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miRNA分析.ppt

 Lorry蕾子 2019-11-27
文档介绍:miRNA的研究背景 DNA、RNA和蛋白质是生命科学研究的三大主题,DNA、RNA和蛋白质之间的关系是经典和现代中心法则的核心内容;通常情况下,RNA是DNA和蛋白质之间的“过渡”。近年来的研究表明,RNA在生命进程中扮演的角色远比我们早前设想的更为重要。 miRNA在正常生理过程中的作用 例如:miR-273和lys-6编码的miRNA,参与线虫的神经系统发育过程;miR-430参与斑马鱼的大脑发育;miR-181控制哺乳动物血细胞分化为B细胞; 另有研究人员发现许多神经系统的miRNAs在大脑皮层培养中受到时序调节,表明其可能控制着区域化的mRNA翻译。 对于新的miRNA基因的分析,可能发现新的参与器官形成、胚胎发育和生长的调节因子,促进对癌症等人类疾病发病机制的理解。 miRNA的检测手段 Northern Blot 主要手段,敏感度低、耗时长、RNA 的用量较大。 实时荧光定量PCR:茎环结构的逆转录引物能与miRNA 3‘端部分结合,在逆转录酶的作用下进行逆转录反应,然后特异的正反向引物和SYBRGreen荧光染料(或探针)共同参与的定量PCR反应体系,实现对逆转录产物进行定量检测。 基因芯片技术 结语 长期以来,分子生物学研究的重点都集中在蛋白质编码基因上,而微RNA的发现和研究则提示我们应该相对更多地从这方面了解生命的奥秘,这些微RNA可能编码生命活动的重要调控元件。微RNA还有很多问题需要我们去研究:它们的作用机理究竟是什么,到底具有何种功能,它们是如何识别潜在的靶mRNA的,这些miRNA间相互调节作用的结果是什么,以及它们的时序性和特异性是如何调控的等等。随着研究的深入,相信其在研究人类的疑难杂症的发生机理和治疗等方面均具有较为深远的意义和作用。总之,对于微RNA基因的研究将是生命科学领域研究的热点,也是揭示生命奥秘的又一大里程碑。 miRNA简介

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