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要做mtt实验，药不溶于水，干怎么配呢？ 用dmso的话，怎么控制它的量，怎么过滤 用DMSO稀释，配成1mg/ml，再10倍的稀释（可以用培养液稀释到10负n次方）这样千分之一的DMSO对细胞的毒性很小，不用过滤。 后面的稀释液用无菌的就可以了。 你的意思是，用dmso直接配成1mg/ml的储备液，在用培养基稀释 不过滤也能保证无菌吗？ 是的。因为DMSO是剧毒所以细菌之类的在里面长不起来。 请问： 1）用DMSO稀释，配成1mg/ml，（这时DMSO浓度是100%），再10倍的稀释（这时是10%），取20ul到20ul 中，（这时是1%）吧？还是再同样稀释到 0.1%？ 2）所有的有机提取物或说是不溶于水的物质都可以用DMSO 溶吗？如果是按上述方法逐级稀释的话，药物浓度也就跟着下来了，初筛的话药浓要达多少的？是终浓度是100ug/ml吗？可以直接加1mg的药然后加100ul的DMSO，再加900ul 的稀释液进行稀释吗？这样终浓也是1%的，而且药浓是100ug/ml，这样可以吗 ？ 3）稀释液是用培养基是吧，有人也说可以用PBS缓冲液 或三蒸水，我也不知道大家用的都是什么的，请指教 4）有机溶剂的溶解可以用别的吗？不过查阅相关文献，好象对于不同细胞株，不同有机试剂对他们的影响不近相同，不知道有没有比较好的通用的溶剂和浓度能满足不同的药物溶解和对细胞毒害作用小的要求。 多谢，多谢。 DMSO不太行的话可以试试超声,我们这里就是这么做的 看看有机溶剂，比如说乙醇，适不适合你的药物， 1 如果是在sigma 买的药：那里会有关于要物的详细信息。如果不容水通常用DMSO 或者乙醇溶。 如果自己合成的药物最好自己尝试了。 一般不容水的药物在DMSO 和乙醇中的溶解量是4mg/ml 左右，配药的浓度 不要太高度。所以你配药时可配制10－2 ，10－3MOL/L 的母液。 2 具体操作：先确定你要配制母液的浓度：如 10－3 M。称药后加DMSO溶解就可以了。 称取2到5mg 的药物。 需要加入的DMSO的体积ml=药物的质量mg× 10－3，再除以药物的分子量。 3 药物配好后混匀，必须达到透明的程度。10ul 分装，高浓度分装比较好。 4 药物的稀释10ul 加990ul稀释液,得到10－5M. 取100ul ,加900ul.得到药物的浓度是10－6M. 依次类推，直到你需要的浓度。 5 稀释液最好是无血清的培养基。 6 DMSO 配好的药物，如果短时间给药2h，不用过滤消毒。长时间给药24h，要考虑到无菌，保险起见，加药前要过滤。最好是算好你要用的药量，一次过滤的多一点。 |
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