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三七总皂苷原粉和超微粉的理化性质比较研究_王崑仑
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植物研究2011,31(4):508~512

BulletinofBotanicalResearch

基金项目:林业公益性行业科研专项(2010040072)和国家林业局“948”项目(2010-4-20)

第一作者简介:王崑仑(1982—),男,硕士研究生,主要研究方向为生药学。

通讯作者:E-mail:zygorl@yahoo.com.cn

收稿日期:2011-02-18

三七总皂苷原粉和超微粉的理化性质比较研究

王崑仑赵修华祖元刚



李家磊李汶罡

(东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室,哈尔滨150040)

摘要通过对药用植物三七总皂苷原粉和超微粉的粉体粒度、电位、显微结构、红外光谱、溶解速度这几项理化

性质的研究,判定两种粉体的优劣,为三七总皂苷超微粉的市场推广提供依据。实验结果表明,三七总皂苷原粉经

纳米化处理后成为三七总皂苷超微粉,其化学结构没有发生变化,但显微结构从条状的晶体变为由纳米球紧密排

列的不规则形态,其粉体平均粒径也从1122.4nm缩小到153.4nm,完成了从微米到纳米的转变,其水溶液也变为

稳定的胶体溶液。运用高效液相色谱法,在模拟人体环境的条件下,发现三七总皂苷超微粉比三七总皂苷原粉早1

min完全溶解。说明三七总皂苷超微粉比三七总皂苷原粉颗粒更小,更易溶于水,更易与人体吸收。

关键词超微粉;三七总皂苷;理化性质;高效液相色谱

中图分类号:X53;Q948.12文献标识码:A文章编号:1673-5102(2011)04-0508-05

ComparisonofthePhysicochemicalPropertyofPanaxnotoginsengSaponins

OriginalPowderandSubmicronPowder

WANGKun-LunZHAOXiu-HuaZUYuan-Gang



LIJia-LeiLIWen-Gang

(KeyLaboratoryofForestPlantEcologyofNortheastForestryUniversity,MinistryofEducation,Harbin150040)

AbstractToassesstheadvantagesanddisadvantagesofPanaxnotoginsengSaponinsoriginalpowderandsub-

micronpowder,andprovidebasisforthemarketingofP.notoginsengsaponinssubmicronpowder,thephysico-

chemicalpropertiesoftwopowdersincludingparticlesize,electricpotential,microscopicstructure,infrared

spectrumanddissolutionvelocitywerestudiedTheexperimentalresultsindicatedthatP.notoginsengsaponinso-

riginalpowderturnedintosubmicronpowderafternanocrystallizationwithoutchemicalstructurechange.Itsmi-

croscopicstructurewaschangedfrombandedcrystaltoirregularlyshapednanospheresarrangedclosely,itspow-

deraverageparticlesizewasshrinkedfrom1122.4nmto153.4nm,finishingtheshiftfrommicrontonanome-

ter,itswatersolutionwaschangedfromtruesolutiontostablecolloidalsolution.UsingHPLC,underthecondi-

tionofsimulatedhumanenvironment,itwasfoundthatP.notoginsengsaponinssubmicronpowderdissolvedcom-

pletely1minearlierthanoriginalpowder.TheexperimentresultsshowedthatP.notoginsengsaponinssubmicron

powderissmallerthanoriginalpowderinparticlesize,moresolubleinwaterandmoreusableforhumanbody.

Keywordssubmicronpowder;Panaxnotoginsengsaponins;physicochemicalproperty;HPLC

三七(Panaxnotoginseng)又名田七,属五加科

(Araliaceae)人参属(Panax)多年生草本植物

[1]



是中外闻名的道地性药材,清朝《本草纲目拾遗》

中评价其为“中药中之最珍贵者。”

[2]

三七性温,味

苦回甜

[3]

,散瘀止血,消肿定痛

[4]

,用于呕血、咳

血、胸腹刺痛、崩漏、跌扑肿痛、外伤出血等症

[5]



三七有效成分提取物三七总皂苷,更拥有凝血

[6]



扩张血管、降低心肌耗氧量

[7]

,促进脑出血后脑内

神经元的存活及损伤修复

[8]

,抗血栓和抗凝血作



[9]

。其主要制剂有:血塞通注射液、血栓通注射

液、注射用血塞通、三七总皂苷胶囊等

[10]

。由于市

场上三七总皂苷原粉,水溶效果差,其注射剂多用

40%左右浓度的酒精溶解,使很多年岁大、易脑出

血、酒精过敏的患者望而却步,极大地局限了三七

总皂苷注射剂的推广。三七总皂苷超微粉,因自身

粉体颗粒为纳米级,粒径小,解决了三七总皂苷水溶

性差的问题,具有广阔的市场前景。本文主要比较

研究了三七总皂苷原粉和超微粉的理化性质,并运

用高效液相色谱法比较两者在人体环境下的溶解速

度。现2010版药典中主要检测三七有效成分人参

皂苷Rb

1

、人参皂苷Rg

1

、三七皂苷R

1

,因此主要比

较云南云科三七总皂苷原粉和超微粉中人参皂苷

Rb

1

、人参皂苷Rg

1

、三七皂苷R

1

在人体环境下的

溶解速度变化曲线,为市场应用提供基础数据。

1材料

1.1仪器

1525-2489型高效液相色谱仪(美国waters公

司);色谱柱DikmaC18(250mm×4.6mm,5μm);

美国BrookhavenZeta激光粒度仪,BS110型电子分

析天平(德国Sartorius公司);Quanta200型电子显

微镜(SEM,美国FEI公司);IRAffinity-1型傅立叶

红外光谱仪(日本岛津公司);HZQ-F160型恒温摇

动培养箱(哈尔滨市东联电子技术开发有限公司);

有机微孔滤膜(0.45μm,上海新亚净化器件厂)。

1.2试药

对照品(中国药品生物制品检定所):人参皂

苷Rg

1

(批号:110703-200424)、人参皂Rb

1

(批号:

110704-200420)和三七皂苷R

1

(批号:110745-

200415);色谱纯乙腈(美国Fisher公司);色谱纯

甲醇(美国Fisher公司);BOSTER牌PBS缓冲液

(pH7.2~7.6武汉博士德生物工程有限公司);三

七总皂苷原粉(云南云科);三七总皂苷超微粉(自

制);去离子水(自制)。

2方法

2.1粒径的比较

把三七总皂苷原粉和超微粉用丙酮配成适当

浓度的溶液,利用美国BrookhavenZeta激光粒度



[7]

比较三七总皂苷原粉溶液和三七总皂苷超微

粉的颗粒粒度,激光粒度仪测试结果重复性好,测

量精度高

[11]



2.2电位的比较

利用美国BrookhavenZeta激光粒度表面电位

分析仪分别测定三七总皂苷原粉和超微粉水溶液

的电位值,比较两者之间的差异。

2.3显微结构的比较

借用Quanta200型电子显微镜(SEM,美国FEI

公司)观察三七总皂苷原粉溶液和三七总皂苷超

微粉的显微结构

[12]



2.4红外光谱的比较

利用IRAffinity-1型傅立叶红外光谱仪分别比

较三七总皂苷原粉和超微粉的红外光谱,观察两者

红外光谱图间的异同,鉴定两种粉体性质的异同。

2.5高效液相色谱的条件

色谱柱DikmaC18(250mm×4.6mm,5μm);

以流动相A:乙腈;流动相B:水,按表1进行梯度

洗脱;流速每分钟为1.0mL检测波长为203nm。

理论板数按人参皂苷Rg

1

峰计算大于6000;人参

皂苷Rg

1

峰和三七皂苷R

1

峰的分离度大于2.0。

表1HPLC梯度洗脱

Table1GradientelutionprogrameforHPLC

时间

Time(min)

流动相A

MobilephaseA(%)

流动相B

MobilephaseB(%)

02080

204060

212080

262080

2.6标准曲线溶液的制备

分别精密称取在60℃减压干燥2小时的人参

皂苷Rb

1

、人参皂苷Rg

1

、三七皂苷R

1

对照品适量,

加90%甲醇制成每1mL含人参皂苷Rb

1

1.5mg、

人参皂苷Rg

1

1.5mg、三七皂苷R

1

0.4mg的混合溶

液,4℃贮藏备用。将混合溶液稀释2、4、6、8、10倍

制成标准曲线溶液

[13]



2.7用高效液相法比较粉体溶解速率趋势

分别称取三七总皂苷原粉和超微粉200mg,

倒入50mLPBS缓冲液,在模拟人体条件下,放入

37℃HZQ-F160型恒温摇动培养箱中,匀速摇动在

0.5、1、2、3、4和5min时取溶液1mL并及时补添

PBS缓冲液1mL,使溶液总体积保持不变,利用高

效液相色谱测量取出液的含量,绘制比较两种粉体

的溶解速率趋势。

3结果与分析

3.1粒径的比较分析

利用美国BrookhavenZeta激光粒度仪分别测

定三七总皂苷原粉和超微粉粒径,结果见图1,2。

由图1,2可知:三七总皂苷原粉的粒径分布在

1100.7~1161.3nm之间,平均粒径为1122.4nm;

三七总皂苷超微粉的粒径分布在152.5~154.5

9054期王崑仑等:三七总皂苷原粉和超微粉的理化性质比较研究

nm之间,平均粒径为153.4nm,无大于1000nm

的粒子。说明三七总皂苷超微粉体粒径达到纳米

级别,且粒径分布集中,而三七总皂苷原粉的粒径

主要集中在1.1μm左右。

3.2电位的比较分析

分别配制适当浓度的三七总皂苷原粉和超微

粉水溶液,利用美国BrookhavenZeta表面电位分

析仪比较两种粉体水溶液电位上的差别,结果如图

3,4。由图3,4可知:三七总皂苷原粉水溶液表面

带负电,电位为-5.11e±0.0mL,电位接近于0,

说明其水溶液不稳定。三七总皂苷超微粉水溶液

表面带负电,电位为-10.77±1.64mL,说明其水

溶液为稳定的胶体溶液

[15]



3.3显微结构图谱的比较分析

通过Quanta200型电子显微镜(SEM,美国FEI

公司)观察如图5,6所示,三七总皂苷原粉的显微

结构呈:规则的条状晶体形态。三七总皂苷超微粉

的显微结构呈:纳米球紧密排列的不规则形态。说

明三七总皂苷超微粉是纳米化地三七总皂苷原粉,

是以纳米球形态存在的

[14]



3.4红外光谱的比较分析

由IRAffinity-1型傅立叶红外光谱仪分别测得

三七总皂苷原粉和超微粉的红外光谱结果,如图7

所示:两种粉体的红外图谱完全一致,说明两者是

一种物质,只是粉体物理结构上不一致,化学结构

完全一致

[16]



015植物研究31卷

3.5标准曲线

利用1525-2489型高效液相色谱仪测定三七

总皂苷标准曲线溶液,得到各峰面积,以浓度(C,

mg·mL

-1

)为X轴,吸收峰面积(A)为Y轴,绘出

三七皂苷R

1

、人参皂苷Rg

1

和人参皂苷Rb

1

的线

性回归方程

[17]

分别为:

y=3312731.8594x+21836.9167(R

2

=

0.9994);y=3440871.7374x+102567.1667(R

2

=

0.9996);y=2624248.7648x+71953.8611(R

2

=

0.9995)。

3.6粉体溶解速率趋势比较及分析

根据1525-2489型高效液相色谱仪测定三七总

皂苷原粉和超微粉在PBS缓冲溶液中各主要有效

成分在不同时间段的浓度参数(表2)。绘制出三七

总皂苷原粉和超微粉在PBS缓冲溶液中溶解的浓

度曲线。经OriginLab8软件分析浓度曲线计算出

两种粉体各主要有效成分在不同时间段的浓度曲线

面积和倍数关系(表2)。由表2可知三七总皂苷超

微粉在3min时浓度曲线达到最高点,说明三七总

皂苷超微粉在37℃PBS缓冲溶液中3min时完全

溶解;而三七总皂苷原粉则在3~4min时达到最

高点,说明其在37℃PBS缓冲溶液中3~4min完

全溶解,前者比后者溶解速度快,更易被人体吸收。

4讨论

本实验从粉体粒度、电位、显微结构、红外光

谱、粉体溶解速率这几方面研究三七总皂苷原粉和

超微粉的理化性质,比较两种粉体的优劣。三七总

皂苷原粉和超微粉从粒度上比较,前者的平均粒径

为1122.4nm远大于后者的平均粒径153.4nm,两

1154期王崑仑等:三七总皂苷原粉和超微粉的理化性质比较研究

表2不同时间段粉体溶液浓度测定结果

Table2Resultsofpowdersolutionconcentrationsatdifferentperiods

名称

Name

浓度Concentration(mg·mL

-1

)

0.5min1min2min3min4min5min

浓度曲线面积

Concentration

curvearea

倍数

Multiple

三七总皂苷原粉R

1

P.notoginsengsaponinsoriginalpowderR

1

0.14430.17740.25120.27800.29490.20521.09590.78

三七总皂苷超微粉R

1

P.notoginsengsaponinssubmicropowderR

1

0.20320.26750.29490.36910.34980.29551.4129

三七总皂苷原粉Rg

1

P.notoginsengsaponinsoriginalpowderRg

1

0.73810.92331.22931.40131.47181.01183.03530.55

三七总皂苷超微粉Rg

1

P.notoginsengsaponinssubmicropowderRg

1

0.94201.22891.35231.68901.59411.49175.4852

三七总皂苷原粉Rb

1

P.notoginsengsaponinsoriginalpowderRb

1

0.81161.02941.34131.51851.32741.10995.71711.04

三七总皂苷超微粉Rb

1

P.notoginsengsaponinssubmicropowderRb

1

0.76711.02221.16711.44091.34091.22895.5218

三七总皂苷原粉总量

TotalofPanaxnotoginsengsaponinsoriginalpowder

1.69402.13012.82183.19783.09412.32699.97000.81

三七总皂苷超微粉总量

TotalofP.notoginsengsaponinssubmicropowder

1.91232.51862.81433.49903.28482.922312.2982

者不在同一个级别,后者更易溶于水。三七总皂苷

原粉水溶液的电位接近于0mV,说明其水溶液稳

定性差,而三七总皂苷超微粉水溶液的电位为

-10.77±1.64mV,说明其为稳定的胶体溶液三

七总皂苷超微粉的水溶性优于三七总皂苷原粉。

两种粉体的显微结构图也证明了这一点,三七总皂

苷原粉体的显微结构为长条型晶体,三七总皂苷超

微粉体的显微结构则为整齐排列的纳米球。两者

的红外光谱图也说明三七总皂苷原粉经纳米化处

理成为三七总皂苷超微粉后,其化学结构没有发生

变化,只是物理形态的变化。通过对三七总皂苷原

粉和超微粉在模拟人体环境情况下溶解速度的比

较研究,我们可以更加直观的发现,后者比前者溶

解速度快了1min。综上所述,三七总皂苷超微粉

体颗粒体积更小,更易溶于水,更易被人体吸收。

三七总皂苷超微粉不但解决了市面上三七总

皂苷原粉水溶性差的问题,使三七总皂苷制剂不用

添加酒精助溶,扩大了适用人群,还大大提高了三

七中皂苷的生物利用度,具有吸收快,血药浓度高、

药效持久等优点。因此三七总皂苷超微粉具有相

当好的市场前景,为三七总皂苷制剂在临床上的应

用开拓了新领域。

参考文献

1.王朝梁,陈中坚,孙玉琴.秋水仙碱诱导三七多倍体的初

步研究[J].中医中药杂志,2007,32(12):1222-1224.

2.苏雁涛.诌议三七[J].当代医学,2009,15(13):25.

3.国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北

京:化学工业出版社,2005.

4.冯陆冰,潘西芬,孙哲玲.三七的药理作用研究进展

[J].中医药师,2008,11(10):1185-1187.

5.张华.药材三七的真伪鉴别[J].现代医药卫生,2007,23

(19):2932-2933.

6.郑永昌.三七总皂苷对断指再植术后凝血功能的影响

[J].海峡药学杂志,2010,22(12):156.

7.孟琼,陈治宇.三七总皂苷提取分离及分析方法研究进

展[J].承德医学院学报,2010,27(2):198-201.

8.张剑峰,张丹参.三七总皂苷药理作用研究进展[J].中

医中药学志,2007,13(6):472-474.

9.张建平,司银楚,朱培纯.三七总皂苷促进脑出血后脑内

神经元的存活及损伤修复[J].中成药,2010,32(5):

844-846.

10.唐敏,唐晓玲,陈荣.三七总皂苷治疗心血管疾病临床研

究进展[J].中国中医信息杂志,2006,13(9):93-96.

11.李向召,谢康,黄志凡.激光粒度仪的发展与展望[J].

现代科学仪器,2009,4:146-148.

12.黄利坚,汪尔康.电子显微镜技术表征聚乙二醇包覆的

银纳米线的显微结构特征[J].研究快报,2010,38(2):

149-152.

13.国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北

京:化学工业出版社,2010.

14.李战军,纳米药物的制备方法[J].武汉工业学院学报,

2006,25(2):30-34.

15.祖元刚,苏鹭,赵修华,等.干姜挥发油纳米乳的制备与

表征[J].植物研究,2010,30(5):637-649.

16.刘雪松,程翼宇.用于中药药品质量快速检测的近红外

光谱模糊神经元分类方法[J].化学学报,2005,63

(24):2216-2220.

17.邓雯,夏荃,詹若挺,等.三七超微粉与细粉中三七皂苷

R

1

及人参皂苷Rg

1

、Rb

1

的含量比较研究[J].制药工

艺,2007,21(6):50-53.

215植物研究31卷

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