【589期-1】体内CTC检测技术在肺癌和肺癌高危人群检测和筛查的研究

背景介绍

肺癌是世界范围内发病率和死亡率均居首位的恶性肿瘤。肺癌筛查能够提早发现肿瘤病灶延长生存期。目前低剂量螺旋CT（low-dosecomputed tomography，LDCT）是肺癌筛查的重要手段，但仅有5-10%筛查到的肺结节可能为恶性肿瘤。循环肿瘤细胞（circulatingtumor cell，CTC）是指进入外周血循环的肿瘤细胞，在血液中含量极少，且半衰期较短，但具有一定的临床应用价值。体外CTC检测技术受样本量的制约，检出率较低，在肺癌早期筛查中研究较少。另外，CTC在中晚期肺癌中具有预后评估和用药指导等应用价值，但低检出率和捕获到的CTC难于分离进行下游检测仍然是制约其临床应用的两个主要因素。CellCollector是一种新型体内CTC检测技术，克服了传统体外样本量的限制，有效的提高CTC检出率。本研究拟利用CellCollector在肺癌早期筛查（联合LDCT检测）和中晚期肺癌患者中开展CTC检测（结合NGS检测），从细胞水平和DNA水平进行研究。

 

研究方法

共入组早期初诊肺癌患者16名，年龄范围36-79岁，平均年龄54岁；利用CellCollector在治疗前检测1次，该组作为阳性对照组；利用低剂量螺旋CT对符合入组条件的高危人群（共8313人）进行筛查，随机抽取肺结节患者32名进行CTC检测。19个健康志愿者（4名男性，15名女性；年龄41-78岁，平均48岁）入组为健康组作为阴性对照。CTC阳性样本分离细胞后进行下游全基因组扩增并进行二代测序（nextgeneration sequencing，NGS）分析。CTC全基因组扩增利用MALBAC的方法，扩增模板利用CancerHotspot Panel进行肿瘤相关位点检测。

 

研究结果

利用低剂量螺旋CT对符合入组条件的高危人群（8313人）进行筛查，共筛查到131为具有肺磨玻璃结节患者，占总人数的0.39%。

表1 研究流程

其中，32名肺结节患者（14名男性，18名女性；年龄36-83岁，平均52岁）接受1次CTC检测，共有5名患者为CTC阳性（CTC数量≥1），中位值为1（范围1-2）。

图1 体内CTC检测原理和肿瘤细胞鉴定

图2 CellCollector在肺癌和GGNS中检出率

将5例CTC样本进行全基因组扩增和测序分析，发现5例样本中都具有KIT，TP53和SMARCB1突变，另外，AKT1，APC，PTEN以及RB1等基因出现的突变频次也较高。

图3 NGS分析捕获分离CTC基因突变情况

 

研究结论

本研究表明体内检测策略，可有效提高CTC检出率，在中国肺癌人群中的检出率与欧洲人群中基本一致。并且CTC检测联合LDCT在高危人群筛查方面具有潜在的临床应用价值。CTC结合基因水平研究，可能在指导用药和分析CTC恶性倾向方面具有一定价值。该研究结论还需要进一步的随访数据支持以及大样本量的试验结果的验证。

作者介绍

本文责任作者为河北医科大学第四医院单保恩院长，简介如下：

单保恩，男，1962年5月生，河北医科大学党委常委、河北医科大学第四医院院长、河北省肿瘤研究所所长，医学博士，博士生导师、教授。享受国务院特殊津贴，全国优秀科技工作者，全国优秀院长，国家五一劳动奖章获得者，河北省高端人才，省管优秀专家。国家自然基金专家评审组、科技部国际科技合作重点项目计划、教育部博士学位授权点、中国科协决策咨询、中华医学科技奖评审委员会等专家。

已培养31位博士和博士后、149位硕士，获国家发明专利10项，出版著作28部，发表论文446篇（SCI论文105篇）。省部级科技进步一等奖3项、二等奖3项、三等奖16项。任中国免疫学会常务理事，中国诱变剂学会常务理事、抗癌专业委员会副主委，中国抗癌协会常务理事、肿瘤标志物专业委员会副主委，中华医学会肿瘤学分会常委，中国医师协会检验医师分会常委，中国医院协会肿瘤医院管理协会常委，河北省免疫学会理事长等。《肿瘤基础与临床杂志》主编，《临床荟萃》和《癌变·畸变·突变》副主编，《中国免疫学杂志》等十二种国家核心期刊杂志常务编委，《Cellular Immunology》和《Anti-Cancer Gene Therapy》等SCI杂志审稿专家。

本文第一作者为河北医科大学第四医院贺宇彤教授，简介如下：

贺宇彤，主任医师，教授，医学博士，硕士研究生导师。1992年7月毕业于河北医科大学预防医学系，分配至河北医科大学第四医院肿瘤研究所肿瘤防治室工作。1998年获河北医科大学公共卫生学院流行病学与卫生统计学硕士学位。2004年获河北医科大学分子流行病学博士学位。现任河北医科大学第四医院肿瘤研究所分析细胞室主任。目前为中国抗癌协会肿瘤流行病学专业委员会委员；中华预防医学会慢病分会肿瘤防控学组委员；国家慢性病综合防控示范区验收专家组委员；河北省卫生厅疾病预防控制专家委员会委员；WJGO杂志编委，《中华预防医学》、《肿瘤防治研究》、《中国肿瘤》等杂志审稿专家。

从事肿瘤防治研究工作22年，培养硕士研究生7名。先后主持国家自然基金课题一项、河北省自然基金一项，河北省科技厅课题三项以及河北省卫生厅课题三项。参与国家“九五”、“十五”、“十一、五”科技支撑项目。共发表学术论文120余篇，其中SCI收录8篇。参与编写论著5部。获河北省科学技术一等奖一项、二等奖一项，三等奖两项，河北省卫生厅一等奖五项。

来源：液体活检前沿