移液器即移液枪,又名加样器。主要用于量取少量或微量的液体。对于移液枪的正确使用方法及其一些细节操作,是很多人都会忽略的。市面上移液器的品牌也比较多,比如Eppendorf、Gilson、Brand、Thermo、百得、瑞宁以及大龙移液器。但是第一次使用移液器 的人,总以为移液器的操作非常简单,其实不然。移液器的操作是科学试验的第一步,是一 个非常基础的试验操作,但绝大多数人对移液器的操作都有偏见。其实移液器的操作学问很多。 不妨问问自己这么几个问题,就可以看出您的操作有无偏差: 1. 您操作时是否发生过液体倒吸进入活塞? 2. 移液器使用完毕后,您是否将移液器量程调至最大值? 3. 移液器使用完毕后,您是否将移液器平放在桌面上? 4. 移液器在移粘稠液体和一般液体时,操作方式一样吗? 一、原理 1 原理: 活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸 液和放液。 2 加样体积范围: <1μL~10mL 3 缺点: 不适宜移取高粘稠度液体、挥发性较大的液体 易发生交叉污染 错误的使用习惯易造成移液器精度不准甚至移液器内部腐蚀等等 二、移液器使用方法 3.1. 枪头安装 正确的安装方法叫旋转安装法 把移液器顶端插入枪头(无论是散装枪头还是盒装枪头都一样),在轻轻用力下压的同时,左右微微转动,上紧即可 3.2. 移液体积设定 粗调:通过旋转按钮将体积值迅速调整至接近自己的预想值; 细调:当体积值接近自己的预想值之后,应将移液器横置,水平放至自己的眼前,通过调节 轮慢慢地将容量值调至预想值,从而避免视觉误差所造成的影响; 从大体积调节至小体积时,为正常调节法,调节到刚好就行; 从小体积调节至大体积时,就需要先调节超过设定体积的刻度,再回调至设定体积,可保证 最佳的精确度。(这是由于计数器里面有一定的空隙,需要弥补)。 3.3. 预洗枪头 在我们安装了新的枪头或增加了容量值以后,应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次, 这样做是为了让枪头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使整个移液过程具有极高的重现性。 在吸取有机溶剂或高挥发液体时,挥发性气体会在白套筒室内形成负压,从而产生漏液的情 况,这时需要我们预洗四到六次,让白套筒室内的气体达到饱和,负压就会自动消失。 粘稠液体可以通过枪头预润湿的方式来达到精确移液,先吸入样液,打出,枪头内壁会吸附 一层液体,使表面吸附达到饱和,然后再吸入样液,最后打出液体的体积会很精确。 3.4. 吸液 先将移液器排放按钮按至第一停点,再将枪头垂直浸入液面,浸入的深度为: P2、P10 ≦ 1 mm; P20、P100、P200 ≦ 2 mm; P1000 ≦ 3 mm; P5mL、P10mL ≦ 4 mm; 浸入过深的话,液压会对吸液的精确度产生一定的影响,当然,具体的浸入深度还应根据盛 放液体的容器大小灵活掌握。 3.5. 放液 放液时,枪头紧贴容器壁,先将排放按钮按至第一停点,略停顿后,再按至第二停点,这样做可以保证枪头内无残留液体。如果这样操作后还有残留液体存在的话,就应该更换枪头了。 正向吸液: 操作时吸液可将按钮按到第一档吸液,释放按钮。放液时先按下第一档,打出 大部分液体,再按下第二档,将余液排出。 反向吸液: 吸液时将按钮直接按到第二档再释放,这样会多吸入一些液体,打出液体时只 要按到第一档即可。多吸入的液体可以补偿枪头内部的表面吸附,反向吸液一般与预润湿吸 液方式结合使用,适用于粘稠液体和易挥发液体。 3.6. 卸掉枪头 卸掉的枪头一定不能和新吸头混放,以免产生交叉污染。 移液器用完后调回最大量程。 四、移液器使用的注意事项移液器是否漏气? 1、目视法检测: 将吸取液体后的移液器垂直静置 15 秒,观察是否有液滴缓慢的流出。若有流出, 说明有漏气现象。 2、可能原因:
五、移液器的维护保养 如不使用,要把移液枪的量程调至最大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。最好定期清洗移液枪,可以用肥皂水或 60 %的异丙醇,再用蒸馏水清洗,自然晾干。高温消毒之前,要确保移液器能适应高温。 校准是可以在 20-25 度环境中,通过重复几次秤量蒸馏水的方法来进行。 |
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