分享

去伪存真——痢疾的病原学诊断偶遇

 板桥胡同37号 2018-07-15
 

痢疾的病原学诊断在基层医院主要靠传统的粪便的分离培养、生化反应鉴定和血清学鉴定,也有免疫学法和快速PCR检测。我进行血清学鉴定时偶遇两种不同的结果:福氏志贺氏菌1a型和福氏志贺氏菌2a型,通过加热法去伪存真,最终鉴定为福氏志贺氏菌2a型,主要是福氏志贺氏菌2a型有K抗原,从而干扰正常的鉴定。

案例经过


1


患者,男,84岁,腹痛、腹泻2天于2018年5月22日入院,每天解稀水样便10余次,粪便中见黏液、脓血,便后脐周疼痛明显,伴恶心、心悸、出汗、纳差。查体:T:39.1℃,P:120次/分,R:20次/分。辅助检查:5月22日,WBC:4.79×109/L,NEUT%:81.2%,PCT1.93ng/mL,5月23日WBC:7.05×109/L,NEUT%:84.2%,PCT1.73ng/mL,CRP:108.49mg/L,粪便常规:褐色,稀,RBC1+,WBC3+,隐血试验阳性。5月23日送粪便细菌培养。

2


5月23日微生物室接到患者细菌培养标本,按照细菌室的SOP文件规范操作。挑粘液、脓血的大便接种血平板、麦康凯平板、SS平板等肠道杆菌选择性培养基,37℃孵育18—24小时,5月24日挑取无色半透明的可疑菌落,做革兰氏染色、氧化酶试验、动力试验,接种克氏双糖斜面鉴定,同时做药敏定量试验。

3


5月25日生化反应为:分解葡萄糖,产酸不产气。VP试验阴性,不分解尿素,硫化氢阴性,氧化酶阴性,不能利用枸橼酸盐作为碳源,动力试验阴性。提示为志贺氏菌,随后用志贺氏菌属诊断血清(国(食)药监械(准)字2013第3401529号,批号:20170101,效期2019.01.19)做玻片凝集实验确定菌群和菌型。志贺氏菌属四种多价血清强凝集,福氏志贺氏菌多价血清强凝集,福氏志贺氏菌群血清3.4强凝集,福氏志贺氏菌群血清6无凝集,福氏志贺氏菌群血清7凝集,福氏志贺氏菌血清Ⅰ型和Ⅱ型均强凝集(重复做了3次,结果都是强凝集。用生理盐水做阴性对照试验:结果均不凝集,用标准菌株做阳性对照试验显示强凝集),福氏志贺氏菌血清Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ型均不凝集。用小试管做2麦氏单位菌悬液8管,用福氏志贺氏菌Ⅰ型和Ⅱ型诊断血清做玻片凝集实验均凝集(重复做了3次,结果都是凝集,用生理盐水做阴性对照试验:结果均不凝集)。在酒精灯上分别加热5分钟、10分钟、15分钟、20分钟、25分钟、30分钟、60分钟,同时按照标准的方法:用烧杯装水加热煮沸,将第8管细菌悬液放入烧杯中继续加热煮沸100℃1小时[1]。然后对上述已经加热处理过的8管细菌悬液重新进行玻片法凝集实验。上述8个试管的试验结果均是福氏志贺氏菌群7无凝集、福氏志贺氏菌Ⅰ型无凝集而Ⅱ型强凝集。最终鉴定结果为福氏志贺氏菌2a型。

4

临床治疗本例患者药物敏感试验结果:复方新诺明、头孢曲松、头孢他啶敏感,左氧氟沙星中介,氨苄西林、环丙沙星、氯霉素为耐药。临床医生根据药物敏感试验选用复方新诺明治疗,患者痊愈出院。

案例分析
1


典型的痢疾临床表现主要有发热、腹痛、腹泻、里急后重、黏液脓血便,同时伴有全身毒血症症状,严重者可引发感染性休克和(或)中毒性脑病。菌痢常年散发,以夏秋季多见,是我国的常见病、多发病。儿童和青壮年是高发人群。而本例患者主要是高龄老人,无典型的里急后重症状,故粪便细菌分离培养鉴定是诊断感染性腹泻的好方法。

2

B群福氏志贺氏菌是四群中抗原结构最复杂的、鉴定相对较困难,检出率占志贺氏菌属总数的95.52%,B群中以2、3型最多,占64.84%[2]。其中福氏志贺氏菌2a型和6型有K抗原,会影响血清学鉴定。志贺氏菌有K和O抗原而无H抗原。K抗原是自患者新分离的某些菌株的菌体表面抗原,不耐热,加热100℃1小时被破坏。K抗原在血清学分型上无意义,但可阻止O抗原与相应抗血清的凝集反应。而本例标本的K抗原主要是引起假阳性凝集,应当引起足够的重视,从而避免错误的鉴定结果。

3

近年来,由于抗生素的滥用,导致细菌耐药率升高,治疗越来越困难。临床治疗必须根据常规药敏试验结果选择疗效好、经济实惠的抗生素进行治疗。

总结

志贺氏菌属是一类革兰氏阴性短小杆菌,是细菌性痢疾最为常见的病原菌。细菌性痢疾是一种常见的肠道传染病,属于国家法定乙类传染病,主要包括:(1)A群痢疾志贺氏菌,(2)B群福氏志贺氏菌,(3)C群鲍氏志贺氏菌通称鲍氏痢疾杆菌,(4)D群宋内氏志贺氏菌。病原学诊断主要靠生化反应和血清学鉴定。而血清学鉴定一定要做阴性阳性质控对照试验,以确保检验结果的准确可靠。


参考文献:

[1].朱忠勇,实用医学检验学,人民军医出版社:620-622.

[2].高旭峰,王玉福,阮志刚.惠民县1200例感染性腹泻病原学分析[J]. 职业与健康杂志,2011,17(12).


 

    本站是提供个人知识管理的网络存储空间,所有内容均由用户发布,不代表本站观点。请注意甄别内容中的联系方式、诱导购买等信息,谨防诈骗。如发现有害或侵权内容,请点击一键举报。
    转藏 分享 献花(0

    0条评论

    发表

    请遵守用户 评论公约

    类似文章 更多