western 内参总是跑不齐是什么原因

做western还是新手，我是成纤维细胞提的总蛋白，现在β-actin总是跑不齐，bca定量之后跑actin差距很大。跑完一次之后再根据条带亮度调整上样量之后再跑还是结果不均一 ，调整几次蛋白都要用完...

• 十月飞雪123
• 发表于 2015-09-28

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ksharp98

常驻站友

上样前样品要充分复温 并用vortex充分混匀 如果样品中的SDS不充分溶解 并且没有充分混匀那你做一次一个结果 且结果不可重复 还有一点 你上同一个样品 做出的内参都不一致说明你的实验操作方面还是有...

• 2015-09-28

• 6
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十月飞雪123

入门站友

谢谢老师 样品中SDS不充分溶解是什么意思？ 配好的loading buffer是没有沉淀的啊？actin我买的cst的 但是特别不好用 杂带特别多以及曝光曝的也不是很好 一般要几分钟才能出 是不是要...

• 2015-09-30

• 1

wenshl2005

丁香园准中级站友

需要排除的东西比较多，没在你身边看你做实验，不好说。

• 2015-10-03