大家做实验，经常要用到抗体，但是往往不知怎么选抗体，买到不好用的抗体，浪费钱不说还耽误时间。其实挑选抗体还是有些窍门和小“秘密”的，今天Dr. T就给大家分享一些。先说清楚，会提及一些公司名字，但Dr. T可没有收任何广告费，还担着造谣的责任，大家不相信就转发500次试试吧！
挑选抗体首先看清楚此抗体能用于什么。一是能不能用于咱要做的实验类型，不同厂家标注缩写不同，但大体看一眼大家都懂，比如W或WB都是指Western blot，E指ELISA，还有IHC、IP、IF。不废话，只是有一点，万一找不到对应的抗体怎么办？没办法，只有赌一赌了。没标识只是代表厂家没验证，不表示一定不行。二是能不能用于要检测的物种（H、M、Rat等），不多解释，这些大部分人都应该清楚，但万一也没有怎么办？
接下来呢，就是记住几点好：
1.物种越远越好
物种越远，蛋白质相似形性就越低，免疫识别就越容易，产生的抗体效价和特异性就越高。比如要检测human的蛋白质，那Chicken>Goat>Rabbit>Rat>mouse（“>”表示优于）。这也是为什么兔单抗出来后，很多情况下比鼠单抗好用（对于检测到是human的蛋白质来讲）的原因——物种更远了。兔单抗虽然看似贵些，稀释比可能是1：2000，鼠单抗则大多是1：200左右，实际用起来，哪个才是真便宜，你懂的。
2.储存条件-20°C的比4°C的好
一般4°C保存的抗体，保质期说是多久（半年或者一年），基本就是那么久，甚至时间没过保质期也明显变差了，-20°C的抗体保质期说明书上可能只说一年，但实际上常常放上两三年也仍好用。但各位看官前面别听了我的话把说明书写4°C保存的抗体放到-20°C去！凡是标识为-20°C保存的抗体储存液（Storage buffer）都是添加了40%～50%的Glycerol。干嘛的？就是防冻剂。有了它-20°C就不会冻起来，没它可就难保了。抗体也是蛋白质，冻融一次就对蛋白质结构破坏一次，没看见说明书上都写着Avoid freeze / thaw cycle吗！
3.储存有BSA的比没有的好
BSA——牛血清白蛋白。有什么用？蛋白质保护剂。一般BSA浓度为1%，在储存液中的含量远比抗体本身高，万一不小心混入了蛋白酶，先降解的也是BSA。因此有BSA的就更稳定、更耐降解一些。同时有了BSA，比单纯只有抗体这一种蛋白质时，抗体更不容易聚集、变性，也能起到一定程度的抗体稳定作用——这两者在血液里本来就是伙伴。
4.有图的比没图的好
不管是WB还是IHC还是IF等，有图的说明验证过，而且结果还不错，没图的不是没验证过，就是太难看不好意思放上去。但是图里也有猫腻，我们下一集里再悄悄说。
5.多抗比单抗好
这里“好”的意思是指适用性更广泛，效价更高，简而言之就是不容易碰到不好用的。为啥呢？多抗，顾名思义是由很多种克隆的抗体组成的复合物，不同的克隆识别的表位不一样，组合在一起就像是霰弹枪，不用怎么瞄准也能打到，而单抗就是步枪，打不中就只有再瞄准再打了（换另外的单克隆抗体）。因为单抗针对的唯一个抗原表位，抗体结构也是一样，如果这表位在咱要做的体系里碰巧有糖基化、乙酰化、磷酸化等等修饰，或者因为不同折叠方式的关系，表位被遮蔽甚至常在深处，单抗结合就会受到影响。所以大家留心看同一个蛋白质的多抗的稀释比，常常要高出单抗很多。不过对于抗体生产商来讲，单抗的质量更易控制，也易于生产规模的放大，导致他们更希望生产/卖单抗。另外，对于ELISA这样的定量实验，单抗稳定性重复性更好。因此抗体厂商不断努力去筛选适用范围广、特异性好、效价高的单抗，慢慢的，好的单抗也多起来了，比如CST的XP®，Abcam的RabMAb®，Sigma的Prestige Antibodies®金标抗体中的单抗就还不错，这些百里挑一，经多种验证的单抗效能接近多抗，有的还超过多抗，就不是普通步枪，而是狙击步枪了，命中率就高了。（没提到的勿怪，反正Dr.T没收任何广告费，想起什么说什么，一时没想起的，那也没办法了。
6.大公司的比小公司的好
唉～其实主要就是外国品牌的比国产的好，我没有那样说，因为我是中国人。可能不少看官知道，很多外国品牌的抗体其实都是中国厂家生产，然后出去贴个牌又卖回中国而已，不过外国大品牌在质控上面做的确实要好一些。而一些小厂的不是抗体本身不好，而是质控做得不好，所以不同批次性能差别较大。但慢慢的我发现国产品牌越来越重视质控了，还有些国产品牌做的很好，结果被外国大公司给收购了。
7.文献越多的越好
好些抗体公司会把引用此抗体的参考文献放在网页上去，哪个引用的多，自然验证过的人多，就会更可靠些。或者自己将货号输入谷歌学术去检索一下，出来的文章越多，就越靠谱，谨慎点的看官还可以点进去看看文献做的应用是不是自己要做的那种。有的公司还在商品页面开了评论/论坛功能，用户可以留言，弄得像某宝、某东一样，挺好的。
8.重点在图
“微信朋友圈”常常戏谑重点在文字，因为大家都爱看图，确实，图传递信息更快更有效，而且我们还可以从抗体实验展示图中看出一些秘密。第一集第4点说过，有图比没图的好，是指如果抗体说明里展示了相关的实验图片，就比较容易评估这个抗体怎么样。IHC、IF等图比较简单，WB的图就有很多“猫腻”要注意看了。
1）注意看上样样品是否是重组蛋白（即外源过表达的蛋白质，全长或者部分）。外源过表达蛋白质的量常常比内源表达的多很多，可能图上面外源过表达的检测出来条带很清晰、很纯，但是真正检测内源蛋白的时候，这抗体的灵敏度或特异性可能就未必好了。而且Dr.T猜测，多半是内源的检测不到或者效果不好，所以只有放一个外源的检测图上来。下图左边是外源的，右边是内源的，最好挑右边这种哦（虽然右边的条带不好看）！有的图并没写清楚样品是什么，那注意看一下条带大小，与内源的预测大小差很多的可能就是重组蛋白。
2）图一样的，本质上就是同一个抗体。大家有没有碰到过去不同公司网页上找抗体，发现两个公司的抗体的实验展示图是一模一样的，有木有？嘿嘿，其实这就是同一种抗体，不少所谓大公司，只是贴牌商，采购的小公司的抗体贴上自己的牌子。那这时候，哪个快、哪个便宜、选哪个就看你了，你懂的！
