目标基因神捕，靶向测序绝配

电影《四大名捕》里面诸葛神侯的四大徒弟冷血、无情、追命和铁手各自身怀绝技的形象深入人心，但是他们又有共同的特点就是可以精准捕获要对付的目标。

现如今，精准医疗、精准测序的时代已经到来，“靶向”成了这一时代C位出道的明星。而基于探针杂交捕获方法的靶向测序，由于不易污染、捕获区域大的优势，是目前靶向测序的主流方法。

今天小编就为大家介绍其中的关键步骤——探针捕获！

                                         

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 模板封闭

在探针杂交之前，需先加入DNA封阻剂，竞争性结合文库基因中的重复性片段，减少对非目标序列的捕获，降低干扰，提高中靶效率。

Invitrogen Human Cot-1 DNA 是胎盘 DNA，长度主要为 50 至 300 bp，并且富含重复的 DNA 序列，可以用放射性的³²P和生物素标记，能用于在微阵列筛选中阻断非特异性杂交。

• 品质保证：通过浓度、纯度、长度检测，严格的质量控制标准。

• 批次间稳定性高：每个批次都使用微阵列和比较基因组杂交（CGH）进行测试。

• 兼容性高：适用于不同的探针标签方法，如nick翻译，同聚物跟踪，替代合成，随机启动合成，还可兼容自定义protocol。

添加Cot-1作为封阻剂之后，目标DNA区域的富集都能有显著提高！

这款优质的封阻试剂被多个探针捕获试剂盒生厂商推荐：

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杂交

杂交捕获的原理是设计探针，与目标片段互补配对，将未被结合的片段洗脱，留下需要的目标片段。由于分离步骤通常使用的是能与生物素结合的链霉亲和素磁珠纯化，故而需要在核苷酸探针上添加生物素标记。

DNA探针：

推荐选择Biotin-14-dCTP和Biotin-14-dATP

RNA探针：

推荐选择Biotin-16-UTP

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生物素-链霉亲和素反应

接下来，就是久负盛名的Dynabeads Streptavidin磁珠出场啦！

作为生物素化配体和靶分子分离处理的金标准，Dynabeads Streptavidin磁珠表面有共价偶联的单层链霉亲和素，能结合生物素化的配体/靶标。

• 直接快速分离任何生物素化分子

• 灵活的方案具有温和高效的液相反应动力学特性

• 极低的核苷酸和核酸非特异性结合

• 生物磁性分离方案能轻松适应自动化平台

• 批间可重复性高，确保一致的结果

您知道吗？全世界有超过25000个日常 IVD 设备使用 Dynabeads磁珠，也被众多捕获试剂盒厂商推荐：

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磁性分离

最后一步就是用磁力架将未被结合的片段去除，留下需要的目标片段。

如果您的样品是全血样本分离出来的总RNA，我们还为您准备了一个好帮手：

GLOBINclear™ 试剂盒

全血样本分离出的总RNA里有大约70%是来源于球蛋白mRNA，如果不将球蛋白mRNA去除，会对低丰度转录本的分析造成严重的影响。

GLOBINclear^TM 试剂盒使用磁珠法，探针捕获球蛋白mRNA，能够在90min去除95% alpha和beta球蛋白mRNA。

    

是不是想订购了呢？具体订购信息，请见下方：

今天推荐的试剂，不仅仅可应用于靶向测序，比如Biotin-14还可用于高通量染色体构象捕获（Hi-C），更多应用介绍，持续关注，敬请期待。