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利用茎尖分生组织培养脱毒生姜苗,已成为防治病毒和提高生姜产量及品质的主要方法。脱病毒生姜生长快、长势旺、抗病、耐高温、抗逆境能力显著增强,姜块色泽鲜亮、均匀整齐、辣味浓、品质明显改善,同时能大幅度提高产量,在生产上脱毒姜种比原品种增产50%以上,增产效益十分显著。
1、生姜脱病毒
植物脱毒一般采用热处理培养:即在35～38℃条件下持续对种苗处理5～6周,使病毒钝化失活。但由于热处理要求条件高,处理时间长、苗数少,成本高,而且只能去掉部分病毒,在生产上难以应用。采用热处理结合分生组织培养的方法,脱毒效果很好。
具体做法:是把切取的生姜芽洗净,在50℃高温下热处理5分钟,杀死部分病毒,然后在超净工作台上对材料进行消毒、解剖剥离,切取含分生组织的茎尖生长点0.2～0.3mm,接种到(MS+BA2.0+IAA0.2)培养基上,放在25±2℃下暗培养,10天后有愈伤组织长出转入光培养,光照强度为1 500～2 000勒克斯,光照时间12小时/天。3周后生长点周围开始分化出芽从,当芽丛长到2～3cm时,将丛生芽切成单芽转入到(MS+BA5.0+IAA0.1)继代培养基中培养,每瓶5～6株,以后每25～30天继代1次,可繁殖出大量的脱毒试管苗,移栽前进行壮苗生根培养。
2、脱毒苗鉴定
引起生姜种性退化的主要病毒为黄花叶病毒(CMV)和烟草花叶病毒(TMC),病毒检测是生姜茎尖脱毒不可缺少的环节。
检测生姜脱毒苗的方法主要有目测法和指示植物法:
①目测法。是利用脱毒苗和带毒苗在形态、生长势等生物学特征上的差异来鉴别。脱毒苗生长快、健壮、叶片平展,叶色浓厚,不带皱纹。而带毒苗生长势弱,叶片卷曲,叶色淡且出现花叶斑纹,褪绿斑点等;
②指示植物检测法。常用曼陀罗、心叶烟、苋色藜等作指示植物,具体作法是剪取待测生姜叶片加入缓冲液按常规研磨提取出汁液,再将汁液接种到指示植物叶片上,表现系统花斑、局部枯斑和褪绿斑等症状者为带毒株。
3、脱毒姜种生产
脱毒姜种划分为三代,脱毒试管小苗为原原种苗,先在温室或防虫网室的苗床中育成大苗,再移栽生产出脱毒生姜原种,原种栽入大田生产出脱毒生姜栽培种。
1).脱毒生姜原种生产经过病毒鉴定的脱毒苗在移栽前需要进行壮苗生根培养和炼苗驯化,将3～4cm高的小苗转接到(MS+IAA0.2)生根培养基上进行培养,15天左右有白色根形成,25天后即可进行炼苗移栽。为了防止脱毒苗感染病毒,原种生产应在温室或防虫网室内进行。先将炼苗基质珍珠岩提前10天用10%甲醛液处理消毒后备用。移栽前把试管苗瓶从培养室取出,打开瓶盖在室温下炼苗2～3天,再将试管苗取出用清水洗干净培养基,假植在消毒处理过的珍珠岩基质上(直接用营养块炼苗效果更好)。浇透水后搭上小拱棚,盖上薄膜,注意保湿保温,温度控制在20～30℃,湿度90%左右,长出新根后逐步揭膜炼苗,30天后把炼苗成活的脱毒苗移栽到原种生产的防虫网室内,加强管理,前期每周施营养液1次,中后期逐渐减少次数。
2).脱毒种姜生产按当地常规种植方法,选择土质肥沃、浇水条件好、无病的地块进行。
4、脱病毒生姜的增产效果
脱病毒生姜色泽鲜黄,均匀整齐,辣味浓,品质好,产量高,在生产上去病毒苗比原品种增产50%以上。但脱病毒苗在生产上应用3～5年后,随着生产过程中感染病毒程度加重,需要更换新的脱毒苗。为了促进和有效地保证这一技术在生产上的示范推广,应建立生姜脱毒苗的三级良种繁殖体系,逐步实现生姜生产脱毒化,从而大幅度提高生姜的产量和品质,产生更大的经济效益和社会效益。 生姜生产脱毒繁殖： （1）脱毒姜种工厂化生产设施
①组培室。建立组织培养室，购置必要的生姜组培脱毒用品。
②炼苗车间。现代化炼苗车间要求车间内温度、光照、湿度可根据需要随时调节，使环境条件保持在炼苗所需的最佳状态，有利于壮苗的培育，大大提高工作效率和试管苗的成活率。
③原原种防虫网室。为确保原原种不被病毒再侵染，需建立防虫网室，种植脱毒姜试管苗，进行脱毒姜原原种的生产，并进行病毒检测。
④原种圃和生产种繁育基地。原种圃和生产种繁育基地是两级繁种田，必须保证无病（根茎腐烂病）、无毒［黄瓜花叶病毒（CMV）、烟草花叶病毒（TMV）］生产。
（2）脱毒姜种繁殖基地选择
脱毒姜的三级繁种田选择地处海拔高的山地较好，夏季凉爽，土壤不积水，通透性好，不适宜各种病毒的发生和传播。若无山地条件，则应选择远离生姜生产田的地块建立生姜繁种田。
（3）脱毒姜防病除毒途径
脱毒姜繁种田在选用无毒、无病姜种和无病地块情况下，进行严格的水肥管理。基肥使用经过生物发酵的羊粪和豆饼，不使用其他圈粪和土杂肥，追肥用豆饼和有机肥等。浇水用无污染水源，并用输水管将水直接送到地头。在蚜虫、姜螟、蓟马为害前，及时喷药预防，消除病菌、病毒的传播途径，保证姜种的无病、无毒生产。
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