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7. 细菌致病性 http://www./m/index.php?c=read&tid=420672 致病性则是病菌对寄主造成的破坏引起病变的特性。一种病菌可以在多种作物体内存活，具有寄生性，但并不一定都能引起病害，即无致病性。病原细菌与寄主细胞接触后，破坏寄主细胞的半透性，致使原生质中不溶性物质转变为可溶性而外渗，造成细胞水分、养分向间隙外渗，引起腐烂或斑点症状，初期为水渍状症状；或产生果胶酶分解细胞壁组织，引起崩解，症状多半是腐烂；或产生蛋白酶使寄主细胞失活，造成细胞坏死，引起坏死症状；或产生水解酶分解碳水化合物造成细胞死亡，引起斑点；许多细菌还可产生高分子量的多糖物质，阻塞导管，引起萎蔫；少数细菌能分泌激素刺激寄主形成畸形和癌肿。 大多作物初期受害，组织表面常为水渍状或油渍状、半透明，潮湿条件下有的病部有黄褐色或乳白色胶粘、似水珠状的菌脓；腐烂型往往有臭味。这是细菌病害的重要标志。 （三）细菌病害病株田间分布 细菌性病害发生初期有发病中心，后有随水流方向传播蔓延趋势。地势低洼、深水灌溉、苗势嫩绿、大风暴雨后及人为、虫害伤口后有利病害加重发生。一般高温、多雨、潮湿天气有利于细菌病害的发生。 二、重要细菌属及代表种 目前植物病原细菌属于原核生物界的厚壁菌门和薄壁菌门，共25个属，115个种，17个亚种，217个致病变种。但其中与生产有关系密切或重要的细菌属有8个，包括黄单胞菌属、假单胞菌属、欧氏菌属、棒形杆菌属、土壤杆菌属、噬酸菌属、和韧皮部杆菌属劳尔尔氏菌属。 1、黄单胞菌属（Xanthomonas） 黄单胞菌属为薄壁菌门的成员。菌体短杆状，多单生，少双生，单鞭毛，极生，没有荚膜，革兰氏染色反应阴性，严格好气性。代谢为呼吸型，没有发酵型。氧化酶反应弱或阴性，过氧化氢酶反应阳性。对营养要求不高，供给简单的有机碳素化合物和其他无机盐一般都能生长，一般在培养基上不产生色素，但菌体含有一种黄色的类胡萝卜素。营养琼脂培养基上形成密黄色、光滑或粘稠的菌落。绝大多数成员为植物病原细菌，为害作物引起叶斑坏死或枯死等症状，如水稻白叶枯病、水稻细菌条斑病、柑橘溃疡病、十字花科蔬菜黑腐病、油菜黄单胞菌、桃细菌性穿孔病等。该属细菌重要种有野油菜黄单胞菌（俗称甘蓝黑腐病菌X.campestris）、水稻黄单胞菌（X. oryzae），重要变种有野油菜黄单胞菌禾草致病变种（X. c.pv. graminis）、野油菜黄单胞菌柑桔致病变种（X. c.pv. citri）、水稻白叶枯病菌（X. oryzae pv.oryzae）。 2、假单胞杆菌属(Pseudomonas) 假单胞杆菌属是薄壁假单菌科的模式属。菌体短杆状或略弯，单生，鞭毛1-4根，极生；没有荚膜；革兰氏染色反应阴性，严格好气性，代谢为呼吸型，没有发酵型。氧化酶反应阴性，少数阳性，过氧化氢酶反应阳性。对营养要求不高，供给简单的有机碳素化合物和其他无机盐一般都能生长。营养琼脂培养基上形成灰白色、圆形、隆起的菌落，有荧光反应，有些种产生褐色素扩散到培养基中。它的寄主范围极广，多数为腐生性的，有些是植物内寄生菌，也有一些是重要的植物病原菌，如丁香疫病菌等，可侵染50多个科的数百种多种木本植物和草本植物，引起叶斑或坏死及茎秆溃疡等症状。如水稻细菌性褐斑病、烟草野火病、桑疫病等。 3、劳尔氏菌属(Ralstonia) 从假单胞菌属中分离出，其中茄科植物的青枯菌(Ralstoniasolanacearum)是众所周知的重要病原菌。普通细菌培养基上菌落隆起、光滑、湿润、灰白色至白色。有些菌株在培养基上可分泌一种水溶性褐色素而使培养基变褐色。在灭菌的马铃薯块上，则能使其变深褐色至黑色。 病菌的寄主范围很广，可侵染30多个科的100多种作物，马铃薯、烟草、花生、番茄等茄科青枯病发生非常严重。种下分类多样化，不同菌株的寄生专化性不同，寄生在番茄、马铃薯、花生上是同一生化型，而烟草上的则是另一生化型。典型症状是全株呈现急性凋萎，病茎维管束变褐，横切后用手挤压可见有白色菌脓溢出。 病菌可以在土中长期存活，是土壤习居菌。病菌可随土壤、灌溉水和种薯、种苗传染与传播。侵染的主要途径是伤口，高温多湿有利发病。 4、噬酸菌属(Acidovorax) 该属与从假单胞菌属相似。菌体杆状，直或略弯，革兰氏染色反应阴性。鞭毛通常为单极生根，少有2-3根极鞭。重要的植物病原噬酸菌有瓜类果斑病菌（A.avenae subsp.avenae）,造成植物组织坏死和腐烂。 5、欧文氏菌属(Erwinia) 欧文氏菌属是薄壁菌门肠杆菌科的一个成员。菌体短杆状，多双生或短链状，偶单生，除一个种没有鞭毛外，其余生多根鞭毛。革兰氏染色反应阴性，兼性好气性，代谢为呼吸型或发酵型。无芽孢，营养要求有的需要特殊的生长物质，供给有机氮化合物，一般生长较好；一般不产生色素，但有的菌体有色素。营养琼脂上菌落圆形，隆起灰白色。氧化酶反应阴性，过氧化氢酶反应阳性。大多数成员为好气性，部分为兼性厌气。 欧文氏菌属大多数是植物致病菌，受害后引起作物坏死、溃疡、萎蔫及软腐等症状。如十字花科软腐病、梨火疫病、胡萝卜软腐病、马铃薯黑胫病等。可分为两个组群，一是以梨火疫病菌为代表的解淀粉菌群，二是以胡萝卜软腐菌为代表的软腐菌群。软腐菌群寄主范围很广，包括十字花科、禾本科、茄科等20多个科的数百种果蔬和大田作物，大多由伤口侵染或介体传带侵染，产生大量的果胶酶，使植物组织的薄壁细胞浸离降解，引起肉汁或多汁的组织软腐，尤其在厌氧条件下最易受害，大白菜软腐病常在贮藏期间表现症状。常见种有胡萝卜欧文菌（E. carotovara）和梨火疫病（E. amylovara）。 6、韧皮部杆菌属（Liberobacter） 韧皮部杆菌属是新设立的属，这是一类在韧皮部中寄生危害的病原菌，以柑桔黄龙病菌为代表，至今尚未能人工培养，但已在电镜下观察菌体梭形或短杆状，革兰氏染色反应阴性。包括两个种：在亚洲发生的引起柑桔黄龙病Candidatus Liberobacter asiaticum，发病的最适温度为30℃左右，传播介体为亚洲桔虱。另一种为在非洲发生的Candidatus Liberobacter， 引起青果病（citrusgreening），发病的最适温度为20~25℃，由非洲木虱传染。 7、土壤杆菌属(Agrobacterium) 属薄壁菌门根病菌科，土壤习居菌，菌体短杆状。单生或双生，鞭毛1-6根，周生或侧生，没有荚膜，无芽孢，好气性，代谢为呼吸型，革兰氏染色反应阴性，氧化酶反应阴性、过氧化氢酶反应阳性。对营养要求不高，但有的需要供给氨基酸和生长素。营养琼脂培养基上形成黏性的灰白色至白色圆形、隆起、光滑菌落，不产生色素。 土壤杆菌属包含5个种，除放射性土壤杆菌（A.radiobacter）外，其余4个种都是植物病原菌，属兼性寄生菌，常引起木本植物的瘤肿和发根。其中根癌土壤杆菌（A. tumefaciens），寄主广泛，可侵害90多科300余种双子叶植物，尤以蔷薇科为主，引起桃、苹果、葡萄、月季的根癌病。 8、棒形杆菌属(Clavibacte) 棒形杆菌属是以前的棒状杆菌属建立起来的，属厚壁菌门。菌体短杆状至不规则状，有时呈棒状。无鞭毛，无芽孢，没有荚膜，革兰氏染色反应阳性，严格好气性，代谢为呼吸型，氧化酶反应阴性、过氧化氢酶反应阳性。营养要求较高，生长较慢；细胞内有黄或紫的色素或者没有色素。作物受害主要引起萎蔫、溃疡等症状。马铃薯环腐棒形杆菌可侵染为害5种茄属植物，在我国只在马铃薯上为害 2.细菌性病害症状的观察 传染性病害的病原有真菌、细菌、病毒、类菌原体、类病毒、线虫及寄生性种子植物。这些病原所致的病害都具有传染性，在田间发生时，一般呈分散状分布，具有明显的由点到面，即由一个发病中心逐渐向四周扩太的发展过程。有的病害在田间扩展还与某些昆虫有联系。根据“四大传染性病害的田间区别”作初步判断。传染性病害的各类病原除病毒、类菌原体及类病毒外，在病部都产生病征。真菌病害的病征很明显，在病部表面可见粉状物、霉状物、粒状物、锈状物等各种特有的结构；细菌病害在潮湿条件下一般在病部都可见滴状或一层薄薄的脓状物，通常呈黄色或乳白色。干燥时干涸成为小珠状、不定形粒状或发亮的薄膜。这些是细菌的溢脓，是细菌病害的病征。作物细菌病害表现各种类型的症状，不同属的细菌侵染作物后引起的症状有所不同。 棒形菌属细菌主要引起萎蔫，假单胞菌属细菌主要引起叶斑和叶枯(少数枝枯、萎蔫)，黄单胞菌属细菌主要引起叶斑和叶枯，土壤杆菌属细菌主要引起瘤肿(少数畸形)，欧文氏菌属细菌主要引起软腐(少数萎蔫和枝枯)，劳尔氏菌属主要引起青枯萎蔫。一般来说，叶斑或叶枯型的细菌病害，不是假单胞杆菌属就是黄单胞杆菌属细菌引起的。至于一种软腐型的细菌病害，首先要考虑是由欧文氏菌属细菌引起的；萎蔫型细菌病害的情况比较复杂，但是根据我国目前发现的情况，主要是棒形菌属和假单胞杆菌属细菌引起的。由于假单胞杆菌和黄单胞杆菌这两个属包括将近3/4的作物病原细菌，所以叶斑和叶枯是最常见的细菌病害。 许多细菌性病害的病斑带有水渍状，有时可以作为诊断的特征，但并不是所有细菌病害都是这样。例如，黄单胞杆菌属细菌侵染后形成水渍状病斑的可能性大一些，而假单胞杆菌属侵染引起的病斑就较少表现水渍状，有的只在侵染前期或空气湿度很高时才表现一定的水渍状。 病部有时有菌浓排出。菌浓灰白色到黄色，珠状或其他形状，干燥后在表面形成菌膜或胶粒。菌浓在叶面上最常见，有时茎部肉状果也有菌浓排出。但并不是所有细菌病害都有菌浓，所以只能作为诊断的参考。 蔫萎型细菌病害，将病茎横切，可见维管束变褐色，用手挤压，可从维管束流出浑浊的黏液，利用这个特点可与真菌性枯萎病区别。也可将并组织洗净后，剪下一小段，在盛有水的瓶里插入病茎或在保湿条件下经一短时间，从切口处有混浊的细菌溢出，这是诊断细菌病害比较简便而相当可靠的方法。 腐烂型细菌病害的病部软腐、粘滑，无残留纤维，并有硫化氢的臭气。而真菌引起的腐烂则有纤维残体，无臭气。 3.细菌性病害的显微镜检查 病组织的病原显微镜检查是诊断细菌病害的简单而又可靠的方法。一般通过病状诊断和细菌溢检查，即能准确判断一种病害是否为细菌病害。研究一种细菌病害，先要确诊是由细菌的侵染引起的。无论是有病的或健康的作物，表面都有大量的细菌，如果不经过初步鉴别就进行分离培养等工作，有可能将一些腐生性细菌当作病原细菌，这不但浪费时间，并且会作出错误的结论。 细菌侵染引起的病害，受害部位的维管束或薄壁细胞组织中，一般都有大量的细菌。检查时，要选择典型、新鲜、早期的病组织，先用流水冲洗干净后吸干，用灭菌剪刀将病部剪下，略带健康组织，大小不超过0.5—1厘米，平放置于消毒载玻片中央，加入灭菌生理食盐水或灭菌水一滴，然后用灭菌剪刀或解剖针将病组织从中心处撕破，加上盖玻片，进行显微镜检查。镜检时光线不宜太强，放大倍数先低倍后高倍，以100-400倍为宜。注意观察病组织四周，如发现有大量细菌似云雾状溢出，即可确定为细菌病害。 按照Koch法则，从病组织分离获得纯培养细菌后，必须测定它对寄主植物的致病性。一般的工作顺序是先测定致病性，然后再研究细菌学和生理生化性状。细菌一般采用稀释分离法，病原细菌在组织中的数量很大，稀释后培养可以使病原细菌与杂菌分开形成分散的菌落，容易得到纯培养。少见的或新的细菌病害，当镜检后确定病原为细菌时，除采用柯赫氏法则证实这种细菌为该病的病原外，要确定该病原细菌的属、种时，还要观察记载细菌的形态，有的还需要进行噬菌体测定。 第三只眼 2014-10-28 10:13 4.细菌性病害诊断应注意的问题 病害诊断是一项复杂细致的工作，要作出正确诊断，至少必须注意以下几点： (1)注意症状的变异性和复杂性。虽然病害症状通常表现出相对的稳定性，但是病害症状并不是固定不变的，同一种病害往往因品种、环境条件、发病时期和发病部位等的不同而异。 (2)注意避免病部上病原菌与腐生菌的混淆。 (3)注意把病害与虫伤、机械伤等伤害区分开来。 (4)注意把并发性病害(伴随发生的病害)与继发性病害(继前一种病害后发生的病害)区分开来。 (5)注意品种抗性对症状的影响。 (6)注意症状发生的范围与病菌分布的不一致性。 ⑺检查细菌溢是简便而可靠的诊断方法，但有时也可能发生差错： ①作物细胞中的颗粒状内含物，有时也从切口流出，但是这种颗粒都比较大，大小不一致，数量比较少而且分散，细菌溢的颗粒比较小而且均匀，大量集中流出； ②作物表面的细菌和酵母菌等可在叶片的分泌物中繁殖，检查时也可能看到有颗粒从组织上扩散开来，但大小不均匀，有的比较大。仔细调节显微镜的焦距，可以看到颗粒是从叶面扩散出来的； ③作物腐烂组织上检查到的细菌溢，也有可能是组织腐烂后在上面滋生的腐生性细菌。最好是检查刚开始发病的部位，多检查几次再作判断； ④萎蔫型的病害，要注意区分细菌侵染的部位和表现症状的部位，要从侵染的部位检查。 细菌引起的瘤肿，并不是任何部位都能检查到细菌溢，要从内部新鲜病组织中检查，并且一般细菌溢的量也比较少。 |
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