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2018年8月9日，国家药品监督管理局经审查，批准了北京纳捷诊断试剂有限公生产的丙型肝炎病毒核酸测定试剂盒（PCR-荧光探针法）的注册，器审中心发布了该产品的审评报告，以下是相关内容： 进入创新通道的产品日益增多，诺沃兰官网为大家设计了可检索的创新产品库，可以直接搜索您公司的同类品，或竞争对手产品进入创新公示的情况，助您走好创新之路，点击屏幕左下方“阅读原文”即可迅速跳转，或打开电脑浏览www.normalline.com~ 目录 一、基本信息(申请人名称、申请人住所、生产地址) 二、产品审评摘要(产品概述、临床前研究摘要、临床评价摘要、风险分析及说明书提示) 三、综合评价意见 基本信息 申请人名称 北京纳捷诊断试剂有限公司
申请人住所 北京市北京经济技术开发区科创六街88号院8号楼4单元201室
生产地址 北京市北京经济技术开发区科创六街88号院8号楼4单元201室
产品审评摘要 一、产品概述 （一）产品主要组成成分 本试剂盒含有核酸提取试剂、PCR扩增试剂、校准品、质控品和内标，主要组成成分见表1。 表1试剂盒主要组成成分 （二）产品预期用途 本试剂盒用于体外定量测定血清样本中的丙型肝炎病毒（HCV）核酸（RNA），适用于需要进行HCV感染检测的患者和接受抗病毒治疗的丙型肝炎患者。
本试剂盒可以检测HCV1～6型临床常见型别，主要通过对丙型肝炎患者血液中HCVRNA含量及变化情况的监测，用于评估抗病毒治疗的应答和治疗效果。该检测不得作为患者病情评价的唯一指标，必须结合临床表现和其他实验室检测指标对患者病情进行综合评价。本试剂盒不得用于HCV的血源筛查。
（三）产品包装规格 48人份/盒。
（四）产品检验原理 本试剂盒在PCR扩增管内用含磁珠的裂解液提取血清样本中HCVRNA，并在同一管中进行扩增，HCVRNA在逆转录酶作用下反转录成HCVcDNA，然后在DNA聚合酶的作用下，应用TaqMan探针技术扩增HCVcDNA并进行实时荧光定量检测。
本试剂盒校准品和质控品为含有丙型肝炎病毒的临床血清样本（已灭活）。
本试剂盒通过检测内标来监测样本中是否有PCR抑制物，避免假阴性。
二、临床前研究摘要 （一）主要原材料 1.本产品的主要原材料包括：引物、探针、UNG酶、dNTPs等，这些原材料为外购方式获得。M-MLV逆转录酶、TaqDNA聚合酶、构象磁珠和RT-PCR缓冲液为自制。
引物、探针均为申请人自行设计后由专业的合成公司合成，并经PAGE或HPLC纯化获得；UNG酶由原料提供商克隆表达纯化后获得；dNTPs由原料提供商直接化学合成获得。M-MLV逆转录酶、TaqDNA聚合酶由申请人克隆表达纯化后获得，构象磁珠由申请人自行制备。RT-PCR缓冲液由申请人自行配制。
2.申请人从有资质的供应商中，通过功能性试验，筛选出最佳原材料和供应商。制定了各主要原材料质量要求并经检验合格。对自制原材料，申请人均制定了质量标准并检验合格。
3.企业参考品设置情况申请人设计了完整的企业参考品，包括阳性参考品、阴性参考品、准确度参考品、检测限参考品和精密度参考品，参考品均采用临床样本制备而成。阳性参考品来源于10份不同的HCVRNA阳性血清样本，涵盖不同型别和干扰物质。阴性参考品来源于10份不同的HCVRNA阴性血清样本，涵盖健康人群、乙肝病毒感染、HIV核酸阳性、HCMV/EBV及其他近似病原体感染等样本。准确度参考品采用HCVRNA阳性血清样本进行梯度稀释而成，分别为L0(1.0×106IU/mL)、L1(1.0×105IU/mL)、L2(1.0×104IU/mL)、L3(1.0×103IU/mL)和L4(1.0×102IU/mL)。检测限参考品采用HCVRNA阳性血清样本进行稀释而成，浓度为50IU/mL。精密度参考品采用HCVRNA阳性血清样本进行稀释而成，含有高、低两个浓度水平。所用临床样本均采用已上市同类试剂盒进行确认。各项企业参考品用于产品特异性、准确性、灵敏度和重复性评价。
（二）生产工艺及反应体系研究 申请人通过使用初步确定的配方进行反应体系配制，以企业参考品/质控品，对反应体系中的HCV引物/探针浓度、内标引物/探针浓度、酶混合液用量、镁离子浓度、dNTPs浓度、RT-PCR缓冲液、逆转录时间/温度、退火时间/温度、预变性时间/温度、变性时间/温度、样本用量、PCR适用机型 (SLAN-96P、MX3000P/3005P和ABI7500实时荧光PCR仪)、核酸裂解时间、裂解液用量、磁珠用量、磁珠吸附时间、漂洗液浓度及漂洗次数、负压泵流量的选择、磁力架磁性材料的选择及效期等分别进行了筛选或优化，最终确定了最佳的生产工艺和反应体系。
（三）分析性能评估 该产品分析性能包括核酸提取性能、最低检出限与定量限、线性范围、准确度、精密度、特异性（交叉反应、干扰物质）等。申请人提交了三批产品在不同适用机型上的性能评估资料。
在核酸提取性能评估中，申请人对高、中、低不同浓度血清样本用磁珠法提取和纯核酸掺入法进行比对，结果满足性能要求。重复检测HCVRNA高、低浓度血清样本各20次，检测浓度对数值变异系数≤5%，满足重复性的要求。用高黄疸、高脂血、溶血、干扰素的HCV阴性临床血清稀释HCVRNA强阳性血清制备高、中、低浓度样本，与无干扰血清样本进行对比，结果表明以上干扰物质对核酸提取性能无影响。
在最低检出限与定量限的性能评估中，申请人对HCV阳性血清样本进行梯度稀释，对系列浓度样本分别进行20次重复检测，以≥95%阳性检出率的最低稀释浓度作为最低检出限，检出率为100%且浓度对数值与理论对数值差值≤±0.5的最低稀释浓度作为定量限。最终确定该产品最低检出限为15IU/mL，定量限为50IU/mL。采用三批次试剂对HCV不同型别进行重复检测验证，试剂盒性能可满足最低检出限15IU/mL，定量限50IU/mL的要求。
在线性范围的性能评估中，申请人采用HCV不同型别的临床血清样本，制备10个浓度梯度样本进行线性范围研究，50IU/mL～1.0×108IU/mL范围浓度呈线性相关，线性相关系数＞0.980，符合线性范围的性能要求。
在准确度的性能评估中，申请人采用HCV阴性样本对国家参考品进行系列稀释，分别制备1.0×106IU/mL、1.0×105IU/mL、1.0×104IU/mL、1.0×103IU/mL和1.0×102IU/mL五个梯度样本，进行准确度研究，结果表明线性相关系数＞0.980，符合准确度的性能要求。
在精密度的性能评估中，申请人对精密度样本进行20次重复检测，分别对批内、批间、人员间、仪器间、实验室间及日间检测结果进行分析，结果表明精密度样本的变异系数均＜5%，符合精密度的性能要求。
交叉反应的性能评估中，申请人对人巨细胞病毒、E-B病毒、人类免疫缺陷病毒、乙型肝炎病毒、甲型肝炎病毒、梅毒、人类疱疹病毒6型、单纯疱疹病毒1型、单纯疱疹病毒2型、甲型流感病毒、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、西尼罗病毒和登革热病毒样本进行交叉反应评价。结果显示，上述样本与本产品均不产生交叉反应。
干扰实验中，申请人采用HCVRNA阴性且总胆红素≥340μmol/L、游离血红蛋白≥6g/L、甘油三酯≥5mmol/L和干扰素α-2a为60μg/L的样本作为稀释液，制备高中低浓度的样本，重复检测，结果均不干扰本试剂盒的检测结果。
本次申报产品仅包括1种包装规格（48人份/盒）,申请人提供了三批产品在所有适用机型上的性能评估资料。以上性能研究符合44号公告要求。
（四）阳性判断值研究 申请人选择涵盖1～6基因型的临床血清样本，采用本试剂盒进行阳性判断值的研究，确定其阳性判断值为≤40Ct。
（五）稳定性研究 申请人对本产品的实时稳定性、开瓶及冻融次数限度稳定性、运输稳定性以及样本稳定性进行研究，确定了在各种条件下本产品及样本的有效保存时间。所用试剂批次包括MC20150922、MC20150926、MC20150929。
实时稳定性研究：将核酸扩增试剂盒储存于-20±5℃条件下,核酸提取试剂盒储存于2℃～8℃条件下连续13个月对试剂盒的外观、阴阳性符合率、最低检出限、定量限、准确度、精密度进行考察，各项性能指标均符合要求，确定产品在规定的储存条件下，可稳定保存12个月。
此外，申请人对产品的开瓶及冻融次数限度稳定性、运输稳定性和样本稳定性分别进行了研究。结果显示，产品的性能均满足产品说明书声称的要求。 三、临床评价摘要 申请人在首都医科大学附属北京佑安医院、中国人民解放军第三〇二医院和首都医科大学附属北京地坛医院共3家机构完成了临床试验。
采用考核试剂与已上市产品对临床样本进行比较研究试验的方法验证本产品的临床性能。入组样本为经临床丙型肝炎病毒核酸检测后的HCVRNA阳性样本和丙型肝炎病毒核酸检测HCVRNA阴性的非丙型肝炎诊断人群的样本，共计520例。对比试剂选择已上市同类产品（注册证号：国食药监械（进）字2014第3401702号)，考核试剂与对比试剂检测结果不一致的样本采用第三方试剂（注册证号：国械注准20153400085）进行确认。
本次临床试验在三家临床试验单位共检测520例血清样本，其中有2例样本为同一患者血清，故排除1例，实际纳入统计样本519例。其中阳性样本459例（88.4%）,阴性样本60例（11.6%）。15IU/mL～50IU/mL的样本43例。3a型样本5例、3b型样本5例、6a型样本20例。
考核试剂与对比试剂比较，考核试剂的阳性符合率为99.1%、阴性符合率为100.0%，总符合率为99.2%。15IU/mL～50IU/mL的样本阳性符合率为93.0%。
经kappa检验分析，kappa值为κ=0.963，P<>
经卡方检验P=0.125>0.05，两种检测方法的检测结果无统计学差异。
相关性分析显示考核试剂和对比试剂线性r=0.994，P<><>
特殊基因型（3a、3b、6a）样本，考核试剂与对比试剂组间线性相关系数r=0.997（P<><>
综上所述，申请人考核试剂与对比试剂检测结果一致，具有等效性。
四、风险分析及说明书提示 丙型肝炎病毒感染的患者，可以选择丙型肝炎病毒核酸测定试剂盒进行检测，检测血液中HCVRNA含量的变化情况，样本采集过程会给患者带来一定的风险，但可以评估患者体内HCVRNA含量，辅助临床治疗和预后监测。
丙型肝炎病毒感染的患者的标本处理过程中，可能出现样本间交叉污染的现象，存在假阳性的风险。本试剂盒从组分研发、试验操作步骤设计、废液收集等环节降低了风险，使风险处于可控状态。
丙型肝炎病毒感染的患者可伴有黄疸、肝硬化、服用抗病毒药物等情况，因此可能出现样本检测受黄疸、溶血和药物等因素影响的风险。通过临床试验验证，本试剂盒抗干扰能力满足临床常规需求。
随着治疗手段的不断提高，丙型肝炎病毒感染患者的治愈率不断提高，对患者病毒含量检测试剂盒的灵敏度要求越来越高，可能存在漏检风险。本试剂盒提高了检测灵敏度，降低了漏检风险。
综上所述，丙型肝炎病毒核酸测定试剂盒（PCR-荧光探针法）的收益大于风险。 综合评价意见 本申报项目为境内第三类医疗器械产品注册，属于创新审批项目（编号201600066)。申请人的注册申报资料符合现行要求，依据《医疗器械监督管理条例》（国务院令第680号）、《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令2014年第5号）等相关医疗器械法规与配套规章，经系统评价后，建议准予注册。 |
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