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软枣猕猴桃组织培
2018-01-15 | 阅:  转:  |  分享 
  
摘要利用组织培养技术,对比多种培养基中软枣猕猴桃的生长,选出最适合软枣猕猴桃生长的培养基为培养基④1/2ms+iba0.5mg/l+糖
20g/l,以期对软枣猕猴桃的快速繁殖提供一定的帮助。关键词软枣猕猴桃;组织培养;快速繁殖中图分类号
s663.4文献标识码a文章编号1007-5739(2016)09-0073-0为了对软枣猕猴桃种苗快速繁育技术进
行研究,特开展了此研究。1材料与方法1.1基本培养基的配制1.1.1基本培养基母液的配制。在组织
培养中,基本培养基的母液有4种:大量元素、微量元素、铁盐以及除蔗糖外的有机物。大量元素母液成分:nh4no31650mg/l
、kno31900mg/l、kh2po4170mg/l、mgso4?7h2o370mg/l。微量元素母液成分:mns
o4?4h2o22.3mg/l、znso4?7h2o8.69mg/l、h3bo36.2mg/l、ki0.83mg/
l、na2moo4?2h2o0.25mg/l、cocl2?6h2o0.025mg/l、cuso4?5h2o0.025m
g/l。铁盐母液成分:feso4?7h2o27.8mg/l、na2-edta37.3mg/l。有机物母液成分:肌
醇100mg/l;烟酸(v)0.5mg/l;盐酸硫胺素(v)0.1mg/l;盐酸吡哆醇(v)0.5mg/l;甘氨酸2.0
mg/l。1.1.2生长调节物质母液的配制。基本培养基确定后,母液配制完成,按照选定的试验配方制作培养基。细胞分裂素的
选定:将生长素选定为iba0.2mg/l,糖30g/l,做以下培养基备用:①ms+ba1.5mg/l+iba0.2m
g/l;②ms+ba1.0mg/l+iba0.2mg/l;③ms+ba0.8mg/l+iba0.2mg/l;④ms
+zt1.0mg/l+iba0.2mg/l;⑤ms+zt0.8mg/l+iba0.2mg/l;⑥ms+zt0.5
mg/l+iba0.2mg/l;⑦ms+kt1.5mg/l+iba0.2mg/l;⑧ms+kt1.0mg/l+i
ba0.2mg/l;⑨ms+kt0.8mg/l+iba0.2mg/l。1.2接种接种材料先经过表面
消毒后灭菌处理后经无菌操作程序转接到培养基上的过程就叫接种;最初接种的材料就叫做外植体[1-3]。消毒的具体方法如下:一是刷洗冲洗
材料(外植体)。将采来的外植体去除不用的部分,把需要的部分用适当的软毛刷在流水下冲洗干净,必要时可以用少量的洗衣粉。二是外植体的表
面消毒灭菌。这一步骤要在超净工作台上进行(超净工作台在使用时要提前开机10min),准备灭菌溶液,无菌水。把处理好的外植体放入烧
杯中,倒入事先准备好的消毒液,轻轻晃动,不使液体外溅,按照规定的时间倒出消毒液,加入无菌水清洗,清洗3次即可,消毒好的外植体准备接
种[4-6]。三是按要求将消毒好的外植体分别接种在准备好的培养基里,每个培养基接种200瓶,共16800瓶。每瓶接种2点,分别将
其编号,然后放在培养室内观察其变化。其他附属条件(如温度、光照、ph值等)均一致。10d后去除污染,15d后开始观察记录。观察
结果:经过观察发现,软枣猕猴桃在含有分裂素zt的培养基中表现明显好于其他2种分裂素,kt表现最差,长势最好的培养基为⑥ms+zt
0.5mg/l+iba0.2mg/l,能够分化较多较正常的芽,没有玻璃化现象,没有褐变,因此软枣猕猴桃组织培养的最适培养基为
ms+zt0.5mg/l+iba0.2mg/l糖30g/l。2结果与分析2.1继代培养基的选定
将诱导好的芽转接在诱导培养基中,出现了玻璃化现象且芽节间未伸长,因此在继代过程中应将分裂素浓度降低,在培养基中添加了赤霉素(
ga3)根据这些性状做以下继代培养基试验:①ms+zt0.3mg/l+iba0.2mg/l+ga30.2mg/l;②m
s+zt0.2mg/l+iba0.2mg/l+ga30.2mg/l;③ms+zt0.1mg/l+iba0.2m
g/l+ga30.2mg/l+糖30g/l。经过观察表明:在试验②培养基中长势好,能分化较多较壮的苗,而且节间伸长
明显因此,软枣猕猴桃组织培养的最适继代(扩繁)培养基为ms+zt0.2mg/l+iba0.2mg/l+ga30.2mg
/l+糖30g/l。2.2生根培养基的选定组培苗在生根前要提高生长素浓度,让瓶苗变得粗壮,确保生根苗的质量,
同时要降低无机盐浓度,促进生根。根据观察苗的长势情况,做生根培养基试验分别为①1/2ms+zt0.01mg/l+iba0.2
mg/l+糖20g/l;②1/2ms+iba0.2mg/l;③1/2ms+iba0.3mg/l;④1/2ms+iba
0.5mg/l。3结论通过观察发现,在培养基④1/2ms+iba0.5mg/l+糖20g/l中能够分化
出2~4条正常的根系,生根率100%,能够达到移栽标准,因此最适软枣猕猴桃组培苗生根的培养基是1/2ms+iba0.5mg/l+糖20g/l。组培苗生好根后,就可以驯化移栽,从而得到优质的种苗
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(本文系曲凤仙首藏)