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牡丹育种技术，以选择育种和杂交育种的应用较为广泛，其它如诱 变育种、航天育种及生物技术等也正在应用、研究之中。 １、选择育种 利用现有种类、品种的自然变异群体，通过选择的手段而育成新品种的途径，叫做选择育种。牡丹的选择育种一般包括实生选种和芽变选种，以实生选种为主。
⑴实生选种：在天然授粉产生的种子经播种后形成的实生苗群体中，通过反复评选即经单株选择而育成新品种的方法，这是一个传统的然而是行之有效的育种方法，至今各地仍广为应用。过程如下： 初选：将种子按10×30cm的株行距进行点播，原地连续生长3－5年，大部分植株都可开花，从中选择符合育种目标或基本符合育种目标的变异单株，并做好性状记载工作。 复选：秋季对选出的单株进行分株、嫁接繁殖，每一变异单株所繁殖的苗木要栽成1行。经3－4年，植株进入正常开花期，在第五年进行复选，淘汰与育种目标不符或性状不稳定的品种。 决选：将复选出来的品种植株于秋季再次分株、嫁接繁殖，栽植时设3－5次重复，消除因土壤、病毒等外因造成的误差。以后每年都要对每一个品种进行更为细致的观察、记录。3－5年后，对符合育种目标、性状确实稳定的品种，可以正式定为新品种，并加快繁殖。 实生选种由于持续时间较长，需要在初开花一二年内尽快进行初选，决定去留。掌握初花时的某些形状表现及其发展趋势，可为初选提供依据。 初开花时，雄蕊多达100枚以上时，以后多是单瓣花；反之，多为重瓣花。 初开花时，雌雄蕊已有少量瓣化或变态的，多为重瓣花。 花色从初开起，以后极少变化。 凡重瓣花品种不易结实，或结实后种子较弱。 花瓣的大小、多少及香味浓淡与水肥、管理等密切相关。 初选时，可以根据以上要点，结合预先制定的选择标准，决定去留。 ⑵芽变选种：芽变选种是指对芽变发生的变异进行选择，从而育成新品种的选择育种法。 当牡丹栽培个体受到环境条件、栽培技术及体内代谢的影响，都有可能发生体细胞突变，进而形成芽变。要经常注意观察，一旦发现优良性状变异，应立即标记，并通过嫁接等方法固定。 芽变选种与实生选种程序基本相同，首先在牡丹园(圃)内选出变异优系，即初选阶段，然后对初选体系的无性繁殖后代进行复选和决选。 ２、杂交育种 是指通过人工杂交，把分散于不同亲系上的优良性状组合到杂种中，对其后代进行多代培育选择，获得基因型纯合或接近纯合的新品种的育种途径。杂交育种包括自然杂交和人工杂交两种方式。自然杂交又称实生选种，我国90% 以上的牡丹品种都是通过自然杂交选育的。人工杂交是有目的地选配亲本，用人工授粉的方法获得杂种后代，再从中培育新品种的方法。人工杂交包括几个关键的技术环节。 ⑴母本去雄、套袋： 去雄就是将母本的雄蕊在成熟之前去掉，去雄时，选含苞待放的母本株植，剥开花瓣，用镊子夹住花丝，将雄蕊全部剔除。如果母本不同，每去一次雄，都应用70%的酒精消毒。去雄后，要立即套上硫酸纸袋。 ⑵父本花粉 通常在授粉当天或前一天，选含苞待放的父本植株，采集花粉，花粉采集的最佳时间为上午9－12时，如不能立即授粉，可在阴凉处暂时存放， 一般可保持生活力3－5天；若将整个花蕾在花药还未破裂时采下，在0－4℃条件下进行保鲜贮存，可贮存20－30天，但生活力则会随贮存时间的推移逐渐减弱。 ⑶授粉 当母本花瓣完全张开时，柱头开始分泌大量粘液，历时3－5天不等，这时雌蕊生命力旺盛，是人工授粉的最佳时期。授粉时间以晴天上午9－12 时现采花粉现授最好。操作时，用毛笔或授粉棒蘸取父本花粉，轻轻涂抹在母本柱头上，每天授粉一次，连续授粉2－3天，每次授粉后要立即套袋，并做好记载工作。授粉用具在每授完一个组合后要更换或用70%酒精消毒后再用。 授粉8－10天后，柱头停止分泌粘液，这时便可取下纸袋，待种子成熟时采收。 ３、远缘杂交育种 远缘杂交通常是指植物分类学上不同种、变种、属以上类型间的杂交。我国的野生牡丹种质资源丰富，开展远缘杂交甚至牡丹与芍药之间的远缘杂交，意义重大。事实上，国外在这方面已远远领先于我们。但是，在亲缘关系较远的情况下杂交常难以成功，因此，克服远缘杂交不孕，提高杂交结实率十分重要。一般较常用的方法有： ⑴注意亲本的选择 大量事实证明，当两个物种间进行杂交时，利用两个物种的不同变种或品种测交，并进行正反交，确定适当母本是克服远缘杂交难交配性的一项有效措施。 ⑵采用特殊的授粉方法 ①混合授粉法：利用不同种类花粉间的相互影响，改变授粉的生理环境，可以解除母本柱头上分泌妨碍异种花粉萌发特殊物质的影响。混合花粉可以是若干种远缘花粉的混合物，也可混入经高温杀死的母本花粉。 ②重复授粉法：在同一母本的花蕾期、开花期和临谢期等不同时期，进行多次重复授粉，以利用雌蕊不同发育程度、受精选择性的差异，促进受精结籽。 ③提前或延迟授粉法：母本柱头对花粉的识别和选择能力，一般在未成熟和过熟时最低，所以，提早在开花前1－5天或延迟到开花后数天授粉，可提高远缘杂交结实率。 ⑶生理接近法 常用的方法是在杂交前，将亲本双方先嫁接成一体，通过接穗和砧木间的营养交流，使差异得到缓和，开花后再进行有性杂交。 ⑷媒介法 利用亲缘关系与两亲本都较近的第三个种作为桥梁，先与某一亲本杂交产生杂种，然后用这个杂种再与另一亲本杂交。“桥梁种”起到有性媒介的作用，从而改善结实情况。 ⑸柱头移植和花柱短截法 柱头移植的方法通常有两种：一是将父本花粉先授于同种植物柱头上，在花粉管尚未完全伸长前，切下柱头，移植到异种的母本花柱上；二是先进行异种柱头嫁接，待一二天愈合后再行授粉。花柱短截法是把母本花柱切除或剪短，把父本花粉直接撒在切面上，或将花粉的悬浮液直接注入子房。 ⑹化学药剂的应用 一般用赤霉素、萘乙酸、硼酸等化学药剂，在授粉后涂抹或喷洒处理母本的花柱和子房基部，能促进花粉发芽和花粉管生长，有利于杂交的成功。 ⑺调节花期 有时杂交亲本花期不遇，特别是牡丹组和芍药组远缘杂交时，花期不遇便是首先要克服的障碍，可以用催延花期的栽培技术，或采集南北不同气候区的花粉进行异地授粉，或利用海拔高度调节花期。 ４、辐射诱变育种 牡丹的辐射育种是指利用放射性同位素或激光处理牡丹种子、植株或芽体，诱导其发生突变，然后在后代中选择符合人们要求的类型，继而加以培养和繁殖，从而获得新品种的方式。 菏泽市牡丹研究所于1998年在山东农业大学用60Co 10000、20000、30000、40000、50000伦琴剂量照射牡丹种子和接穗，结果是：接穗嫁接后无１株成活，而种子各处理均发芽良好，到现在已三年，虽还未开花，但根据对叶片的观察，变异极大。 1999年再次用60CO 60000、70000、80000、100000伦琴剂量照射种子，结果一棵未出(因播种时间为11月上旬，虽覆盖地膜，但是否因播种太晚而致未出， 尚待进一步验证。) ５、多倍体育种 采用物理的或化学的方式，使植物体细胞中含有3个或3个以上染色体组的育种方式，叫多倍体育种。 生产中，应用最广、交果最好的是秋水仙素诱变，具体方法如下： ⑴浸渍法 此法一般用秋水仙素水溶液，方式有种子浸渍，生长点倒置浸渍，腋芽、接穗浸渍等，浸渍浓度一般为0.2－1.6%，浸渍时间24－72小时，处理后要用清水洗净播种。 ⑵涂抹法 秋水仙素按一定浓度配成乳剂，涂抹在幼苗或枝条的顶端，处理部位要适当遮盖保湿，以减少蒸发和避免雨水冲洗。乳剂的配制方法为：甘油7.5ml，水2.5ml，10%的santomerse(湿润剂)6－8滴(20滴约1ml)，配成混合液，同时加入所需浓度秋水仙素溶液(一般为0.1－1.0%)，处理后隔3-5天宜将甘油洗去。 ⑶滴液法 常用的水溶液浓度为0.1－0.4%，每天滴1－3次，反复处理3-5天。药液的配法是：秋水仙素0.5%，加10%的甘油10ml，再加10%的santomerse 2滴。 除上述方法之处，原生质体培养与体细胞杂交、基因工程，分子标记等生物育种技术发展较快，这应该成为牡丹育种的重要发展方向。 |
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