第十四章 DNA的生物合成 半保留复制 在DNA复制时,以亲代DNA的每一股做模板,dNTP为原料,碱基配对为原则,合成完全相同的两个双链子代DNA,每个子代DNA中都含有一股亲代DNA链,这种现象称为DNA的半保留复制 半不连续复制 前导链合成连续而后随链合成不连续 原料 ①模板:单链DNA ②底物:脱氧三磷酸核苷(dNTP) ③原则:碱基互补配对 ④合成方向:5’→ 3’ ⑤引物:一段具有3’端自由羟基的RNA【原因:DDDP不能催化单核苷酸之间3’—5’磷酸二酯键,而DDRP可以催化单核苷酸之间生成3’,5’—磷酸二酯键 ⑥冈崎片段:由于亲代DNA双链在复制时是逐步解开的,因此,随从链的合成也是一段一段的。DNA在复制时,由随从连合成所产生的一系列不连续的DNA片段称为冈崎片段。 DNA复制的酶 A识别、B解旋、C辅助、G引物 DNA拓扑异构酶 防止扭曲打结,既能水解DNA分子中的磷酸二酯键又能将其重新连接 单链DNA结合蛋白(SSB): 使解开双螺旋后的DNA单链能够稳定存在,即稳定单链DNA,发挥模板作用;保护单链DNA,避免DNA酶的降解 引物酶 依赖DNA的RNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA-polⅠ:切除引物,填补缺口,修复损伤,校正错误 DNA-polⅢ:复制DNA,校正错误 DNA-polⅢ是真正的DNA复制酶 5’→3’外切酶活性:切除引物 3’→5’外切酶活性:校正错误,修复损伤 复制的保真性 ①遵守严格的碱基配对规律; ②DNA聚合酶在复制延长中对碱基的正确选择; ③复制过程中及时校读和修复的功能 DNA连接酶 催化两段DNA片段形成磷酸二酯键 DNA的复制过程: 起始 A识别、B解旋、C辅助,G合成引物 延长 DNA聚合酶Ⅲ 终止 切除引物,补平缺口,连接酶链接片段 |
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