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如何成功进行小鼠灌胃给药实验?

 生物_医药_科研 2019-08-28

前言

经口灌胃给药是动物实验中最为常用的一种给药方式,尤其常用于生理、药理、免疫等多学科的实验动物建模,药物毒理、药效、剂量确定等研究中。该法操作简便,用药剂量准确,灌服溶液或混悬液均可,可反复给药,适用于小鼠、大鼠、家兔等多种实验动物。灌胃给药看似简单,实则大有学问,初学者常常因操作手法不当而伤到小鼠气道或食道,甚至创伤小鼠内脏引起小鼠死亡,导致实验失败。在此我们一起来看看灌胃给药注射技巧和经验。

灌胃给药法: 

使用灌胃针将药物溶液或混悬液直接灌入动物胃内的给药方式。

小鼠灌胃给药示意图 (来自丁香园)

药物循环途径:

食管→胃→小肠→小肠毛细血管→空回肠静脉→肠系膜上静脉→肝门静脉→肝→肝静脉→下腔静脉→右心房→右心室→血液循环。

特点:

操作简便:灌服溶液或混悬液均可,只需保证药物均匀稳定,可反复给药

安全性高:各种给药方式中,口服给药是最安全的;

可给药体积大:小鼠:0.5-1ml,大鼠:3-8ml;

生物利用度低:药物经胃肠道吸收,存在胃肠道、肝脏首过代谢,生物利用率相对较低;

实验动物受伤风险:容易对动物造成一定程度机械和心理影响。

常用实验动物一次最大灌胃量 (来自《心血管病实验动物学》)

灌胃给药工具:

针头呈倒水滴型的金属灌胃针配注射器。根据针管和针头尺寸分为不同型号,且有直头和弯头两类。

不同型号小鼠、大鼠灌胃针图示 (来自淘宝网)

一般根据小鼠年龄选择不同型号灌胃针,如裸鼠或5周龄以下幼鼠可使用6号,体重小于30g的小鼠使用8号或9号,体重大于30g的小鼠使用12号。

不同型号灌胃针长度、直径及适用范围(来自淘宝网)

实验操作:

1. 实验准备:灌胃前应禁食4~8小时,避免太多胃内容物阻碍灌胃注射以及影响药物吸收速率。

2. 药品吸取:根据小鼠体重计算好给药量,灌胃针和注射器安装好,吸取药品放在一旁备用。

3. 小鼠捉拿和固定:通过抓取尾巴捉拿小鼠,尽可能避免刺激动物,抓尾巴的部位不宜太靠近尾端。将小鼠放在粗糙面上,用左手(这里视操作者为右撇子)拇指和食指抓住鼠耳和头颈部皮肤,用左手手掌及小指无名指夹住尾部,使其头、颈和身体(口腔和食管)成一直线,腹部面朝上,注意要固定牢不能让其乱动,且对颈部皮肤不宜拉得太紧。若抓取不得当,切记要放开重抓,以免后续操作出问题。

4. 进针给药:右手持注射器从一侧嘴角进针入口腔,避开牙齿,经舌面紧沿上腭徐徐插入食管下段,动作轻柔避免损伤食道,如遇阻力,可轻微上下滑动,待小鼠吞咽时贲门肌肉松弛感觉阻力消失有落空感,缓慢推进,一般当针插入小鼠3~4cm,即灌胃针3/4时,回抽注射器无空气逆流表明针头已进入胃内,即可注射。如动物挣扎强烈,呼吸困难或进针阻力很大,应马上停止进针将针拔出,待动物恢复平静后再次尝试。注射完毕,松开小鼠观察如无呼吸异常,可确定灌胃成功。

大、小鼠灌胃操作是实验动物给药的基本技能,初学者一定要多加练习,熟练掌握正确的操作方法和技巧才可以进行试验。遇到各种情况找到原因,总结摸索,找到适合自己的技法。

参考文献:

[1]王宁萍,赵建宁,杨志伟.一种改进的小白鼠灌胃给药法[J].宁夏医学院学报,1999(01):60-61.

[2]方远书,何忠平,裘颖儿.实验小鼠的灌胃给药技巧[J].山东畜牧兽医,2014,35(10):90.

[3]戴支凯.大鼠及小鼠灌胃给药操作方法探讨[J].现代医药卫生,2015,31(11):1738-1740.

[4]霍勇主编.《心血管病实验动物学》.人民卫生出版社, 2011

[5]常用小型实验动物灌胃给药技术方法介绍 丁香通 2008

[6]灌胃给药后,为何我的小鼠频繁死亡?邦耀实验室 2018

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