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ExCell MB支原体检测试剂盒-让细胞房中的支原体可见

 生物_医药_科研 2019-01-23

看不见的敌人—细胞房中的支原体

ExCell MB支原体检测试剂盒-

让细胞房中的支原体可见

细胞被污染了,你发现了么?

用好的血清,细胞一定状态良好?

养细胞细心、体贴像照顾小孩纸,细胞一定“平平安安”?

MTT等一些细胞实验结果异常,找不到原因?

你的细胞,很有可能已悄悄被支原体污染了!

什么是支原体?

支原体是目前发现的最小的最简单的原核生物。支原体没有细胞壁,只有细胞膜。娇小的身材(0.2-0.3μm)让它可以轻松穿过滤器。由于身形小,培养物不会表现出浑浊或其他明显可见的特征,因此支原体很容易被忽视。但支原体其实已经随着操作者的操作“偷偷地”潜入超净工作台,并附着在计数器、移液器、废液缸等物体表面。

支原体污染来源有哪些?

1. 已污染的培养基、血清、或试剂。

2. 灭菌不彻底 。

3. 培养箱、移液器、离心机等实验设备。

4. 液氮液氮中,支原体虽然实验设备不会增殖,但是仍可以污染保存在其中的细胞。

5. 空气悬浮物。培养过程中产生的悬浮颗粒是微生物污染的最主要来源,一些常见的仪器或普通的实验操作都会产生这些颗粒,外来实验动物也会带来一些被污染的悬浮颗粒。

6. 除上述的情况外,滥用抗生素、密封不严、受污染细胞等也都可能是支原体污染的来源。

支原体污染有哪些危害?

1. 支原体导致细胞密度的减少,并引发细胞不可逆的退化。

2. 支原体吸收、破坏培养基中的精氨酸,抑制细胞生长、引发细胞凋亡,造成细胞活性降低、细胞脱落等现象 。更有甚者,也可能导致染色体畸变,因为精氨酸是细胞核内组蛋白的重要成分。

3. 支原体对MTT有还原作用,因此常规的细胞毒性实验MTT实验的结果会受到支原体的严重干扰;某些支原体也可以直接诱导树突状细胞的成熟;除此之外,支原体的存在可以显著改变数百个基因的表达水平。

产品特性

ExCell Bio支原体检测试剂盒通过PCR法检测可疑样本支原体DNA,其中PCR引物通常针对支原体的16S rRNA基因设计。在凝胶电泳过程中,支原体DNA会在280bp处显示为特异性条带,以指示样本中支原体的存在。

支原体检测试剂盒特点:

1.检测快速便捷:PCR方法3-4小时即可出结果,而传统培养法需3-5周。

2.检测范围广:可检测54种支原体。

3.灵敏度高:能够检测大于10-20拷贝的靶DNA。

4.双质控标准和阴性对照:阳性对照两条(280bp和150bp);同时带有阴性对照,可排除假阴性。

5.有效防止PCR产物的交叉污染:配以100%dUTP和UDG酶。

参考数据

样品 1 和 2 为支原体检测阳性,其中样品 2 污染严重,样品 3 和 4 为支原体检测阴性。
100 bp DNA Ladder : 100bp, 200bp, 300bp, 400bp, 500bp(加亮), 600bp, 700bp, 800bp, 900bp, 1000bp,1200bp, 1500bp, 2000bp

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