猪伪狂犬病 (Porine pseudorabies PR) 一、发生与危害 二、流行现状 三、主要临床症状 四、主要病理变化 五、病原学与流行病学 六、诊断方法及应用 七、防治 一、发生与危害(1)
一、发生与危害(2)
二、流行现状
三、主要临床症状
猪伪狂犬病临床症状(1) 伪狂犬病临床症状(2) 伪狂犬病临床症状(3) 猪伪狂犬病临床症状(4) 猪伪狂犬病临床症状(5) 四、主要病理变化
猪伪狂犬病病理变化(1) 猪伪狂犬病病理变化(2) 猪伪狂犬病病理变化(3) 猪伪狂犬病病理变化(4) 伪狂犬病病理变化(5) 五、病原学与流行病学 伪狂犬病毒属于疱疹病毒科,目前已完成全基因组测序,多种与毒力和免疫原性相关的基因均已被定位,如TK、gG、gE、gB、gC、gD、gI等,其中TK为该病毒主要的毒力基因。
应用PCR技术作猪伪狂犬病病原学调查 狂犬病毒潜伏感染的特性,是造成该病难以诊断和根除的原因 潜伏感染:病毒感染,动物耐过后,病毒生存于动物的神经组织(三叉神经)中,不能检测到病毒粒子,只检测出核酸。当机体抵抗力下降,病毒产生并活跃,到生殖系统或其它系统,产生临床可见的症状。 当猪处于潜伏感染状态 六、诊断方法及应用 病原学诊断
血清学诊断
七、防治 主动免疫
被动免疫
其它防制措施
伪狂犬病的免疫保护机制(1) 中和抗体:Idexx gB-ELISA抗体效价之间的关系 母源抗体在血清中的半衰期为21天 中和抗体(高免血清)的治疗作用 中和抗体的作用 阻止临床症状的出现,减轻临床严重程度,降低猪群死亡率 不能阻止新病毒在感染部位的增殖,但阻止扩散 不能消灭体内潜伏感染的病毒 伪狂犬病的免疫保护机制(2) 细胞免疫:记忆性辅助性T细胞产生白细胞介素2(IL-2)和α-干扰素,后者限制病毒的增殖。IL-2和α-干扰素共同激活自然杀伤细胞成为淋巴细胞激活的杀伤细胞(LAK),LAK细胞在感染性病毒粒子产生之前杀死病毒感染细胞,阻止病毒排出。 猪伪狂犬病疫苗的发展
伪狂犬病疫苗种类和特点 § PrV Ea 株全病毒灭活疫苗: 1995-2000年,在基因缺失疫苗没有商业化之前使用,安全。 § 基因缺失灭活疫苗: 不排毒,在根除计划最后阶段时使用。
§ 灭活疫苗肌肉注射,能刺激产生IgM, IgG1,IgG2,但不能产生IgA. Bartha株 1、为牛源毒株,对猪的免疫原性相对较差 2、未缺失TK,对猪仍有残余的毒性 这也是目前一些猪场母猪免疫后,大量的繁殖障碍没有发生,但是仍有弱仔比例偏高的原因。 HB-98的特点 1、毒株来源于猪:其它毒株来源于牛羊,针对性强 2、安全性高:因为缺失了主要的毒力基因TK基因; 3、对以腹泻为主要表现的伪狂犬病:启动局部免疫,阻断野毒的感染 4、诱导猪产生干扰素,具有非特异性免疫增强作用 5、能用gE-ELISA或gG-ELISA鉴别诊断方法 HB-98可用于紧急预防接种的机理 缺失了gG基因:伪狂犬病毒编码的gG蛋白是一种趋化因子结合蛋白,由于gG与机体本身的趋化因子结合,使趋化因子不能发挥功能,导致机体不易或难以识别侵入的病毒。将gG缺失后消除了与机体本身的趋化因子结合的可能,游离的趋化因子能迅速识别病毒,不仅提高了疫苗的免疫原性,而且很快产生抗体,从而达到治疗效果。 PRV突变株激活天然免疫反应的差异 对多株PRV基因缺失毒株进行了初步检测,发现不同毒株诱导α干扰素、β干扰素等天然免疫因子的能力存在较大差别,gG的缺失能显著增强天然免疫应答,gG、gE双缺失突变株(HB-98)诱导天然免疫的能力最强。 伪狂犬病活疫苗对妊娠母猪的安全性试验 不同品牌的伪狂犬病活疫苗免疫效果的比较 § 2006年12月北京兽医总站在北京地区的几个大猪场进行了相关实验,试验方案及结果如下: 实验方案 § 3个猪场各选择120头60-70日龄猪,分为4个组,免疫前检测猪群的伪狂犬病以及其它疾病抗体; § 分别用4个公司疫苗,按照说明书使用; § 免疫后20天采血,分离血清; § 用国外某公司的伪狂犬病抗体水平检测试剂盒、鉴别疫苗免疫动物和野毒感染试剂盒进行检测; § 根据免疫动物抗体阳转率和抗体水平,评价疫苗的免疫效果。 昌平猪场免疫后伪狂犬病抗体水平(PrV gB-ELISA)随机抽检样本检测结果 在gB-ELISA中,OD值>0.60为伪狂犬病抗体阴性;如低于0.60,表明为抗体阳性。OD值越低,表明抗体水平越高。如表中所示,效果高低依次为科前公司、进口疫苗2 、国产疫苗1和进口疫苗1。 如何正确使用疫苗? § 注射 还是 滴鼻?? 注射接种会被母源抗体中和,降低效价; 不提倡在哺乳阶段(21日龄以内)注射;45日龄左右注射 正确:滴鼻免疫不受母源抗体的干扰 § 误区:不同基因缺失疫苗在同一猪场使用,会发生病毒重组。 只有两种病毒大剂量进入同一细胞时才发生; 仅发生在实验室研究 野外条件下不可能发生:不可能同时给一头猪同时打两种疫苗 根除计划的技术基础 1、基因缺失疫苗(gE或gG基因缺失) 2、鉴别诊断方法 血清学鉴别诊断:gE(gG)-ELISA(科前公司,Idexx),gE(gG)-乳胶凝集试验(科前公司) 病原学鉴别诊断:鉴别诊断 gE-PCR 根除计划的采样要求 § 血清样品 每半年进行一次血清学检测,抽样比例5~8% 建议全群检测:gE阳性猪比例下降到20%,将血清学gE阳性猪与阴性猪分开饲 后备猪建立时:全部检测 § 流产胎儿样本 鉴别gE-PCR 一些国家的根除计划方案 § 美国 分为5个阶段,即以血清学调查为主的准备阶段、控制、扑杀阶段、监测、消灭等阶段(Thawley D G and Morrison R, 1989)。 具体方案 1.1 检测与淘汰 A.不免疫,只检测并淘汰阳性猪。 只适用于种猪的PRV阳性率低于20%。 B、免疫后,检测和淘汰 1.2 隔离后代 1.3 全部淘汰,重新引种 推荐用于在高感染率的地区,并易于取得成功。 § A.血清学阳性率很高(种猪中高达80%以上) § B.传统弱毒疫苗作用不理想。 § C. 有多种疾病困扰。 § D. 猪群隔离比较困难。 根除计划的经济学分析 § 免疫控制,还是检疫净化 主要是根据野毒感染阳性率来确定 (1)当野毒阳性率低于20%或大于50%时,野毒感染阳性猪全部淘汰; 当高于20%-50%,采取免疫预防,保持猪群稳定;然后再建立阴性后备猪群。 (2)野毒低于5%,一次净化;5%-15%:接种疫苗,分步净化。1年内完成净化。 § 免疫接种的成本效益高于检疫净化 但:检疫净化的净现值高于免疫接种成本。 作者:徐高原 博士 |
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