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DNA 甲基化是最早发现的基因表观修饰方式之一, 在基因沉默、基因印记和染色质失活上起着重要的调控作用。异常的DNA甲基化与发育缺陷和癌变相关。通常，DNA 甲基化是在DNA 甲基化转移酶(DNMTs)的作用下使CpG二核苷酸5'端的胞嘧啶转变为5'甲基胞嘧啶。这种DNA 修饰方式并没有改变基因序列，但是它调控了基因的表达。 目前，DNA甲基化分析测序行业的黄金标准是亚硫酸氢盐测序。重亚硫酸盐测序(Bisulfate Sequencing)原理：通过重亚硫酸盐对DNA序列进行处理，未甲基化的胞嘧啶碱基(Cytosine)会转化为尿嘧啶碱基(Uracil)，而甲基化的胞嘧啶则不会改变，通过测序并比较序列信息，则会精确定位甲基化位点信息。 图1. 重亚硫酸盐测序的原理 工欲善其事必先利其器，想要做好实验，也必然离不开好的试剂帮助。小V在这里给您带来全新重亚硫酸氢盐转化试剂盒及配套方案，让您的科研更简单~ EpiArtTM DNA Methylation Bisulfite Kit 货号：EM101 产品优势 （1）操作时间短：DNA变性与亚硫酸氢盐转化一步到位，转化反应时间仅需140 min （2）转化效率高：可兼容100 pg - 2 μg 基因组DNA投入量，回收效率≥ 80%，未甲基化的胞嘧啶转化效率≥ 99% （3）兼容范围广：可高效转化动物、植物、微生物的细胞或组织提取的DNA，cfDNA，纯化的PCR产物等 （4）适用的下游应用：亚硫酸氢盐转化后的DNA适用于PCR扩增和NGS测序等下游应用。 6RV_t实验案例 （1）回收效率高 分别以1 μg 293 hg DNA和2 μg λ DNA为模板，参照各公司甲基化转化流程进行操作，检测样本回收效率。结果显示，相比于同类产品，Vazyme EM101具有较高的回收效率。 图2. 转化产物回收效率对比 （2）转化效率99%以上 分别以1 μg 293 hg DNA和2 μg λ DNA为模板，参照各公司甲基化转化流程进行操作。结果显示，相比于同类产品，Vazyme EM101具有较高的转化效率。 图3. 1 μg 293 hg DNA投入，Vazyme EM101和其他公司同类型产品转化产物电泳图。 图4. 2 μg λ DNA投入，Vazyme EM101和其他公司同类型产品转化产物电泳图。
图5. 转化效率对比 2× EpiArtTM HS Taq Master Mix 货号：EM201/EM202 可与EpiArtTM DNA Methylation Bisulfite Kit (Vazyme #EM101)配套使用，PCR产物的3’端带A，可直接克隆至T载体，并适用于ClonExpress® 快速克隆试剂盒(Vazyme #C112/C113/C115)以及5 min TA/Blunt-Zero Cloning Kit(Vazyme #C601)。 产品优势 （1）优化的缓冲体系，适用于亚硫酸氢盐转化处理后的PCR反应。 （2）相比普通PCR试剂，对亚硫酸氢盐转化后的DNA有更优的扩增效率、灵敏度和特异性。 （3）EM202含有蓝色染料，可在反应结束后直接进行电泳，使用方便。 基于Bisulfite conversion结合NGS的分析方法尽管仍存在降低基因组复杂度、损伤DNA等问题，但是仍为甲基化标志物在癌症早筛早诊研究中的重要方法之一。Vazyme会继续用多样的产品和方案帮助研究者在甲基化研究领域向前推进。 产品订购信息： 有任何疑问，欢迎联系您身边的诺唯赞人，我们将不懈努力，为您提供更优质的产品与服务！ |
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