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皮肤移植不仅是遗传检测的一个手段，而且也是研究组织免疫耐受性和移植免疫等理论的基本技术之一。 一、实验材料 1．实验动物选用60日龄同性别核心鼠群小鼠2只。 2．0.5％戊二基巴比妥钠、生理盐水、凡士林纱布、0.1％青霉素溶液、3％碘酸溶液、75％乙醇。 3．眼科弯镊、眼科弯剪、氧化锌胶布、固定板、缝合针、持针器、弯圆手术剪。 二、实验方法和步骤 1．背部皮肤移植法 (1)按30mg／kg体重，用0.5％戊二基巴比妥钠腹腔麻醉动物，待麻醉后，将鼠腹卧位固定在固定板上，剪去腰椎左右区域的被毛，常规消毒。 (2)采用Billingham氏法，术者用左手持眼科弯镊夹起直径约1cm被皮，右手用眼科弯剪沿镊下缘剪下被皮作为植片，顺手去除植片上的筋膜等结缔组织后放入培养皿中。 (3)另取一只小鼠同样进行上述两步操作。 (4)将第一、二只鼠的植片交叉移植到宿主身上，植片与预植部位应尽量吻合，再将吻合口6～7针缝合，用0.1％青霉素棉球轻擦创面，然后用三层细纱布覆盖伤口，外加一层纱布，最后用氧化锌胶布包扎即可。 (5)术后7～10d拆线并观察其生长情况。 2．尾根部皮肤移植法 (1)常规麻醉和备皮，将动物腹卧固定。 (2)用像皮筋或粗棉绳结扎尾部以止血，用21号直刃手术刀片在距结扎下位0.5cm处，分别在供皮和受皮鼠尾两静脉间做1cm长的纵行切口两个，上下横切两刀，切割时注意掌握深度，一般以切到结缔组织层为限。 (3)用刀背或其他器械将植皮片剥下，清除结缔组织，交换植皮，分别紧贴在受体被移植部位，外缚细纱布，加一层脱脂棉纱布，再用氧化锌胶布外缠，注意松紧合适为宜。 (4)术后10d拆包扎并观察其生长情况。 以上两种方法均要求在无菌条件下操作。 三、免疫反应及结果判断 1．自体皮肤移植的免疫反应和皮片生长过程一般可分为三个时期： (1)适应期：皮肤移植后1～4d，皮片生长良好，受体血管长入皮片而获得血液供应，因而外观皮片呈红润色泽。 (2)增长期：移植后5～15d，血管增生增多，供血更加充分，细胞生长分裂迅速而 活跃，皮片明显增厚。 (3)恢复期：15d以后皮片基本恢复正常。 2．异体皮肤移植的免疫反应和皮片生长过程不完全同于自体移植的情况，一般认为异体移植的免疫反应重于自体植皮。虽然也可分划为适应、增生和恢复三期，但早期的适应期长，在植皮一周后，由于免疫反应的作用，皮片由红变紫，表皮不脱落，也无再生，12～14d皮片仍然隆起，变干成痂，到15d后痂皮开始脱落，露出真发，这时才可被认为已进入增生期，使之真皮逐渐由受体的肉芽组织所代替，并进入恢复期。 3．结果判断。植入皮片生长100d以上而不发生排斥反应，而且供皮和受体均完全正常者，即可判断为供、受体主要组织相溶性抗原是相同的，并符合纯系的标准。 |
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