如何轻松提取神经干细胞？

简单介绍一下干细胞，根据其分化潜能可分为全能，多能和专能。神经干细胞（NSCs）是存在于胚胎和成熟个体中枢神经系统（CNS）中具有增殖（理论上说它可以一直分裂，但是生存不易，一系列因素会参与对它的调控，所以并不能像愚公爷爷一样子子孙孙无穷尽）和多向分化潜能的一类细胞（敲黑板，定义很重要），通过对称性分裂进行增殖，通过不对称性分裂分化成为神经元或神经胶质细胞（无外在因素下，胶质细胞较多）。话不多述，直接上残忍的提取过程。

1、孕14d的鼠妈妈，麻醉后备皮，然后进行残忍的剖宫产手术（对于实验来说，此时鼠妈妈的价值就没了），所以每次动刀前都会双手合十阿弥陀佛，打开子宫后，找到串珠样的鼠宝宝们，酒精浸泡消毒（我一般会省略，因为觉得这时候胚胎和胎盘出于一个密闭的空间中），

于预冷的PBS中，以上操作一般在半污染区进行，以下操作要在超净台中开始。

2、分离鼠宝和胎盘，要求动作迅速，初次接触者，可能会觉得太滑，不好固定，一般我会先从剪断的那个口口下手，最好不要弄破胎盘，否则PBS会变成血泊哦，不过有血泊也无伤大雅的嘛，不戳到鼠宝就行；

3、分离鼠宝的大脑，就是“掐”头，ps:每次本人这么说，都会被师姐敲脑袋，是分离！！分离！怎么就想起了芝士大虾呢~~~

4、用眼科镊分离出所需部位，比如本人经常取得就是皮层和中脑了，一般会将鼠宝的头部置于“侧卧位”，用一把镊子固定住鼠宝的脸部，一把镊子分离出大脑，就是呈或者伞形的那个地方，此处强调稳准但不用狠；

5、分离脑膜，本人以为用剥离或者抽离更恰当，诀窍就是“夹住不放”，保持索取部位的完整性，一气呵成，所以不用体式显微镜也能剥离的很干净；

6、接下来就是按部就班的有序推进就好了，机械剪碎，吹打（小编有强迫症，每次都是30下），过滤，离心，计数，培养。

7、P0-P1大概3-5天的样子，等待大多数神经球长到40X镜下直径差不多为2-3mm，大概就是图中的那个样子，就可以传代了，by the way，因为NSCs是悬浮生长，在不传代的时候记得隔天补液10%左右。

8、最后，奉上堪比SK-II的培养基：含DMEM/F12、0.02的B27 supplement、0.01的N2 supplement、bFGF 10 μg/L、EGF 20 μg/L和0.01的双抗进行培养。

最后，我们要向这些实验动物致敬。