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公猪站实验室里的所有步骤都必须融入正确的工作流程，准确的精液评估、原精稀释液使用优质蒸馏水以及高卫生条件下生产精液头份。所有这些都需要做到最佳以确保高效的实验室管理和良好的精液品质。 实验室工作流 实验室工作流是影响实验室技术人员效率的因素之一。从“脏区”工作到“净区”也很重要。将实验室工作流设置为单向流动，避免交叉污染同样也非常重要（图1）。 原精采集后应在15min内对精液进行正确地评估和稀释。 如果不能在15min内处理原精，可选择其他方法：用相同温度的稀释液（1：1~1：3 原精——稀释液比例最常见）快速预稀释原精，并尽快在相同温度下进行最终稀释。 精液评估 检测精液浓度是精液评估过程中的重要步骤之一。原精浓度的正常值在每毫升2亿~6亿个精子细胞。如果每毫升精子细胞浓度低于1亿，应该弃用该原精。 为了评估精液浓度，可以使用市面上许多可靠设备供应商的光度计。 显微镜评估是一个简单而重要的步骤。使用显微镜的目的是弃用不达标的原精。 表1列出了需要评估的要素。 精液活力评估 精子活力的评估是对原精全面质量控制的重要一步。最后，精液头份到期日的最小活力应该为70％。原精的初始活力可以基于这样的假设来计算，即在收集后每天会有2%~3％的活力损失。大多数公猪站要求原精活力至少大于80％，意味着任何含有少于80％活力的原精都将被丢用。 活力评估是在相差显微镜和加热（38°C /100°F）板上进行的。评估可以通过人工估算完成，也可以通过CASA系统自动完成（表2）。 精子形态学评估 可以通过使用具有自动形态学检测的CASA系统或通过手动显微镜方法评估精子形态学。一般而言，可以计数的细胞越多；结果越接近实际值。应该计数和评估至少100个细胞（优选2×100个细胞），以估计精液中异常精子细胞的百分比（表3）。 在普通公猪站实验室程序中，不需要区分图2中提到的所有异常情况。有一些异常细胞可以作为常规记录：头部缺陷（包括顶体）、原生质滴（远端原生质滴和近端原生质滴）和尾部缺陷（表4）。 精液稀释液水质 为避免生产污染风险，需要表5中的水质要求。 实验室用水应每年至少进行4次水质检测。 为水系统设置适当的卫生程序。 卫生程序后更换过滤器/去离子树脂。 为避免污染水样，请咨询为公猪站实验室检测水质的外部实验室，以获取如何 正确采集样本的说明。 生产区域的卫生条件 在实验室保持高度的卫生非常重要，因为细菌对精子细胞有负面影响，如损害顶体，活力受损，凝集/结块，因此造成精子细胞授精的可能性变小。 所有清洁和消毒程序都遵循一系列简单而重要的步骤： 1） 去除有机物质。 2） 使用清洁剂清洁（浸泡）。洗涤剂必须有效去除有机物，漂洗后不得留下残留物，且必须无毒。安全的选择是使用实验室器皿清洁剂，饲料工业的清洁剂，甚至手动洗碗的液体洗涤剂。常见的是Decon90®。 3） 用刷子、海绵或布擦洗表面以分离有机物质并溶解生物膜。 4） 用物镜冲洗以稀释并去除清洁剂，油脂和蛋白质。 5） 用一次性纸巾擦干。 6） 消毒杀菌，杀死残留的微生物。 7） 每次使用后清洁/消毒或更换清洁材料（刷子/海绵/布）。 8） 从净区工作到脏区。 9） 从顶部工作到底部。
清洁和消毒精液头份生产过程中每天使用的所有设备，这包括CASA系统、计算机、键盘、移液器、显微镜、电话机、移液枪等，在每个生产日之后，还可以消毒工作台上部35厘米/ 14英寸高的墙壁。 正确清洁是上述程序中最重要的部分。在没有正确清洁的情况下消毒表面不会杀死微生物，因为有机物质会保护它们免受消毒剂的侵害。 总 结 良好的公猪站实验室管理的目的是生产高品质的精液头份。通过建立正确的工作流程，避免生产区域受到污染；通过良好的培训和准备，精确地评估精液。此外，高品质的实验室水质以及始终保持实验室尽可能干净，都是确保良好实验室管理的核心要素。 （作者：文/Laura KimLong，翻译/赖辛 PIC 中国； |
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