自从人类微生物组计划(HMP)开展以来,人类健康与肠道微生态研究持续升温,引无数英雄竞折腰,纷纷加入肠道菌群研究大军。 那么,问题来了:粪便样本该怎么取呢?相关的文章很多,但取样方法都写得很简单,很多细节处理起来心里都没底,怎么办! 不用担心,小锐将人类微生物组计划(HMP)和国际人类微生物组标准(IHMS)的取样方法进行了梳理和整合,给大家奉上史上最详细、最权威的的粪便取样方法。 方法 Ⅰ 适用情景:取样4 h内可运输回实验室 1 准备所需器材 2 贴标签,标注信息 将标签纸③贴在带勺粪便采集管②(若粪便采集管自带标签可不用再贴)及自封袋④上。在所有标签上注明取样对象信息(姓名、样本编号、样本类型、取样时间等)。 温馨tips:用透明胶带在粪便采集管标签上至少缠绕一圈,并在管盖上标识名称,更加保险。 3 收集粪便样品 将粪便样本收集系统①置于马桶上,放下马桶座圈,排便,再将手洗干净。 温馨tips:尽量在收集粪便样本前将尿液排尽,再将手洗干净。 省钱tips:可以在盒子上套袋,多次使用。 4 取样 将粪便样本收集系统①的盒子拿出,用勺子②截取粪便中段内部一勺(约1 g,勺子不要装得过分满)。 5 装样 将勺子垂直放入粪便采集管②,拧紧盖子。 6 重复取样 一式三份,重复步骤4~5。 7 寄送样品 将粪便采集管②放入自封袋④中,需在4 h内寄送回实验室进行抽提或-80 ℃保藏。 运输、保存常见问题 解决方法 是否需要液氮速冻? 液氮速冻后,能立即放入冰箱或置于冰盒、干冰上,防止反复冻融的前提下,可以用液氮速冻。 若4 h内无法运送回实验室,该如何操作? 液氮速冻后或直接置于干冰上运输。 其他注意点? 无论采取何种方式取样、运输、保存,同一研究所有样本的采样、运输、保存方式需保存一致。 方法 Ⅱ 适用情景:受试者自己在家取样;或取样后24小时内无法送到实验室且无法干冰寄送 1 准备所需器材 2 贴标签,标注信息 将标签纸⑤贴在带勺粪便采集管②(若粪便采集管自带标签可不用再贴)、运输保护管④及自封袋⑥上。在所有标签上注明取样对象信息(姓名、样本编号、样本类型、取样时间等)。 温馨tips:用透明胶带在粪便采集管标签上至少缠绕一圈,并在管盖上标识名称,更加保险。 3 收集粪便样品 将粪便样本收集系统①置于马桶上,放下马桶座圈,排便,再将手洗干净。 温馨tips:尽量在收集粪便样本前将尿液排尽,再将手洗干净。 省钱tips:可以在盒子上套袋,多次使用。 4 添加保护剂 将粪便采集管②垂直插入运输保护盖④中,打开粪便采集管②,倒入保护剂③。 5 取样 将粪便样本收集系统①的盒子拿出,用勺子②截取粪便中段内部一勺(约1 g,勺子不要装得过分满)。 6 装样 将勺子垂直放入粪便采集管②,保护剂③需没过粪便样本(勺子可剪断,没入保护剂中),拧紧盖子。 7 重复取样 一式二份,重复步骤4~6。 8 竖直静置,使样本和保护剂充分接触 粪便采集管②在室温下,竖直放置至少1 h(使粪便样本在保护剂至少放置1 h)。 9 寄送样本 将粪便采集管②塞入运输保护管④中,放入自封袋⑥,需在7天内寄送回实验室进行DNA抽提。 好嘞, 关于粪便的取样方法和注意事项, 就先讲到这儿喽。 肿么样 是不是收获满满? 那就赶紧撸起袖子,加入肠道菌群研究大军吧! 若有问题,欢迎留言咨询~ 供稿:巫萍 编辑:王丽燕
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