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1．称料按照培养料配方准确将所需原料分别称取，并对不同原料按照不同方法进行预处理。如使用稻草为原料，则先将稻草切成小段并且水中浸泡使其充分吸收水分后使用。 2．拌料对于难溶性物质，如麸皮、米糠、玉米粉、豆饼粉、石膏、碳酸钙、过磷酸钙等应在加水前和主料干拌均匀；对于易溶性化合物如蔗糖、红糖、尿素、硫酸镁、KH2PO4等应先化在水盆中溶化成为母液，然后按照比例随水拌入料内。拌料用水常采用河水、井水或自来水。培养料的含水量依原料种类和物理性状、菇类的生物学特性而定，其变动幅度一般在45%～65%之间，通常在55%～62%以内。因为制种时，菌丝体是在瓶内发育的，通气差，水分不易蒸发。如果培养料过湿，则菌丝向下延伸慢，菌丝少，且易衰老。一般来说，二级菌种的培养料含水量比三级菌种培养料含水量还要偏少些，可延缓菌种衰老。拌匀后将料堆积起来，一般闷30～60min，使培养料吃透水分。培养料内不能含有干料块，以免出现“夹心料”，“夹心料”在灭菌时容易造成“死角”，导致接种后杂菌污染。 3．调节酸碱度 多数食用菌适宜在偏酸的环境中生长，一般最适pH为5～6.5。配制培养料时，pH往住调高1.5左右，若不合适时，可用5%的过磷酸钙或5%石灰水调至合适。因为培养料配好后，在灭菌的过程中会使pH降低；此外，在菌丝的生长过程中，菌丝会产生一些酸性物质造成培养料pH下降，如乙酸、柠檬酸、草酸等。因此，培养料的pH应该适当调高。二级菌种和三级菌种的很多培养料中都添加石灰、石膏等成分，也能够有效地抑制pH的下降，保持其偏酸性环境。 4．分装培养料培养料拌好后要迅速分装入特定的二级菌种和三级菌种瓶（袋）内，以免料堆放置时间过长，造成酸败。装料前，必须把空瓶清洗干净，并倒出瓶内水分。装瓶时，一手持瓶一手填料，装料时，先装到瓶高的2／3处，再用手握瓶口并轻轻敲打瓶底使瓶内培养料下沉压实。通常，木屑、稻（麦）草粉松紧以能看见颗粒间稍有缝隙为度，棉籽壳、玉米芯颗粒等要用力压实，袋料高度以菌种瓶装到3／4处为宜，罐头瓶则装到瓶肩部。这样既利于发菌，也便于观察。装好培养料后，要求瓶内培养料上下松紧一致，并压平表面。之后，用一根直径1. 5cm左右的锥形木棒的尖端，在瓶内中央打一个圆洞，直达料深的4/5处，此洞可作为接种穴（图2-4-2）。这样既可增加瓶内氧气，又利于接种后菌种块的固定，促进菌丝向下蔓延。然后擦净瓶口和瓶外壁的培养料，进行封口。谷粒培养基只要将谷粒装至瓶肩，将瓶身稍震动几下即可，不再打洞，然后用干布将瓶口内壁揩抹干净，封口后及时灭菌。粪草培养基装瓶时，要求装入的培养基上紧下松，内松外紧，紧不可有层叠印迹，松不能见蜂窝眼。枝条培养基装瓶后，应在料面上撒一层木屑培养基，稍微震动几下，使木屑和枝条接触良好，然后再将料面压紧压平，这样有利于菌丝的封口和菌丝的茁壮生长。  图2-4-2 装好料的菌种瓶及捣木 如果使用塑料袋进行装料，要求在拌料之前，对木屑、蔗渣等纤维材料进行过筛，除去锐利刺状物及粗大颗粒，以防扎破塑料袋。装料要根据塑料袋的种类选择不同的装料方法。如果选用底部为方形的塑料袋（和平底食品袋类似，一头密封，一头开口），在装袋之前，先将袋底部两个角向内塞，这样装入培养料后利于培养料袋子的平稳，能直接放于培养架上，装袋时，要求培养料密实，松紧一致，培养料的高度约为袋高的3/5即可，然后用锥形捣木在中央打一接种穴。再用抹布擦去料袋外表面的残留培养料，准备封口。如果选用筒状的聚丙烯塑料袋，则塑料袋一端先用线绳扎口，从另一端把培养料装入袋内。装料时可以左手撑开袋口，右手添料，装入一半后，将料压实，使袋底呈一平面。装满后再将料压紧，松紧程度以手按料袋不下陷为宜。培养料要上下均匀、松紧一致。如果装料过松，则料袋容易变形，灭菌时料袋容易胀破，还易导致发菌稀疏；如果装料过紧，则容易造成通气不良、菌丝吃料慢。料袋封口前，用锥形木棒在料中央打洞，以促进深部菌丝的生长。 5．分装容器的封口 菌种瓶（袋）的封口方法很多，使用的材料有棉塞、牛皮纸、报纸、塑料颈圈、氧化锌胶布以及化纤棉等。生产中可以根据制种的具体情况选择适宜的封口方法，现介绍几种常用的方法。 (1)棉塞封口 由于棉塞具有良好的透气性和空气过滤性能，再加上使用简便，所以棉塞是目前很多菌种瓶（袋）常用的封口材料。棉塞要求干燥、松紧合适，透气性好。通常在菌种瓶（袋）上架前，可以往棉塞上撒一层生石灰粉，以达到防潮和抑菌作用。 (2)牛皮纸棉花一塑料膜封口法用罐头瓶制种时．由于罐头瓶口径较大，不容易采用棉塞封口。为了保持良好的通气性能，又要防止水分的散失，可以采用牛皮纸一棉花一塑料膜封口法（图2-4-3）。  图2-4-3 牛皮纸棉花一塑料膜封口 (3)塑料颈圈一棉塞法 用塑料袋作容器制种，通常要在袋口套塑料颈圈（或称塑料套环）。具体方法是取塑料颈圈套在袋口外，把塑料袋口向下翻，用袋端部翻过来包住颈圈，用橡皮筋扎紧，形状像玻璃瓶口一样，再塞好棉塞，进行包扎（图2-4-4）。也可以采用带塑料套盖的颈圈。带套盖的塑料颈圈与颈圈形状基本相似，并配有专用的盖子，使用时，只需将盖子直接在套环上压紧即可。  图2-4-4 短袋套颈圈装料法 (4)长袋打穴贴胶布法 对于较长的塑料菌袋可以采用此法封口。方法是将培养料装入菌袋中，用线绳将口扎牢。然后再打接种穴，接种穴用胶布密封即可（图2-4-5）。在缺少颈圈的情况下，采用这种两端扎口，袋侧部打孔并用胶布贴封的方法，可以保证袋内的通气。  图2-4-5 长袋打穴贴胶布装料法 1-装料；2-打接种穴；3-贴封胶布 (5)塑料袋折叠封口法 塑料袋装料后，将袋口折叠呈封闭状，用大头针扎在袋口上，进行封口，此方法简单易行，折叠的袋口不影响通气，菌丝生长不会受到抑制。 (6)氧化锌胶布一塑料薄膜封口法 用瓶口较大的罐头瓶制种时，可以采用此法封口，优点是简便可靠。方法是瓶口先用塑料薄膜封口，并在塑料薄膜中央用打孔器打接种孔。接种孔用氧化锌胶布密封。灭菌后，打开胶布接种。 此外，对于塑料袋装料的，在缺少塑料颈圈的情况下，可以用线绳直接扎紧封口。但此法透气性能较差。也有人采用袋口加放废旧海绵后扎口的方法，以保证通气，此方法既能通气，又能防止杂菌感染，而且简单实用，成本低，效果很好。
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