 间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是一种多能干细胞。相较于其他干细胞，间充质干细胞具有更多优势：来源广，数量足，易于分离、培养、扩增和纯化，传代扩增30多代后仍具有干细胞特性。 然而迄今为止，间充质干细胞在体内和体外扩增后是否表达同一组表面标志物尚不清楚。近期，德国柏林-勃兰登堡再生医学中心借助新一代生物标志物检测技术——Chipcytometry芯片式成像深度分析系统 首次完成在人胎盘冷冻切片中原位检测MSCs的表面标志物CD73/ CD90/ CD105/ CD45/CD34 /CD14 /CD19的表达检测。 表1.胎盘冷冻切片上MSCs典型标记组合的阳性区域数目 研究人员对早期终止妊娠（妊娠12周）和足月妊娠所获取的人胎盘冷冻切片进行分析。根据经典ISCT定义，分别在3个组织切片（M126694，M12688和M126696）上发现了不同数目的间充质干细胞区域（6个，3个和0个），每个区域由单个细胞或彼此非常接近的几个细胞组成。研究人员考虑到间充质干细胞在体内可能不会表达所有典型的表面标志物CD105、CD73和CD90，因此还寻找了单阳性细胞和双阳性细胞区域(表1)。 图1. 人胎盘冷冻切片染色图 图1 为其中一个具有代表性的组织切片（M126688）染色示意图。三阳性区域的数目相当低，表明大多数MSCs在体内不表达所有特征性表面标志物，而在体外培养期间表达上调。与此一致的是，研究人员还检测到一些CD73+CD90+和极少数CD73+CD105+双阳性谱系标记区域，这可能是MSCs的前体或亚群。 利用Chipcytometry技术，可以为进一步研究MSCs在体内的作用和功能开辟更广阔的空间和机会。例如，帮助接受MSCs治疗的患者，追踪被注射进入人体后的MSCs，监控其之后的命运及其与受体免疫细胞的相互作用。
Chipcytometry芯片式成像深度分析系统 是一种基于成像的细胞术平台，结合了显微成像和流式数据分析方法，从根本上突破了传统方法的各类局限，可对细胞和组织切片的生物标志物进行成像检测分析。 图2. Chipcytometry 芯片式成像深度分析系统 价 值 优 势 01 样品可长期保存，≥2 年结果依旧稳定可靠 科研、临床前和临床样品的长期保存，意义重大，但是传统的方法难以到达这个要求，而Chipcytometry 芯片式成像深度分析系统可以把样品完好地保存在芯片中，2 年之后还是可以检测，并且得到稳定可靠的结果。 图3. 细胞样本保存24个月与初始时标记着色对比图 02 珍贵少量样品也可获得大量数据 科研、临床前和临床样品一般都具有稀缺性，数量和体积有限。传统检测手段，比如流式细胞仪、高内涵等设备仅能做几重，最多十几重，所能获得的数据量有限。而 Chipcytometry 芯片式成像深度分析系统可针对同一样本做上百重的检测，少量样本也能获得大量数据。 图4. 人冷冻胚胎切片多重染色结果 Detection of CD73+CD90+ CD105+ lineage- mesenchymal stromal cells in human placenta. Autofluorescenceat 560 nm of a frozen human placenta 2 μm section (A) and color overlay of CD90(red), CD73 (yellow), CD105 (cyan), panCytokeratin (magenta), CD31(white), DNA(orange) and the dump channel (green) (B, C) are shown for one representativespecimen out of three. The part figures (B) and (C) represent highermagnifications of the areas of interest, as indicated by the rectangles. TwoCD90+ CD73+ CD105+ dump-MSCs are depicted in (C). The placenta derived from anormally progressing pregnancy that was legally interrupted in the 11th week ofpregnancy.（From “In Situ Detection of CD73+ CD90+ CD105+Lineage:Mesenchymal Stromal Cells in Human Placenta and Bone Marrow Specimensby Chipcytometry”）
03 彼此独立互不干扰的多重检测 传统检测手段，比如流式细胞仪、高内涵等设备虽然也可以进行多重检测，但各重检测之间相互有干扰、分析十分困难且容易产生偏差。而Chipcytometry 则完全解决了这些问题：各重检测之间相互独立、没有干扰，可以得到真实可靠的数据。
图5. Chipcytometry工作流程 04 样品可反复检测，完全符合FDA ISR要求 ISR（Incurredsamplereanalysis）即已测样品再分析。在临床前和临床试验中，科研、临床前和临床样品不够稳定和仪器之间的差异等原因，导致标准化的基于细胞学分析的生物标志物检测仍然是一个挑战。采用传统的流式细胞仪没法连续分析同一个样品，因为样品在初次检测后就会丢失。Chipcytometry完全符合ISR要求，因为样品会完整的保存在chip中。所以科研、临床前和临床样品分析采用Chipcytometry符合 FDA 的现行法规要求。 05 专利技术可确保样品不受运输条件的干扰 有的科研、临床前和临床样品的取样地点在医院，而检测地点在检验中心或检测公司，取样后没法马上进行检测，样品需要经过运输，往往需要进行冷藏等手段处理，但是这会导致生物标志物水平发生变化，很可能得到不准确的结果。Chipcytometry 则可以杜绝这个问题，取样人员可在取样后尽快把样品导入到chip 中并固定，固定后样品的生物标志物水平不会改变，可以化解取样地点和检测地点不同的鸿沟。 图6. PBMCs在运输前后的染色对比图 06 方法开发和临床前和临床检测都十分方便 多重检测的方法开发一直都是免疫学检测重要难点，因为多色荧光的光谱串色问题，需要经过抗体、荧光素、通道、反应条件、光谱拆分计算等一些列因素的优化，过程十分繁琐耗时，需要十分有经验的技术人员才能完成。而Chipcytometry在技术上的独到优势却可以使的整个过程十分简约方便，整体上可以节省大量时间，且降低了使用门槛。  Chipcytometry芯片式成像深度分析系统 最大的创新点在于，它利用专利的芯片技术可将珍稀样本进行超过20个月的保存，却仍维持细胞上生物标志物的构型，进而使研究者得以重复地对同一珍稀样本进行检测，实现真正意义上的生物信息多重深度挖掘。如可以同时检测多达105种的人免疫表型或39种鼠免疫表型。因为采用芯片作为载体，所以仅需微量样本即可进行多重分析，让珍稀样本的检测不再是限制，并获得最大程度上的分析价值。 典奥生物科技（上海、香港、台湾）成立于1994年。公司以国际一流仪器生厂商为背景，为国内生命科学研究机构和医药研发创新公司提供国际一流水平的仪器设备软硬件和技术服务平台。 作为生命科学仪器设备的顶级供应商，典奥生物以使用者的角度筛选出业界最好的产品，派遣专业的工程师至原厂进行最严格的考察，以具有丰富研发经验的专家为技术支持，专业的维修团队为服务后盾，为客户提供最前沿技术支持和高质量的服务保障。 因为专注，所以专业。多年来，典奥生物以专业的产品和服务获得了业内广泛的认可和好评。今后，典奥生物也会以一贯的严谨态度，持续走在生命科学领域研究市场的最前端，将最前沿的技术及时分享给大家。 目前，典奥生物科技国内独家代理仪器： 1. IncuCyte S3/活细胞动态成像与分析系统，美国Essen BioScience 2. AVATAR/个体化细胞精准控制系统，美国XCell Biosciences 3. IsoLight/单细胞功能信息多重检测系统，美国Isoplexis 4. iQue Screener PLUS/超高通量流式智能筛选系统，美国IntelliCyt 5. Certus Flex/多功能分液器，瑞士Gyger 6. Bluewasher/非接触式微孔板样品处理系统，德国BlueCatBio 7. DA-Cell/微滴阵列样品前处理系统，新加坡Curiox 8. DA-Bead（LT210、HT200）/微珠样品处理系统，新加坡Curiox 9. Gyrolab/纳升级高通量微流控免疫分析工作站，瑞典GYROS 10. Chipcytometry/芯片式成像深度分析系统，德国Zellkraftwerk 11. LUNARIS /阵列式多重蛋白成像分析系统，德国AYOXXA Biosystems GmbH 联系我们： 电话：021-58605185 Email：marketing@tekon.com.cn 官网：www.tekontech.com 典奥生物科技 因为专注 所以专业 一家聚焦全球领先技术的生命科学仪器顶级供应商 |
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