NEJM综述：无创产前基因检测（NIPT）的回顾和展望

作者：李荣、漆洪波

单位：重庆医科大学附属第一医院产科

1997年香港中文大学卢煜明教授发现了孕妇血浆中存在胎儿游离DNA在的事实。2011年该技术被运用到临床，即无创产前基因检测（NIPT）。目前每年全世界约有百万的孕妇选择NIPT检测，是产前筛查技术发展的里程碑。近年针对NIPT的研究也见于各大杂志。结合当前研究报道，本文从临床应用的角度，对NIPT现状及发展趋势进行解读。

一、检测前咨询时的考虑要点

安全性：NIPT相比较羊穿而言，只是抽取孕妇静脉血，不会造成流产的风险。

不确定性：NIPT是一种筛查而不是诊断。

△胎儿染色体异常最终必须由羊水穿刺才能诊断。

△NIPT高风险必须经由羊穿来确诊才能明确胎儿的诊断。

局限性：普通版NIPT只是检查胎儿最常见的三种染色体病患病概率。

△21三体，18三体，13三体。

△NIPT结果“正常”只是特定三种染色体病的风险不大。

△这三种病约占新生儿染色体病的85%左右。

二、检测范围扩大

早期的NIPT一般都把检测限制在21，18，13号染色体三体和性染色体变异，现在的NIPT已经有了染色体“微缺失”检测，比如迪格奥尔格综合征（DiGeorge syndrome）、小胖威利综合征（Prader–Willi syndrome）等比较常见的染色体部分缺失疾病。 但是NIPT在染色体微缺失疾病筛查的表现没有染色体三体那么高效。

三、检测结果的准确性很高

和传统唐氏血清学筛查相比，NIPT对唐氏综合征及其他染色体异常的检出率更高。而且NIPT的假阳性远低于唐筛，避免了很多不必要的侵入型产前诊断。NIPT使羊水穿刺等高风险侵入产前诊断降低了40%~76%。

2016年美国医学遗传和基因组学会（ACMG）发表声明：无创产前基因筛查(NIPT)能够在不同年龄人群中替代传统的三体综合征筛查技术。 对于21、18、13三体综合征产前筛查来说，NIPT是目前最敏感的检测技术手段。

四、NIPT报告的咨询

首先要明确NIPT是一个筛查检测，结果分为“高风险”和“低风险”。“高风险”NIPT结果，需要侵入型产前诊断来确认；而“低风险”结果也绝不意味着“零风险”。

即使准确性最高的21三体高风险结果，仍有10% 左右最后确诊胎儿染色体正常。而18三体有20%左右，13三体和性染色体则有50%左右最后确诊胎儿染色体正常。在染色体微缺失疾病方面，则不如染色体三体的高效。以迪格奥尔格综合征为例，文献报道“高风险”NIPT结果只有21%左右被确认。

五、NIPT的技术局限

即使NIPT有很高的灵敏度和特异性，它仍然不是一个完美的检测。NIPT有可能产生的漏诊和误诊。

首先，NIPT虽然是针对胎儿游离DNA，但检测的却是母体和胎儿DNA的混合物。如果胎儿DNA的比例过低，就无法得出有意义的结果。

第二，胎儿游离DNA绝大部分来源于胎盘，如果胎盘DNA显示正常而胎儿本体DNA异常，NIPT就不能正确反应胎儿的状况，造成假低风险（假阴性）结果。

第三，母体本身DNA的异常，比如有染色体变异的肿瘤细胞，也会造成检测结果异常，而出现假高风险（假阳性）结果。

第四，当胎儿有畸形出现时，孕妇有多次流产史，已经生育过先天性疾病患儿等，在这些情况下医师往应建议羊水穿刺等侵入型产前诊断，来减少漏诊风险。

六、NIPT发展方向

第一，测序技术的进步，NIPT对于染色体微缺失检测的能力会有质的飞跃。

第二，靶向扩增游离DNA目标片段的技术，几万个目标SNP同时扩增的技术已经可以取得低覆盖度全基因组NIPT相似的效果。靶向扩增技术还可以运用到单个 DNA碱基致病变异的筛查上。结合家族病史，SNP技术也可以用来鉴别胎儿来自母体的遗传变异。所以，NIPT技术上已经可以用于单基因遗传疾病。

第三，利用游离在母体的胎儿细胞，结合单细胞测序技术，几乎可以涵盖所有已知致病DNA变异。预示着有100%胎儿DNA比例的单细胞NIPT也许正在变成现实。