡,且
有极值,表明所有组交互作用均显著,与方差分析表
结果一致。
2.2.4高压均质黄桃汁工艺的优化与验证根据优
化回归方程计算分析,最优条件为高压均质压力30
MPa,均质温度32.31℃,均质次数2.93次,该条件所
制备的黄桃汁稳定系数为0.932,离心沉淀率为
10.48%。将最佳条件调整为均质压力30MPa,均质
温度32℃,均质次数3次,此条件下进行验证实验,
得到的黄桃果汁稳定系数为0.928,离心沉淀率为
10.57%,与理论值0.932和10.48%相近,可见回归模
型能很好地预测黄桃果汁的稳定性,优化结果可靠。
2.3黄桃果汁粒径分布的表征
微粒的粒径与果汁的稳定性并非呈简单的正比
关系,而是在某一粒径时稳定性最好,也就是说,在
工艺上采用某一特定均质条件时,对饮料的稳定性
效果最好,这可能是因为均质压力低,蛋白质粒子过
23
图4各因素交互作用对黄桃汁稳定系数的影响
Fig.4Effectoftheinteractionofvariousfactors
onthestabilitycoefficientofpeachjuice
大,在溶液中易沉淀而不稳定;当均质压力过高时,
蛋白质粒子过小,吸附作用增强而凝聚,也不稳定。
其次,介质粒子越大,沉降速度也就越大;粒子越小,
沉降速度也就越小。介质粒度过大而导致沉降速度
变快也是破坏果汁稳定性的重要因素。均质前后黄
桃果汁的粒径分布情况如图6所示。由图6可知,均
质前后黄桃果汁粒径分布平均粒径分别为3.840μm
和0.722μm,均质后颗粒平均粒径小于1μm;结果
与Augusto
[33]
等报道的高压均质能够将番茄汁中完
整细胞和细胞碎片破坏成更小的悬浮颗粒一致。
2.4颗粒形态观察结果
高压均质对黄桃果汁显微结构的影响情况,如
图7所示。从图7中可知,均质前黄桃颗粒为片状
物、纤维、蛋白等大分子物质,均质后颗粒碎片明显
变小变碎。这是因为均质有一个破碎的效应,对果
肉颗粒破碎的效应,从而使颗粒变小。由于强大的
压力,可以促使一些小颗粒团聚,团聚以后,小颗粒
之间的范德华力保证了这些颗粒在降压后不被分
开。均质处理的果肉饮料中,在果肉颗粒微粒化的
过程中可以及时地使其与周围分散介质中的某些物
质接触结合,或者使其中添加的稳定剂充分均匀的
图5各因素交互作用对黄桃果汁离心沉淀率的影响
Fig.5Effectofinteractionfactors
onthecentrifugalgranulationofyellowpeachjuice
分散到整个物系中,从而形成更为稳定的饮料体系。
这与前面粒径分析的结果一致,均说明高压均质后
的黄桃果汁具有更好的稳定性。
3结论
均质是一种纯物理的加工手段,能较好地破碎
果肉果汁的颗粒,使细胞细化变小,提高果汁的稳定
性,还能最大程度地保留果汁营养,对于非热加工冷
藏黄桃果汁,尤为适用。实验通过对均质压力、温
度、次数进行优化,得出当均质压力30MPa,均质温
度32℃,均质3次时,制得的黄桃果汁稳定系数为
0.928,离心沉淀率为10.57%,与理论值相近,优化结
果可靠。此外,从显微结构图与粒度分析可以看出,果
汁果粒变小了,果汁平均粒径从均质前3.840μm降至
均质后0.722μm,均质后细胞碎片明显增多、变小,也
证明黄桃果汁稳定性得到提高。总之,采用响应面
优化均质工艺,便于黄桃果汁加工过程中参数控制;
同时均质作为一项果蔬汁加工技术,在提高果汁特
别是热敏性果汁稳定性方面具有广泛的应用前景,
且能减少化学稳定剂的使用,最大限度保证果汁(特
别是热敏性果汁)天然风味和营养价值。
24
图6均质前后黄桃汁的粒径分布
Fig.6Particlesizedistributionof
Peachjuicebeforeandafterhomogenization
注:A:均质前,B:均质后,图7同。
图7黄桃果汁颗粒显微镜结构图(10×)
Fig.7Structureofopticalmicroscope(10×)
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29
子机制,同时,玄参中其它未分离的成分是否有较好
的降糖作用也需进一步的探讨。
3结论
本实验对玄参70%乙醇提取物的化学成分进行
了系统研究,从中分离得到9个化合物,分别鉴定为
类叶升麻苷、升麻素苷、桃叶珊瑚苷、哈巴苷、蔗糖、
肉桂酸、哈巴俄苷、安格洛苷C、二十七烷。同时,采
用人肝癌细胞HepG2建立了高糖细胞模型,分离的
化合物对降糖的活性均具有不同程度的促进作用,
且在0.1~2.5μg/mL浓度范围内,哈巴俄苷在HepG2
细胞中降糖活性最好。其中,二十七烷为首次从该
属植物中分离得到,哈巴俄苷是一个潜在的降糖化
合物,值得进一步研究和开发。
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