【高中】细胞工程——动物细胞培养

通报菌：

通报菌知道高三党已经开始二轮复习了，而细胞工程（克隆技术）又是高考中的重点，同学们都掌握了吗？

1.培养条件  （1） 无菌、无毒的环境：如培养液和培养工具灭菌，培养液中常添加抗生素的抑菌，定期更换培养液，以清除代谢废物，保障营养供应。 

 （2） 营养：培养液需加入葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等，另外还需加动物血清或血浆。 

 （3） 温度和pH：如培养哺乳动物细胞，温度控制36.5℃左右；pH：7.2—7.4 

 （4） 气体环境：一般为95%空气（其中的氧气用于有氧呼吸） 5% CO₂ （维持培养液pH）  

2. 培养过程，如下图：

要点诠释：

（1）原代培养和传代培养

①原代培养得到细胞株，原代培养的概念有两种表述：

表述一：指没有分瓶之前的细胞培养。

表述二：指第1代及传代10代以内的细胞培养

②传代培养可得到细胞系，细胞系的遗传物质发生了改变，有癌变细胞的特点，传代培养的概念也有两种表述：

表述一：指细胞悬浮液培养一段时间后，分瓶进行的细胞培养。

表述二：指10代以后的细胞培养。

（2）细胞贴壁和接触抑制

①细胞贴壁：进行细胞培养时，一般情况下，细胞悬液中分散的细胞会很快贴附在瓶壁上，即细胞贴壁。

②接触抑制：贴壁细胞不断分裂生长到相互接触时，会停止分裂增殖，这种现象即为接触抑制。

  因为有接触抑制现象，所以贴壁生长的细胞一般为单层细胞。

  癌变的细胞没有接触抑制现象，可无限增殖。

（3）胰蛋白酶的作用：

①取动物组织后，要用胰蛋白酶处理，分解掉细胞之间的蛋白质，使细胞分散开，便于将其制成细胞悬液。

②在由原代培养转为传代培养时，也需用胰蛋白酶处理贴壁细胞，再制成细胞悬液，以便进行传代培养。

3. 细胞培养（克隆）的应用和意义  （1） 获得具有重要价值的生物制品：如干扰素、病毒疫苗等。  （2） 修复受损伤的器官   （3） 检测有毒物质   （4） 培养正常或病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究，如筛选抗癌药物等。   （5） 是其他细胞工程技术（如克隆动物、单克隆抗体的制备、基因工程等）的基础

4. 动物细胞培养、植物细胞培养（植物组织培养技术）比较：

		动物细胞培养	植物组织培养
原理		细胞的增殖	细胞的全能性
细胞来源		胚胎或幼龄动物组织或器官	离体植物器官、组织或细胞 （一般取幼嫩组织或花药等）
过程		原代培养→传代培养	脱分化→再分化
特点		细胞贴壁生长，增殖不分化	先诱导形成愈伤组织，再诱导细胞增殖分化
		不能体现细胞全能性	可体现细胞的全能性
接种前处理		消毒灭菌、 用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞	消毒灭菌
培养条件		恒温、无菌、无需光照	常温、无菌、光照条件
培养结果		细胞株→细胞系	愈伤组织→植株
培养基	类型	液体天然培养基	固体或半固体合成培养基
	主要成分	葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、 动物血清	矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素、 有机添加物
器皿		培养瓶	锥形瓶

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