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“ CD 47是一种整合素相关蛋白，表达在肿瘤细胞表面，通过与吞噬细胞上蛋白SIRPα结合，抑制巨噬细胞吞噬功能。CD 47免疫检查点是肿瘤免疫治疗的一个潜在有效和广泛应用的靶点，因此许多抑制剂已经被开发出来，可以特异性地阻断CD 47-SIRPα信号通路。目前正在进行多项临床前和临床试验，涉及针对晚期实体肿瘤或血液病患者的，包含CD 47的抗体，anti-SIRPα融合蛋白，双特异性抗体等” 01 — CD47分子结构和表达 CD47最初被认为是整合素相关蛋白，首先在干细胞发现，后发现几乎所有正常组织中都有不同的表达模式，作为一种天然免疫检查点受体来控制体内的吞噬功能。 CD47是一个52 kDa糖蛋白，具有免疫球蛋白可变的N端结构域、5个跨膜结构域和一个短的C端胞内尾，胞内尾部有四种可变不同剪接异构体，从而形成4个亚型。CD47亚型2主要在造血细胞、血管内皮细胞和上皮细胞中表达，1亚型在角质形成细胞中表达，3和4亚型在神经元细胞、肠粘膜细胞和睾丸细胞中均有表达。 02 — CD47分子功能 CD47与其相应受体相互作用，包括血小板反应蛋白1(TSP1)和SIRPα，参与一系列生理过程中：细胞增殖、细胞凋亡、迁移和先天免疫应答。TSP1是一种主要通过与VEGF直接相互作用，来抑制血管生成的粘合剂糖蛋白。VEGFR2是通过VEGF信号传导，调节血管生成的重要调节因子，TSP1与CD47在内皮细胞上结合，抑制VEGFR2活化，从而破坏血管生成反应。CD47通过抑制VEGFR2的下游靶-一氧化氮信号，也负调控T细胞表达VEGF和 VEGFR2，影响血管生成。肺动脉高压TSP1- CD47信号被上调，和促进肺动脉血管病变，引起功能障碍。但TSP1-CD47信号通路在人类癌症中的作用仍不确定，有待探索。 CD47-SIRPa相互作用,是刺激细胞融合的关键过程及T细胞活化，特别是抑制巨噬细胞吞噬靶细胞。SIRPα主要表达在吞噬细胞，包括巨噬细胞和树突状细胞，其功能发挥，通过结合蛋白酪氨酸磷酸酶SHP2。CD 47与巨噬细胞上表达的SIRPα结合，可激活含酪氨酸磷酸酶的Src同源性2结构域，抑制吞噬突触中肌球蛋白的积累，从而最终产生don’t-eat-me的信号，保护肿瘤细胞免受巨噬细胞吞噬清除的影响。此外，CD47-SIPRα与DC的相互作用，抑制了DC的成熟，抑制了成熟DC产生细胞因子，从而抑制将肿瘤抗原递呈给CD8 T细胞。 巨噬细胞吞噬功能在肿瘤的监测和清除中起着重要的作用，而浸润肿瘤组织的巨噬细胞(即TAMs)与肿瘤的发生和临床结果密切相关。TAMs一般被细分为两种功能不同的表型，M1和M2，它们是根据不同的微环境而发展起来的。研究表明，M2型TAMS具有促进肿瘤生长和转移的作用。另一方面，经典的M1型TAMs具有抑制肿瘤进展的抗菌和抗血管生成功能。Sakakura等对头颈部鳞状细胞癌两种TAM表型与CD 47表达的相关性进行了研究，发现CD47过表达与肿瘤逃避吞噬有关，尤其是M2TAM在体外的吞噬作用。在肿瘤发生过程中，巨噬细胞通过“吃我”信号(如钙网蛋白)对肿瘤细胞的清除作用被“不吃一口”的CD 47信号所抵消，这种信号在多种癌症中经常过度表达。CD47与巨噬细胞上SIRPα的结合促进肿瘤血管的增殖，抑制效应T细胞的作用，从而导致肿瘤的进展。越来越多的数据表明，巨噬细胞吞噬癌细胞是通过抗CD47抗体刺激的，这种抗体可以阻断肿瘤细胞上的CD 47，增强免疫功能。 03 — CD47-SIRPα单克隆药物及融合蛋白药物 部分正在开发的单克隆抗体药物
搜集于网络，如有差错敬请指出。 Forty Seven公司的Hu5F9-G4是目前全球进展最好的Anti-CD47抗体药物。Hu5F9-G4是将人源化的5F9可变片段嫁接到人IgG 4支架上，以减少抗体依赖效应因子功能的产生，从而降低对正常CD 47表达细胞的毒性风险，从而构建Hu5F9-G4。Hu5F9-G4单药治疗已进入两个PhaseI临床试验，用于治疗复发或难治性实体肿瘤(NCT 02216409)和AML(NCT 02678338)，但尚未公布完整数据。作为人类第一阶段的CD 47抑制剂试验，NCT 02216409对每天用于晚期癌症患者的Hu5F9-G4进行评估，初步数据已经公布。Hu5F9-G4在启动剂量为1mg/kg时耐受性较好，随后为每周3mg/kg。Hu5F9-G4的典型不良反应是贫血、高胆红素血症、头痛、恶心和视网膜毒性。然而，这些事件通常是可逆的，很少严重。人源化单克隆抗体CC-90002是另一种CD 47检查点抑制剂，由Celgene公司开发，PhaseI结果不理想，已经终止。 — 双特异性抗体药物开发 双特异性抗体通过结合双重抗原表达的肿瘤细胞，可诱导更强的抗肿瘤免疫应答。目前，双靶向bsAb的发展还处于起步阶段，它们与健康细胞结合能力差，限制了CD 47对癌细胞的中和作用。高亲和力的bsAb是针对肿瘤细胞表面的CD 47和另一种特异性肿瘤抗原而设计的，这种方法可以FCR依赖的方式诱导对靶细胞的吞噬作用，并能再现抗体组合的协同作用。 2015年，Piccione等人。报告了第一次用双可变结构域免疫球蛋白格式开发针对CD 47和CD 20的bsAb。他们发现，相对于亲本抗体，CD20-CD47bsAb对CD 47的亲和力较低，但与CD 20保持较强的结合，从而促进其与肿瘤细胞的选择性结合。此外，CD20-CD47bsAb体内治疗减少了双抗原表达的淋巴瘤细胞数量，延长了生存时间。 Van Bommel等报道，另一种新设计的bsAbRTX-CD 47，含有CD 20靶向抗体（rituximab）单链可变片段，与CD 47阻断的单链变量片段串联融合而成。结果表明，RTX-CD 47不仅能特异性地清除CD 20+CD 47+恶性B细胞，对CD20-CD 47+细胞影响不大，而且还能协同增强其他抗体药物诱导的自身吞噬细胞的吞噬活性，如daratumumab (anti-CD38), alemtuzumab (anti-CD52) andobinutuzumab (anti-CD20)。 最近进入临床试验的bsAb是由Novimmune公司开发的NI-1701和NI-1801。Ni-1701是一种全人IgG分子，具有CD 47/CD 19双特异性抗原结合区。bsAbNI-1701可选择性阻断CD 47-SIRPα和CD 19(B细胞标志)的肿瘤细胞的相互作用。此外，NI-1701可以通过抗体的Fc臂向肿瘤吸引巨噬细胞和其他天然免疫杀伤细胞。靶向CD 19大大提高了其特异性和安全性，但同时也意味着靶标范围狭窄。ni-1701几乎可以用于治疗所有B细胞来源的肿瘤，如B细胞白血病和淋巴瘤.另一个改进的bsAb是NI-1801，这是一种针对CD47和mesothelin的双重抑制剂，它是一种广泛表达于不同实体肿瘤上的细胞表面抗原。因此，CD 47/mesothelinbsAb，NI-1801与NI-1701具有不同的抗肿瘤谱。NI-1701和NI-1801均已进入临床前试验。 — 靶向CD47的安全性问题 免疫检查点抑制剂除了有很好的疗效外，还具有一种新的毒性：与免疫系统有关的不良反应。一系列临床试验表明，靶向CTLA-4或PD-1可导致自身反应性淋巴细胞增多，从而增加自身免疫性不良反应的风险，如肺炎、结肠炎、肝炎和白癜风。 相比之下，靶向CD 47毒性会更小一些，因为这种方法使癌细胞完全被巨噬细胞吞噬，细胞死亡后几乎不释放细胞内容物。但考虑到CD 47在循环血细胞上的高表达，CD 47抑制剂的主要关注点是面临各种血液系统不良反应的风险。 主要参考文献： Sick EBr.J. Pharmacol. 2012 |
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